中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
1. 引言 | 第11-15页 |
2. 材料与方法 | 第15-36页 |
2.1 实验材料 | 第15-21页 |
2.1.1 实验仪器 | 第15-16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 菌株、病毒株、载体、目的基因 | 第17-18页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第18-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-36页 |
2.2.1 合成病毒株Rotateq-P[8]、P[5]、Rorarix、RRV-VP8*区基因序列 | 第21-22页 |
2.2.2 扩增LLR株VP8*基因序列 | 第22-23页 |
2.2.3 扩增P[14]-VP8*基因序列 | 第23-24页 |
2.2.4 PCR扩增产物的胶回收 | 第24-25页 |
2.2.5 携带VP8*编码基因的p ET30a表达质粒的构建 | 第25页 |
2.2.6 携带VP8*基因的pET-30a表达质粒的转化 | 第25-26页 |
2.2.7 重组质粒的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
2.2.8 目的蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第27-31页 |
2.2.9 BCA法测定His-VP8*重组蛋白浓度 | 第31-32页 |
2.2.10 唾液表型测定 | 第32-33页 |
2.2.11 建立EIA唾液结合分析方法 | 第33-34页 |
2.2.12 建立EIA寡糖结合分析实验 | 第34-36页 |
3. 实验结果 | 第36-46页 |
3.1 RV VP8*区基因序列的PCR扩增结果 | 第36页 |
3.2 携带VP8*编码基因的表达质粒的构建和鉴定 | 第36-37页 |
3.3 目的蛋白表达、纯化与鉴定 | 第37-40页 |
3.4 BCA法测定His-VP8*重组蛋白浓度 | 第40页 |
3.5 唾液表型的检测 | 第40页 |
3.6 VP8*蛋白与唾液HBGAs的结合实验 | 第40-44页 |
3.7 寡糖结合实验 | 第44-46页 |
4. 讨论 | 第46-50页 |
5. 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
综述 | 第56-66页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录一 | 第66-67页 |
附录二 | 第67-72页 |
附录三 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |