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探究肿瘤相关基因GIPC2的表达调控机制

摘要第4-5页
Abstract第5页
一 引言第6-18页
    1.1 GIPC2基因第6-7页
    1.2 基因表达调控方式第7-15页
        1.2.1 转录水平调控第8-12页
        1.2.2 转录后水平调控第12-15页
        1.2.3 表观水平调控第15页
    1.3 双荧光报告系统研究基因表达调控第15-18页
二 材料和方法第18-28页
    2.1 实验材料第18-20页
        2.1.1 细胞第18页
        2.1.2 主要试剂第18页
        2.1.3 主要试剂盒第18页
        2.1.4 主要耗材,仪器及设备第18-20页
        2.1.5 溶液配制第20页
    2.2 实验方法第20-28页
        2.2.1 细胞培养、传代、复苏及冻存第20-21页
        2.2.2 基因组DNA提取,RNA提取第21-22页
        2.2.3 快速琼脂糖凝胶DNA回收第22-23页
        2.2.4 质粒中量提取第23-24页
        2.2.5 RIPA法裂解细胞提取总蛋白和BCA法测定蛋白浓度第24页
        2.2.6 Westhern Bolt第24-25页
        2.2.7 人和大鼠GIPC2基因翻译起始位点上游不同长度截短片段重组质粒构建和人和大鼠外显子、内含子高度同源序列重组质粒构建第25-26页
        2.2.8 细胞转染和双荧光检测第26页
        2.2.9 Vista及NCBI比对序列同源性和MethPrimer预测序列CpG island第26-27页
        2.2.10 异丙醇/乙酸钠纯化DNA第27页
        2.2.11 体外构建目标序列甲基化重组质粒第27-28页
        2.2.12 逆转录及实时定量PCR检测基因表达第28页
三 实验结果第28-44页
    3.1 GIPC2的保守性第28-29页
    3.2 人和大鼠G/PC2核心启动子第29-31页
    3.3 GIPC2的非编码区对GIPC2的调控作用第31-38页
    3.4 α-KG对GIPC2的调控作用第38-40页
    3.5 5'aza对GIPC2的调控作用第40页
    3.6 GIPC2的编码区对GIPC2的调控作用第40-44页
四 讨论第44-48页
总结第48-49页
参考文献第49-56页
附录第56-59页
英文名词及缩写第59-60页
致谢第60-61页
个人简历第61-62页

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