| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| ·金黄色葡萄球菌致病性及其细胞表面的纤溶酶原受体 | 第10-15页 |
| ·金黄色葡萄球菌致病性及其毒力因子 | 第10页 |
| ·纤溶系统 | 第10-13页 |
| ·金黄色葡萄球菌利用Plg作用机理 | 第13-15页 |
| ·脂蛋白(a)的结构及其性质 | 第15-17页 |
| ·脂蛋白分类及脂蛋白(a) | 第15页 |
| ·Lp(a)的结构 | 第15-16页 |
| ·Lp(a)的生理作用 | 第16页 |
| ·Lp(a)的致病性 | 第16-17页 |
| ·立题依据 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·仪器与材料 | 第18-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-20页 |
| ·质粒和菌株 | 第20-21页 |
| ·PCR引物 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·化学贮存液 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-36页 |
| ·金黄色葡萄球菌CMCC26003基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·pUC57-KIV_(10)质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·Eno、Eno△434及KIV_(10)基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·Eno、Eno△434及KIV_(10)基因的扩增产物的纯化 | 第26-27页 |
| ·Eno、Eno△434、KIV_(10)基因及载体片断的酶切及纯化 | 第27-28页 |
| ·酶切Eno、Eno△434及KIV_(10)片断与pASK-IBA37载体的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第28-29页 |
| ·菌落PCR鉴定阳性菌落 | 第29-30页 |
| ·工程菌培养 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE及Dot blot分析 | 第30-31页 |
| ·rEno、rEno△434及rKIV_(10)的纯化 | 第31-32页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第32页 |
| ·ELISA检测rEno、rEno△434与Plg、Lp(a)、rKIV_(10)、LDL的结合实验 | 第32-33页 |
| ·ELISA检测EACA对rEno、rEno△434与Plg、Lp(a)、rKIV_(10)结合的抑制实验 | 第33-35页 |
| ·ELISA检测Lp(a)对rEno、rEno△434与Plg结合的抑制实验 | 第35页 |
| ·亲和色谱层析(Pull down)检测rEno、rEno△434与Lp(a)、LDL的结合(Western Blot检测) | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-47页 |
| ·质粒和基因组的提取 | 第36-37页 |
| ·pUC57-KIV_(10)质粒的提取 | 第36页 |
| ·金黄色葡萄球菌CMCC26003基因组的提取 | 第36-37页 |
| ·Eno、Eno△434、KIV_(10)目的基因扩增结果 | 第37-38页 |
| ·Eno基因的扩增结果 | 第37页 |
| ·Eno△434基因的扩增结果 | 第37-38页 |
| ·KIV_(10)基因的扩增结果 | 第38页 |
| ·Eno、Eno△434、KIV_(10)基因及载体pASK-IBA37的酶切产物 | 第38-39页 |
| ·Eno基因酶切产物 | 第38页 |
| ·Eno△434基因酶切产物 | 第38-39页 |
| ·KIV_(10)基因酶切产物 | 第39页 |
| ·pASK-IBA37酶切产物 | 第39页 |
| ·Eno、EnoA434、KIV_(10)的连接转化结果 | 第39-41页 |
| ·Eno的连接转化结果(菌落PCR鉴定Eno阳性克隆) | 第40页 |
| ·Eno△434的连接转化结果(菌落PCR鉴定Eno△434阳性克隆) | 第40页 |
| ·KIV_(10)的连接转化结果(菌落PCR鉴定KIV_(10)阳性克隆) | 第40-41页 |
| ·rEno、rEno△434、rKIV_(10)的表达结果 | 第41-43页 |
| ·rEno表达,用SDS-PAGE检测结果 | 第41-42页 |
| ·rEno△434表达,用SDS-PAGE检测结果 | 第42页 |
| ·rKIV_(10)的表达,用Dot blot检测结果 | 第42-43页 |
| ·rEno、rEno△434、rKIV_(10)的蛋白纯化 | 第43-44页 |
| ·rEno蛋白纯化结果 | 第43页 |
| ·rEno△434蛋白纯化结果 | 第43页 |
| ·rKIV_(10)蛋白纯化结果 | 第43-44页 |
| ·ELISA检测rEno、rEno△434与Plg、Lp(a)、rKIV_(10)、LDL的结合实验: | 第44-45页 |
| ·ELISA检测rEno、rEno△434与Plg的结合实验 | 第44页 |
| ·ELISA检测rEno、rEno△434与Lp(a)、LDL的结合实验 | 第44-45页 |
| ·ELISA检测rEno、rEnoA434与rKIV_(10)的结合实验 | 第45页 |
| ·ELISA检测EACA对rEno、rEno△434与Plg、rKIV_(10)、Lp(a)结合的抑制实验: | 第45-46页 |
| ·ELISA检测EACA对rEno、rEno△434与Plg结合的抑制实验 | 第45-46页 |
| ·ELISA检测EACA对rEno、rEno△434与Lp(a)结合的抑制实验 | 第46页 |
| ·ELISA检测EACA对rEno、rEno△434与rKIV_(10)结合的抑制实验 | 第46页 |
| ·ELISA检测Lp(a)对rEno、rEno△434与Plg结合的抑制实验 | 第46-47页 |
| ·亲和色谱层析(Pull down)检测rEno、rEno△434与Lp(a)、LDL的结合实验(用Western blot检测) | 第47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48页 |
| 6 本论文的创新之处 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
