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敲除CCR3基因通过PI3K/Akt信号通路抑制小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒的实验研究

摘要第3-7页
ABSTRACT第7-10页
中英文缩写词第14-15页
引言第15-18页
第一部分 PI3K/Akt信号通路参与小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒的研究第18-38页
    1.1 实验材料第18-22页
        1.1.1 实验试剂第18-19页
        1.1.2 主要实验设备第19-20页
        1.1.3 主要试剂的配制第20-22页
        1.1.4 实验动物第22页
    1.2 实验方法第22-28页
        1.2.1 实验分组第22页
        1.2.2 野生型小鼠嗜酸性粒细胞原代培养第22-23页
        1.2.3 野生型小鼠嗜酸性粒细胞瑞氏染色第23页
        1.2.4 流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F表达第23-24页
        1.2.5 CCK8检测不同浓度的PI3K抑制剂及激动剂对嗜酸性粒细胞增殖活力的影响第24页
        1.2.6 ELISA检测嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的表达第24-25页
        1.2.7 Transwell检测嗜酸性粒细胞的迁移能力第25-26页
        1.2.8 Western Blot检测嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量第26-28页
        1.2.9 统计学分析第28页
    1.3 实验结果第28-35页
        1.3.1 野生型小鼠骨髓嗜酸性粒细胞的形态学观察第28页
        1.3.2 野生型小鼠骨髓嗜酸性粒细胞的瑞氏染色第28-29页
        1.3.3 流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F表达第29页
        1.3.4 CCK8检测不同浓度的PI3K抑制剂Ly294002及PI3K激动剂 对嗜酸性粒细胞增值活力的影响第29-31页
        1.3.5 各组野生型嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的表达变化第31-32页
        1.3.6 各组野生型嗜酸性粒细胞迁移能力的变化第32-33页
        1.3.7 各组野生型嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT表达量的变化第33-35页
    讨论第35-38页
第二部分 敲除CCR3基因通过PI3K/Akt信号通路抑制小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒第38-55页
    1.1 实验材料第38-40页
        1.1.1 实验试剂第38-39页
        1.1.2 主要实验试剂的配置第39页
        1.1.3 实验动物第39-40页
    1.2 实验方法第40-45页
        1.2.1 实验分组第40页
        1.2.2 条件性敲除CCR3基因小鼠的构建第40-41页
        1.2.3 子代小鼠基因型的鉴定第41-43页
        1.2.4 小鼠骨髓嗜酸性粒细胞原代培养第43页
        1.2.5 小鼠骨髓嗜酸性粒细胞瑞氏染色第43页
        1.2.6 流式细胞仪检测小鼠嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F第43页
        1.2.7 CCK8检测嗜酸性粒细胞的增殖活力第43页
        1.2.8 ELISA检测嗜酸性粒细胞脱颗粒蛋白EPO的表达第43-44页
        1.2.9 Transwell检测嗜酸性粒细胞的迁移能力第44页
        1.2.10 Western Blot检测嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量第44-45页
        1.2.11 统计学分析第45页
    1.3 实验结果第45-52页
        1.3.1 CCR3-/-基因敲除小鼠PCR基因鉴定第45-46页
        1.3.2 骨髓嗜酸性粒细胞形态学观察第46页
        1.3.3 骨髓嗜酸性粒细胞瑞氏染色第46-47页
        1.3.4 小鼠嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F的表达第47-48页
        1.3.5 各组嗜酸性粒细胞增殖活力的变化第48页
        1.3.6 各组嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的变化第48-49页
        1.3.7 各组嗜酸性粒细胞迁移能力的变化第49-50页
        1.3.8 各组嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量变化第50-52页
    讨论第52-55页
结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-60页
攻读学位期间的研究成果第60-61页
综述第61-68页
    参考文献第66-68页

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