摘要 | 第3-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
中英文缩写词 | 第14-15页 |
引言 | 第15-18页 |
第一部分 PI3K/Akt信号通路参与小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒的研究 | 第18-38页 |
1.1 实验材料 | 第18-22页 |
1.1.1 实验试剂 | 第18-19页 |
1.1.2 主要实验设备 | 第19-20页 |
1.1.3 主要试剂的配制 | 第20-22页 |
1.1.4 实验动物 | 第22页 |
1.2 实验方法 | 第22-28页 |
1.2.1 实验分组 | 第22页 |
1.2.2 野生型小鼠嗜酸性粒细胞原代培养 | 第22-23页 |
1.2.3 野生型小鼠嗜酸性粒细胞瑞氏染色 | 第23页 |
1.2.4 流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F表达 | 第23-24页 |
1.2.5 CCK8检测不同浓度的PI3K抑制剂及激动剂对嗜酸性粒细胞增殖活力的影响 | 第24页 |
1.2.6 ELISA检测嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的表达 | 第24-25页 |
1.2.7 Transwell检测嗜酸性粒细胞的迁移能力 | 第25-26页 |
1.2.8 Western Blot检测嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量 | 第26-28页 |
1.2.9 统计学分析 | 第28页 |
1.3 实验结果 | 第28-35页 |
1.3.1 野生型小鼠骨髓嗜酸性粒细胞的形态学观察 | 第28页 |
1.3.2 野生型小鼠骨髓嗜酸性粒细胞的瑞氏染色 | 第28-29页 |
1.3.3 流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F表达 | 第29页 |
1.3.4 CCK8检测不同浓度的PI3K抑制剂Ly294002及PI3K激动剂 对嗜酸性粒细胞增值活力的影响 | 第29-31页 |
1.3.5 各组野生型嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的表达变化 | 第31-32页 |
1.3.6 各组野生型嗜酸性粒细胞迁移能力的变化 | 第32-33页 |
1.3.7 各组野生型嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT表达量的变化 | 第33-35页 |
讨论 | 第35-38页 |
第二部分 敲除CCR3基因通过PI3K/Akt信号通路抑制小鼠嗜酸性粒细胞增殖、迁移及脱颗粒 | 第38-55页 |
1.1 实验材料 | 第38-40页 |
1.1.1 实验试剂 | 第38-39页 |
1.1.2 主要实验试剂的配置 | 第39页 |
1.1.3 实验动物 | 第39-40页 |
1.2 实验方法 | 第40-45页 |
1.2.1 实验分组 | 第40页 |
1.2.2 条件性敲除CCR3基因小鼠的构建 | 第40-41页 |
1.2.3 子代小鼠基因型的鉴定 | 第41-43页 |
1.2.4 小鼠骨髓嗜酸性粒细胞原代培养 | 第43页 |
1.2.5 小鼠骨髓嗜酸性粒细胞瑞氏染色 | 第43页 |
1.2.6 流式细胞仪检测小鼠嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F | 第43页 |
1.2.7 CCK8检测嗜酸性粒细胞的增殖活力 | 第43页 |
1.2.8 ELISA检测嗜酸性粒细胞脱颗粒蛋白EPO的表达 | 第43-44页 |
1.2.9 Transwell检测嗜酸性粒细胞的迁移能力 | 第44页 |
1.2.10 Western Blot检测嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量 | 第44-45页 |
1.2.11 统计学分析 | 第45页 |
1.3 实验结果 | 第45-52页 |
1.3.1 CCR3-/-基因敲除小鼠PCR基因鉴定 | 第45-46页 |
1.3.2 骨髓嗜酸性粒细胞形态学观察 | 第46页 |
1.3.3 骨髓嗜酸性粒细胞瑞氏染色 | 第46-47页 |
1.3.4 小鼠嗜酸性粒细胞表面抗原Siglec-F的表达 | 第47-48页 |
1.3.5 各组嗜酸性粒细胞增殖活力的变化 | 第48页 |
1.3.6 各组嗜酸性粒细胞颗粒蛋白EPO的变化 | 第48-49页 |
1.3.7 各组嗜酸性粒细胞迁移能力的变化 | 第49-50页 |
1.3.8 各组嗜酸性粒细胞P-AKT、AKT蛋白的表达量变化 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第60-61页 |
综述 | 第61-68页 |
参考文献 | 第66-68页 |