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间歇性缺氧通过TLR4/NF-κB信号转导促进动脉粥样硬化进展

缩略词表第7-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-15页
前言第16-17页
1.材料和方法第17-35页
    1.1 实验细胞与动物第17-18页
    1.2 主要实验仪器第18-19页
    1.3 主要试剂及耗材第19-21页
        1.3.1 抗体第19-20页
        1.3.2 ELISA试剂盒第20页
        1.3.3 分子生物学相关试剂第20页
        1.3.4 细胞实验相关试剂及耗材第20-21页
        1.3.5 动物实验及病理学相关试剂及耗材第21页
    1.4 实验方法第21-35页
        1.4.1 重组慢病毒的构建第21-22页
        1.4.2 实验动物分组及动物实验时间轴第22-23页
        1.4.3 动物OSA模型构建第23页
        1.4.4 动物体重、血压测量第23页
        1.4.5 动物取材第23-24页
        1.4.6 Elisa检测血清炎性因子含量第24页
        1.4.7 血脂水平的测定第24页
        1.4.8 主动脉窦AS斑块H&E染色第24-25页
        1.4.9 油红O染色第25-26页
        1.4.10 饱和苦味酸天狼猩红染色第26-27页
        1.4.11 免疫组化染色第27-29页
        1.4.12 细胞实验方法第29-30页
            1.4.12.1 细胞培养第29页
            1.4.12.2 细胞复苏第29页
            1.4.12.3 细胞传代第29页
            1.4.12.4 细胞冻存第29-30页
            1.4.12.5 细胞转染及缺氧/复氧处理第30页
        1.4.13 免疫印迹法检测主动脉/内皮细胞TLR4/NF-κB通路分子第30-32页
            1.4.13.1 组织或细胞总蛋白提取步骤第30页
            1.4.13.2 SDS-PAGE凝胶配制第30-31页
            1.4.13.3 凝胶电泳第31页
            1.4.13.4 蛋白转膜第31页
            1.4.13.5 封闭第31-32页
            1.4.13.6 一抗孵育第32页
            1.4.13.7 二抗孵育第32页
            1.4.13.8 显色反应第32页
            1.4.13.9 数据分析第32页
        1.4.14 实时PCR检测主动脉/内皮细胞TLR4分子第32-35页
            1.4.14.1 主动脉/内皮细胞总RNA的提取第32-33页
            1.4.14.2 基因组DNA去除及逆转录第33-34页
            1.4.14.3 实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)步骤第34-35页
            1.4.14.4 结果分析第35页
        1.4.15 统计学处理第35页
2.结果第35-42页
    2.1 TLR4在H/R介导内皮细胞NF-κB p65的活化过程中起着关键作用第35-36页
    2.2 TLR4siRNA筛选及慢病毒血管壁转染荧光观察第36-37页
    2.3 小鼠体重第37页
    2.4 小鼠血压第37-38页
    2.5 IH通过活化TLR4/NF-κB通路加剧ApoE-/-小鼠体内炎症反应第38-39页
    2.6 TLR4在IH引发HIF-1α、Nox-2、p-p38表达中的作用第39-40页
    2.7 TLR4在IH暴露引起的糖脂紊乱中的作用第40页
    2.8 IH诱导AS斑块生长依赖于TLR4的表达第40-41页
    2.9 IH介导的TLR4表达促进AS斑块的不稳定第41-42页
3.讨论第42-47页
    3.1 OSA患者与ApoE-/-具有类似AS易感性第43页
    3.2 OSA诱发斑块的特征第43页
    3.3 本研究模型创新性第43-44页
    3.4 IH暴露通过促炎信号TLR4/NF-κB通路诱发炎症第44-45页
    3.5 IH与血脂代谢第45页
    3.6 血压在IH致AS所起作用第45-46页
    3.7 血糖在IH致AS所起作用第46页
    3.8 IH活化TLR4/NF-κB通路并诱发多种因素参与了斑块的进展第46页
    3.9 IH与小鼠体重第46-47页
    3.10 小结第47页
4.全文总结第47-48页
5.创新性和局限性第48-49页
    5.1 本课题创新性第48页
    5.2局限性第48-49页
参考文献第49-52页
综述第52-63页
    参考文献第60-63页
致谢第63页

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