缩略词表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
前言 | 第16-17页 |
1.材料和方法 | 第17-35页 |
1.1 实验细胞与动物 | 第17-18页 |
1.2 主要实验仪器 | 第18-19页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第19-21页 |
1.3.1 抗体 | 第19-20页 |
1.3.2 ELISA试剂盒 | 第20页 |
1.3.3 分子生物学相关试剂 | 第20页 |
1.3.4 细胞实验相关试剂及耗材 | 第20-21页 |
1.3.5 动物实验及病理学相关试剂及耗材 | 第21页 |
1.4 实验方法 | 第21-35页 |
1.4.1 重组慢病毒的构建 | 第21-22页 |
1.4.2 实验动物分组及动物实验时间轴 | 第22-23页 |
1.4.3 动物OSA模型构建 | 第23页 |
1.4.4 动物体重、血压测量 | 第23页 |
1.4.5 动物取材 | 第23-24页 |
1.4.6 Elisa检测血清炎性因子含量 | 第24页 |
1.4.7 血脂水平的测定 | 第24页 |
1.4.8 主动脉窦AS斑块H&E染色 | 第24-25页 |
1.4.9 油红O染色 | 第25-26页 |
1.4.10 饱和苦味酸天狼猩红染色 | 第26-27页 |
1.4.11 免疫组化染色 | 第27-29页 |
1.4.12 细胞实验方法 | 第29-30页 |
1.4.12.1 细胞培养 | 第29页 |
1.4.12.2 细胞复苏 | 第29页 |
1.4.12.3 细胞传代 | 第29页 |
1.4.12.4 细胞冻存 | 第29-30页 |
1.4.12.5 细胞转染及缺氧/复氧处理 | 第30页 |
1.4.13 免疫印迹法检测主动脉/内皮细胞TLR4/NF-κB通路分子 | 第30-32页 |
1.4.13.1 组织或细胞总蛋白提取步骤 | 第30页 |
1.4.13.2 SDS-PAGE凝胶配制 | 第30-31页 |
1.4.13.3 凝胶电泳 | 第31页 |
1.4.13.4 蛋白转膜 | 第31页 |
1.4.13.5 封闭 | 第31-32页 |
1.4.13.6 一抗孵育 | 第32页 |
1.4.13.7 二抗孵育 | 第32页 |
1.4.13.8 显色反应 | 第32页 |
1.4.13.9 数据分析 | 第32页 |
1.4.14 实时PCR检测主动脉/内皮细胞TLR4分子 | 第32-35页 |
1.4.14.1 主动脉/内皮细胞总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.4.14.2 基因组DNA去除及逆转录 | 第33-34页 |
1.4.14.3 实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)步骤 | 第34-35页 |
1.4.14.4 结果分析 | 第35页 |
1.4.15 统计学处理 | 第35页 |
2.结果 | 第35-42页 |
2.1 TLR4在H/R介导内皮细胞NF-κB p65的活化过程中起着关键作用 | 第35-36页 |
2.2 TLR4siRNA筛选及慢病毒血管壁转染荧光观察 | 第36-37页 |
2.3 小鼠体重 | 第37页 |
2.4 小鼠血压 | 第37-38页 |
2.5 IH通过活化TLR4/NF-κB通路加剧ApoE-/-小鼠体内炎症反应 | 第38-39页 |
2.6 TLR4在IH引发HIF-1α、Nox-2、p-p38表达中的作用 | 第39-40页 |
2.7 TLR4在IH暴露引起的糖脂紊乱中的作用 | 第40页 |
2.8 IH诱导AS斑块生长依赖于TLR4的表达 | 第40-41页 |
2.9 IH介导的TLR4表达促进AS斑块的不稳定 | 第41-42页 |
3.讨论 | 第42-47页 |
3.1 OSA患者与ApoE-/-具有类似AS易感性 | 第43页 |
3.2 OSA诱发斑块的特征 | 第43页 |
3.3 本研究模型创新性 | 第43-44页 |
3.4 IH暴露通过促炎信号TLR4/NF-κB通路诱发炎症 | 第44-45页 |
3.5 IH与血脂代谢 | 第45页 |
3.6 血压在IH致AS所起作用 | 第45-46页 |
3.7 血糖在IH致AS所起作用 | 第46页 |
3.8 IH活化TLR4/NF-κB通路并诱发多种因素参与了斑块的进展 | 第46页 |
3.9 IH与小鼠体重 | 第46-47页 |
3.10 小结 | 第47页 |
4.全文总结 | 第47-48页 |
5.创新性和局限性 | 第48-49页 |
5.1 本课题创新性 | 第48页 |
5.2局限性 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
综述 | 第52-63页 |
参考文献 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |