| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 前言 | 第14-22页 |
| 1.1.1 间充质干细胞的来源 | 第14页 |
| 1.1.2 间充质干细胞的特点与性质 | 第14-15页 |
| 1.1.3 脐带MSCs的特点 | 第15-16页 |
| 1.1.4 间充质干细胞的应用 | 第16-20页 |
| 1.1.5 T淋巴细胞的功能与分类 | 第20-21页 |
| 1.1.6 CD4~+T淋巴细胞与调节性T细胞 | 第21页 |
| 1.1.7 间充质干细胞对T淋巴细胞的调控 | 第21-22页 |
| 1.2 间充质干细胞研究现状 | 第22-24页 |
| 1.2.1 脐带MSCs的分离工艺 | 第22-23页 |
| 1.2.2 间充质干细胞对T淋巴细胞免疫调控的研究现状 | 第23-24页 |
| 1.3 本研究的目的和内容 | 第24-27页 |
| 1.3.1 本研究的目的 | 第24-25页 |
| 1.3.2 本研究的主要内容 | 第25-27页 |
| 第2章 脐带间充质干细胞两种分离工艺的比较 | 第27-47页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验试剂及仪器 | 第27-33页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 主要试剂的配置 | 第29-30页 |
| 2.2.4 流式细胞荧光标记抗体 | 第30-31页 |
| 2.2.5 实验设备及仪器 | 第31页 |
| 2.2.6 实验器械及耗材 | 第31-33页 |
| 2.3 实验方法及操作 | 第33-38页 |
| 2.3.1 脐带MSCs的分离 | 第33-34页 |
| 2.3.2 细胞的换液、培养与传代 | 第34-35页 |
| 2.3.3 细胞免疫表型检测 | 第35页 |
| 2.3.4 细胞生长曲线测定 | 第35-36页 |
| 2.3.5 脐带MSCs成骨诱导分化 | 第36页 |
| 2.3.6 脐带MSCs成骨诱导分化的鉴定 | 第36-38页 |
| 2.3.7 统计学分析 | 第38页 |
| 2.4 实验结果 | 第38-45页 |
| 2.4.1 脐带MSCs的形态学比较 | 第38-40页 |
| 2.4.2 细胞生长曲线测定结果 | 第40页 |
| 2.4.3 流式细胞仪检测结果 | 第40-41页 |
| 2.4.4 脐带MSCs成骨诱导分化实验 | 第41-45页 |
| 2.5 讨论 | 第45-46页 |
| 2.6 结论 | 第46-47页 |
| 第3章 脐带间充质干细胞对脐血来源CD4~+T细胞的增殖及分化的调控研究 | 第47-75页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验试剂及仪器 | 第47-52页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.3 主要试剂的配置 | 第49-50页 |
| 3.2.4 流式细胞荧光标记抗体 | 第50页 |
| 3.2.5 实验设备及仪器 | 第50-51页 |
| 3.2.6 实验器械及耗材 | 第51-52页 |
| 3.3 实验方法及操作式 | 第52-62页 |
| 3.3.1 脐血单个核细胞(UCB-MNC)分离 | 第52-53页 |
| 3.3.2 抗原提呈细胞(APCs)的分离 | 第53页 |
| 3.3.3 脐血来源的CD4~+T细胞的分选 | 第53-54页 |
| 3.3.4 共培养前流式细胞检测 | 第54-55页 |
| 3.3.5 APCs与CD4~+T细胞共培养 | 第55-56页 |
| 3.3.6 脐带MSCs的准备 | 第56页 |
| 3.3.7 脐带MSCs与脐血来源CD4~+T细胞的共培养 | 第56-57页 |
| 3.3.8 CD4~+T细胞与脐带MSCs共培养后CD4CD25双标检测 | 第57页 |
| 3.3.9 荧光定量PCR检测细胞内转录因子Foxp3的表达量变化 | 第57-61页 |
| 3.3.10 统计学分析 | 第61-62页 |
| 3.4 实验结果 | 第62-73页 |
| 3.4.1 脐血单个核细胞和APCs分离结果 | 第62页 |
| 3.4.2 流式检测结果 | 第62-64页 |
| 3.4.3 APCs与CD4~+T细胞共培养计数结果 | 第64-65页 |
| 3.4.4 脐血CD4~+T细胞与脐带MSCs共培养后细胞计数 | 第65-66页 |
| 3.4.5 脐血CD4~+T细胞与脐带MSCs共培养后CD4CD25双标检测 | 第66-68页 |
| 3.4.6 荧光定量PCR结果 | 第68-73页 |
| 3.5 讨论 | 第73-74页 |
| 3.6 结论 | 第74-75页 |
| 第4章 脐带间充质干细胞对脐血来源CD4~+T细胞凋亡的调控研究 | 第75-88页 |
| 4.1 引言 | 第75-76页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第76-78页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第76页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第76页 |
| 4.2.3 主要试剂的配置 | 第76-77页 |
| 4.2.4 实验设备及仪器 | 第77页 |
| 4.2.5 实验器械及耗材 | 第77-78页 |
| 4.3 实验方法及操作 | 第78-81页 |
| 4.3.1 不同浓度地塞米松对CD4~+T细胞凋亡的影响 | 第78-79页 |
| 4.3.2 脐带MSCs的准备 | 第79页 |
| 4.3.3 脐带MSCs与脐血来源CD4~+T细胞的共培养 | 第79-81页 |
| 4.3.4 流式检测凋亡 | 第81页 |
| 4.3.5 统计学分析 | 第81页 |
| 4.4 实验结果 | 第81-86页 |
| 4.4.1 不同浓度地塞米松对CD4~+T细胞凋亡的影响 | 第81-82页 |
| 4.4.2 实验组共培养后流式检测凋亡结果 | 第82-86页 |
| 4.5 讨论 | 第86-87页 |
| 4.6 结论 | 第87-88页 |
| 第5章 结论及展望 | 第88-94页 |
| 5.1 结论与意义 | 第88-93页 |
| 5.2 不足与展望 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
