摘要(中文) | 第11-13页 |
摘要(英文) | 第13页 |
第一章 文献综述 | 第15-45页 |
1. 农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展 | 第15-24页 |
1.1 农杆菌介导遗传转化系统的特点 | 第15-16页 |
1.2 根癌农杆菌介导的遗传转化机理 | 第16-18页 |
1.3 根癌农杆菌介导的单子叶植物遗传转化 | 第18页 |
1.4 农杆菌介导单子叶植物遗传转化的影响因素 | 第18-22页 |
1.5 问题与展望 | 第22-24页 |
2. 高粱组织培养与遗传转化研究进展 | 第24-34页 |
2.1 高粱组织培养研究进展 | 第24-29页 |
2.2 高粱遗传转化研究进展 | 第29-34页 |
2.2.1 高粱遗传转化体系的研究现状 | 第29-30页 |
2.2.2 外源基因的导入方法、特点及其影响因素 | 第30-34页 |
3. Bt基因及其在转基因抗虫植物中的研究和应用进展 | 第34-42页 |
3.1 Bt基因及其一般特性 | 第35-37页 |
3.1.1 Bt杀虫晶体蛋白的分子结构、功能及其杀虫机理 | 第35-36页 |
3.1.2 Bt杀虫晶体蛋白基因的分类 | 第36-37页 |
3.2 Bt基因在转基因抗虫植物中的应用 | 第37-40页 |
3.2.1 转Bt基因植物的培育及商品化应用 | 第37-38页 |
3.2.2 转Bt基因植物的应用前景 | 第38-40页 |
3.3 转Bt基因植物在应用中存在的问题及其对策 | 第40-42页 |
3.3.1 Bt基因沉默现象的发生及其对策 | 第40页 |
3.3.2 转Bt基因植物的性状变异及解决措施 | 第40-41页 |
3.3.3 转Bt基因植物的生物安全性问题及对策 | 第41-42页 |
4. 本论文的选题依据、研究内容及目的意义 | 第42-45页 |
4.1 选题依据 | 第42-43页 |
4.2 研究内容 | 第43页 |
4.3 研究目的意义 | 第43-45页 |
第二章 高梁离体再生体系的建立 | 第45-73页 |
1. 材料与方法 | 第46-52页 |
1.1 试验材料与来源 | 第46页 |
1.2 材料的准备 | 第46页 |
1.3 培养基 | 第46-51页 |
1.3.1 茎尖直接再生出芽培养基的确定和影响因素的研究 | 第46-48页 |
1.3.2 种子(胚)愈伤组织诱导和继代培养基的确定 | 第48-49页 |
1.3.3 未成熟胚愈伤组织诱导和继代培养基的确定 | 第49-50页 |
1.3.4 幼穗愈伤组织诱导和继代培养基的确定 | 第50-51页 |
1.3.5 愈伤组织分化和生根培养基 | 第51页 |
1.4 培养条件 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-68页 |
2.1 茎尖直接再生培养基的正交试验结果及影响因素 | 第52-56页 |
2.1.1 植物生长调节物质的正交试验结果 | 第52页 |
2.1.2 培养基附加成分的正交试验结果 | 第52-53页 |
2.1.3 影响高粱茎尖直接再生的主要因素 | 第53-56页 |
2.2 种子(胚)愈伤组织诱导和继代培养基的研究 | 第56-60页 |
2.2.1 种子(胚)愈伤组织诱导培养基的正交试验结果 | 第56页 |
2.2.2 影响种子(胚)愈伤组织诱导的主要因素 | 第56-58页 |
2.2.3 种子(胚)愈伤组织继代培养的主要影响因素 | 第58-60页 |
2.3 未成熟胚愈伤组织诱导和继代培养基的研究 | 第60-63页 |
2.3.1 未成熟胚愈伤组织诱导培养基的正交试验结果及主要影响因素 | 第60-62页 |
2.3.2 未成熟胚愈伤组织继代培养的主要影响因素 | 第62-63页 |
2.4 影响幼穗愈伤组织诱导和继代培养的主要因素 | 第63-68页 |
2.4.1 培养基 | 第63-66页 |
2.4.2 幼穗不同发育时期 | 第66页 |
2.4.3 基因型 | 第66-68页 |
2.5 高粱愈伤组织再生能力反应 | 第68页 |
2.5.1 不同来源外植体诱导的愈伤组织再生能力 | 第68页 |
2.5.2 不同基因型愈伤组织的再生能力 | 第68页 |
3. 讨论 | 第68-73页 |
3.1 高粱茎尖直接再生体系的建立及其主要影响因素 | 第68-70页 |
3.2 影响高粱愈伤组织诱导和继代培养的主要因素 | 第70-72页 |
3.3 不同来源愈伤组织胚性及再生能力比较 | 第72-73页 |
第三章 农杆菌介导高粱遗传转化体系的研究 | 第73-98页 |
1. 材料与方法 | 第74-79页 |
1.1 试验材料与来源 | 第74页 |
1.1.1 植物材料与来源 | 第74页 |
1.1.2 农杆菌菌株与质粒 | 第74页 |
1.1.3 抗生素、选择试剂及其浓度设置 | 第74页 |
1.2 方法 | 第74-77页 |
1.2.1 植物组织培养方法 | 第74-75页 |
1.2.2 抗生素的抑菌试验 | 第75页 |
1.2.3 植物组织对选择试剂的本底耐受性检测 | 第75页 |
1.2.4 农杆菌的培养与转化方法的比较试验 | 第75-76页 |
1.2.5 转化体的筛选与再生 | 第76页 |
1.2.6 GUS组织化学染色法 | 第76-77页 |
1.3 培养基 | 第77-79页 |
1.3.1 农杆菌培养基 | 第77页 |
1.3.2 外植体预培养基 | 第77-78页 |
1.3.3 共培养基 | 第78页 |
1.3.4 筛选培养基 | 第78页 |
1.3.5 分化培养基 | 第78-79页 |
1.3.6 生根培养基 | 第79页 |
2. 结果与分析 | 第79-95页 |
2.1 抗生素对农杆菌的抑菌效果和对高粱离体培养的影响 | 第79-83页 |
2.1.1 抗生素对农杆菌的抑菌作用 | 第79-80页 |
2.1.2 抗生素对高粱茎尖再生和未成熟胚及幼穗愈伤组织诱导的影响 | 第80-81页 |
2.1.3 抗生素对高粱愈伤组织生长和分化的影响 | 第81页 |
2.1.4 高粱外植体对卡那霉素、潮霉素的不同反应 | 第81-83页 |
2.2 几种因子对农杆菌介导高粱茎尖转化频率的影响 | 第83-84页 |
2.3 农杆菌介导高粱未成熟胚转化的影响因素 | 第84-90页 |
2.4 农杆菌介导幼穗愈伤组织转化体系的研究 | 第90-95页 |
3. 讨论 | 第95-98页 |
3.1 抗生素的抑菌效果和对高粱离体再生培养的影响 | 第95页 |
3.2 高梁外植体对选择标记的本底耐受性反应 | 第95-96页 |
3.3 影响农杆菌介导高粱茎尖转化的主要因素 | 第96页 |
3.4 影响农杆菌介导高粱未成熟胚和幼穗愈伤组织转化的主要因素 | 第96-98页 |
第四章 Bt抗虫基因的导入与转基因植株的鉴定 | 第98-119页 |
1. 材料与方法 | 第99-107页 |
1.1 试验材料与准备 | 第99页 |
1.2 农杆菌菌株与质粒 | 第99页 |
1.3 方法 | 第99-107页 |
1.3.1 农杆菌介导高粱愈伤组织(幼穗)的转化方法和转化体的筛选与再生 | 第99-101页 |
1.3.2 GUS组织化学染色法 | 第101-102页 |
1.3.3 高粱DNA提取 | 第102页 |
1.3.4 PCR检测 | 第102-103页 |
1.3.5 cry1Ab基因表达产物的定量测定 | 第103-104页 |
1.3.6 Southern杂交 | 第104-107页 |
1.3.7 室内抗虫性离体叶片鉴定 | 第107页 |
2. 结果与分析 | 第107-116页 |
2.1 转化技术的优化和转cry1Ab基因高粱植株的获得 | 第107-110页 |
2.1.1 筛选策略对转化效率的影响 | 第107-108页 |
2.1.2 分化培养基对抗性愈伤组织再生出苗的影响 | 第108-109页 |
2.1.3 转cry1Ab基因高粱植株的获得 | 第109-110页 |
2.2 转基因高粱植株中的GUS活性分析 | 第110页 |
2.3 转基因高粱植株中cry1Ab基因的PCR分析 | 第110-113页 |
2.4 转基因高粱植株Southern blotting检测分析 | 第113页 |
2.5 转基因高粱植株中Bt蛋白测定结果 | 第113-115页 |
2.5.1 转基因高粱植株叶片中Bt蛋白含量的检测 | 第113页 |
2.5.2 转基因高粱植株不同组织中Bt蛋白含量的检测 | 第113-115页 |
2.6 室内离体抗虫性生物测定结果 | 第115-116页 |
3. 讨论 | 第116-119页 |
参考文献 | 第119-127页 |