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外源性硫化氢对丙烯腈诱导的大鼠星形胶质细胞毒性的影响及其机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩写索引第11-12页
第一章 绪论第12-25页
    1.1 硫化氢第12-13页
        1.1.1 硫化氢概述第12页
        1.1.2 硫化氢的生理调节功能第12-13页
    1.2 丙烯腈第13-15页
        1.2.1 丙烯腈概述第13-14页
        1.2.2 丙烯腈毒性及其解毒剂第14-15页
    1.3 硫化氢与丙烯腈第15-16页
        1.3.1 硫化氢的神经保护性第15页
        1.3.2 丙烯腈与内源性H_2S代谢第15-16页
    1.4 硫化氢与自噬第16-21页
        1.4.1 硫化氢与自噬概述第16页
        1.4.2 硫化氢与神经系统自噬第16-17页
        1.4.3 硫化氢与心血管系统自噬第17-19页
        1.4.4 硫化氢与消化系统自噬第19-20页
        1.4.5 硫化氢与癌细胞自噬第20页
        1.4.6 硫化氢与其他组织自噬第20-21页
    1.5 硫化氢与Nrf2/ARE信号通路第21-22页
    1.6 研究内容第22-25页
第二章 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的原代星形胶质细胞毒性的影响第25-39页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 实验细胞第25页
        2.1.2 实验仪器及设备第25-26页
        2.1.3 实验药品及试剂第26页
        2.1.4 实验室常用试剂配制第26-27页
    2.2 实验方法第27-31页
        2.2.1 原代SD大鼠星形胶质细胞培养第27页
        2.2.2 MTT法检测细胞活力第27-28页
        2.2.3 LDH法检测细胞毒性第28-29页
        2.2.4 细胞GSH检测第29-30页
        2.2.5 细胞ROS检测第30-31页
        2.2.6 数据统计分析第31页
    2.3 实验结果第31-36页
        2.3.1 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞活力和毒性的影响第31-33页
        2.3.2 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞形态学的影响第33-34页
        2.3.3 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞GSH的影响第34-35页
        2.3.4 外源性硫化氢对丙烯腈诱导的星形胶质细胞ROS的影响第35-36页
    2.4 讨论第36-37页
    2.5 小结第37-39页
第三章 自噬在外源性H_2S拮抗AN诱导的细胞毒性中的作用研究第39-57页
    3.1 实验材料第39-40页
        3.1.1 实验试剂第39-40页
        3.1.2 实验仪器第40页
    3.2 实验方法第40-47页
        3.2.1 细胞全蛋白抽提第40-41页
        3.2.2 蛋白浓度测定第41页
        3.2.3 蛋白质免疫印迹法第41-44页
        3.2.4 免疫荧光检测细胞自噬第44-45页
        3.2.5 吖啶橙染色检测细胞自噬第45页
        3.2.6 自噬抑制剂调节细胞自噬第45-46页
        3.2.7 siRNA基因干扰细胞自噬第46-47页
        3.2.8 自噬双标腺病毒检测细胞自噬流第47页
        3.2.9 数据统计分析第47页
    3.3 实验结果第47-54页
        3.3.1 外源性H_2S对星形胶质细胞自噬相关蛋白表达的影响第47-48页
        3.3.2 免疫荧光观察LC3B的表达和分布第48-49页
        3.3.3 吖啶橙染色检测外源性H_2S对细胞自噬的影响第49页
        3.3.4 蛋白免疫印迹法检测外源性H_2S对星形胶质细胞自噬流的影响第49-50页
        3.3.5 自噬LC3双标腺病毒检测外源性H_2S对细胞自噬流的影响第50-51页
        3.3.6 药理学抑制自噬后,外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响第51-53页
        3.3.7 基因学干扰自噬后,外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响第53-54页
    3.4 讨论第54-56页
    3.5 小结第56-57页
第四章 Nrf2信号在外源性H_2S拮抗AN诱导的细胞毒性中的作用研究第57-65页
    4.1 实验材料第57页
        4.1.1 实验试剂第57页
        4.1.2 实验仪器第57页
    4.2 实验方法第57-59页
        4.2.1 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提第57-58页
        4.2.2 免疫荧光检测Nrf2核转位第58页
        4.2.3 siRNA基因干扰细胞Nrf2表达第58-59页
        4.2.4 数据统计分析第59页
    4.3 实验结果第59-63页
        4.3.1 外源性H_2S诱导星形胶质细胞Nrf2发生核转位第59-60页
        4.3.2 外源性H_2S对星形胶质细胞Nrf2下游蛋白表达的影响第60-61页
        4.3.3 基因学干扰Nrf2后,外源性H_2S对AN损伤的细胞活力的影响第61-63页
    4.4 讨论第63-64页
    4.5 小结第64-65页
第五章 总结与展望第65-66页
参考文献第66-75页
致谢第75-76页
攻读硕士期间发表的学术论文及参加的学术会议第76-77页
    1. 发表和完成的学术论文第76页
    2. 参加的学术会议第76-77页

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