| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写索引 | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| 1.1 诱导多功能干细胞概述 | 第14-16页 |
| 1.2 iPS细胞定向分化的概述 | 第16-18页 |
| 1.3 iPS细胞体外定向分化为黑素细胞及其面临的问题 | 第18-19页 |
| 1.4 本论文的研究目的和技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 诱导多功能干细胞的制备和鉴定 | 第21-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 主要仪器与耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要溶液及配制 | 第24-26页 |
| 2.1.4 实验动物和手术器械 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 获取宿主细胞和滋养层细胞 | 第26-28页 |
| 2.2.2 制备病毒液 | 第28-32页 |
| 2.2.3 将宿主细胞重编程为iPS细胞 | 第32-35页 |
| 2.2.4 iPS细胞的鉴定 | 第35-40页 |
| 2.2.5 统计学方法 | 第40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-46页 |
| 2.3.1 重编程过程中细胞形态的变化 | 第40-41页 |
| 2.3.2 碱性磷酸酶染色（AP 染色） | 第41-42页 |
| 2.3.3 细胞免疫荧光染色 | 第42-43页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR | 第43页 |
| 2.3.5 拟胚体的形成 | 第43-44页 |
| 2.3.6 畸胎瘤的形成 | 第44-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-51页 |
| 第三章 iPS细胞株向黑素细胞的分化及初步鉴定 | 第51-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第51-53页 |
| 3.1.1 主要仪器与耗材 | 第51页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.3 主要溶液及配制 | 第52页 |
| 3.1.4 细胞株 | 第52-53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-56页 |
| 3.2.1 L-Wnt3a细胞的培养 | 第53页 |
| 3.2.2 L-Wnt3a-CM的提取 | 第53页 |
| 3.2.3 iPS细胞向黑素细胞的诱导分化 | 第53-54页 |
| 3.2.4 黑素细胞的培养 | 第54页 |
| 3.2.5 黑素细胞的鉴定 | 第54-56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-59页 |
| 3.3.1 诱导过程中拟胚体的变化 | 第56-57页 |
| 3.3.2 细胞沉淀颜色的观察 | 第57-58页 |
| 3.3.3 实时荧光定量PCR检测黑素基因表达 | 第58-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-62页 |
| 第四章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 4.1 结论 | 第62页 |
| 4.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 攻读硕士期间参加的课题 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-96页 |