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水疱性口炎病毒N基因的克隆及在原核中的高效表达

文献综述第9-31页
    第一章 水疱性口炎及水疱性口炎病毒研究进展第9-31页
        1.1 水疱性口炎研究进展第9-19页
            1.1.1 水疱性口炎概述第9-10页
            1.1.2 水疱性口炎的病原第10页
            1.1.3 致病机理第10-11页
            1.1.4 临床症状第11-12页
            1.1.5 传播机制第12-14页
            1.1.6 水疱性口炎的流行情况第14-15页
            1.1.7 水疱性口炎的疫苗免疫第15-16页
            1.1.8 水疱性口炎的诊断第16-18页
            1.1.9 防制措施第18-19页
        1.2 水疱性口炎病毒研究进展第19-31页
            1.2.1 VSV的形态、理化特征及培养特性第19-20页
            1.2.2 VSV的基因组结构特征第20-21页
            1.2.3 VSV的转录特征第21-22页
            1.2.4 VSV的主要蛋白特性及功能第22-25页
            1.2.5 VSV的侵入及复制第25-27页
            1.2.6 DI颗粒第27-29页
            1.2.7 VSV的抗原性及生物学活性第29-30页
            1.2.8 VSV的生物型第30页
            1.2.9 展望第30-31页
试验研究第31-62页
    第二章 VSV印第安娜(IN)株N基因的克隆和序列分析第31-48页
        2.1 材料第32页
            2.1.1 病毒、菌种与质粒第32页
            2.1.2 酶与试剂第32页
            2.1.3 主要仪器与设备第32页
            2.1.4 DNA操作中的其它有关主要试剂第32页
        2.2 方法第32-37页
            2.2.1 目的片段的扩增与纯化回收第32-34页
            2.2.2 目的基因的克隆第34-35页
            2.2.3 重组质粒的提取与鉴定第35-37页
        2.3 结果第37-46页
            2.3.1 RT-PCR产物的电泳结果第37页
            2.3.2 目的基因的克隆与鉴定第37-46页
        2.4 讨论第46-47页
            2.4.1 试验过程中要谨防RNase的污染第46页
            2.4.2 PCR成功的关键第46-47页
            2.4.3 N基因的高度保守性第47页
        2.5 小结第47-48页
    第三章 VSV印第安娜(IN)株 N基因原核表达载体的构建和表达第48-62页
        3.1 材料第48-49页
            3.1.1 质粒与菌种第48页
            3.1.2 工具酶及试剂第48-49页
            3.1.3 仪器与设备第49页
            3.1.4 DNA操作中其它有关主要试剂第49页
        3.2 方法第49-53页
            3.2.1 pGEM-T-N1、pET30c(+)的转化、扩增及目的质粒的提取第49页
            3.2.2 引物设计、合成及目的基因的获得第49页
            3.2.3 重组表达载体的构建与鉴定第49-51页
            3.2.4 重组质粒在大肠杆菌中的表达第51页
            3.2.5 表达蛋白的检测第51-53页
        3.3 结果第53-58页
            3.3.1 亚克隆结果第53-54页
            3.3.2 重组质粒的电泳、PCR及酶切鉴定第54-55页
            3.3.3 重组质粒的测序结果及所推导氨基酸序列第55-56页
            3.3.4 表达蛋白的SDS-PAGE结果第56-57页
            3.3.5 表达蛋白的Western blot检测第57-58页
        3.4 讨论第58-61页
            3.4.1 表达系统及表达载体的选择第58-59页
            3.4.2 影响大肠杆菌表达系统表达的因素第59-60页
            3.4.3 实验中遇到的问题第60-61页
        3.5 小结第61-62页
结论第62-63页
参考文献第63-72页
致谢第72-73页
作者简介第73页

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