文献综述 | 第9-31页 |
第一章 水疱性口炎及水疱性口炎病毒研究进展 | 第9-31页 |
1.1 水疱性口炎研究进展 | 第9-19页 |
1.1.1 水疱性口炎概述 | 第9-10页 |
1.1.2 水疱性口炎的病原 | 第10页 |
1.1.3 致病机理 | 第10-11页 |
1.1.4 临床症状 | 第11-12页 |
1.1.5 传播机制 | 第12-14页 |
1.1.6 水疱性口炎的流行情况 | 第14-15页 |
1.1.7 水疱性口炎的疫苗免疫 | 第15-16页 |
1.1.8 水疱性口炎的诊断 | 第16-18页 |
1.1.9 防制措施 | 第18-19页 |
1.2 水疱性口炎病毒研究进展 | 第19-31页 |
1.2.1 VSV的形态、理化特征及培养特性 | 第19-20页 |
1.2.2 VSV的基因组结构特征 | 第20-21页 |
1.2.3 VSV的转录特征 | 第21-22页 |
1.2.4 VSV的主要蛋白特性及功能 | 第22-25页 |
1.2.5 VSV的侵入及复制 | 第25-27页 |
1.2.6 DI颗粒 | 第27-29页 |
1.2.7 VSV的抗原性及生物学活性 | 第29-30页 |
1.2.8 VSV的生物型 | 第30页 |
1.2.9 展望 | 第30-31页 |
试验研究 | 第31-62页 |
第二章 VSV印第安娜(IN)株N基因的克隆和序列分析 | 第31-48页 |
2.1 材料 | 第32页 |
2.1.1 病毒、菌种与质粒 | 第32页 |
2.1.2 酶与试剂 | 第32页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第32页 |
2.1.4 DNA操作中的其它有关主要试剂 | 第32页 |
2.2 方法 | 第32-37页 |
2.2.1 目的片段的扩增与纯化回收 | 第32-34页 |
2.2.2 目的基因的克隆 | 第34-35页 |
2.2.3 重组质粒的提取与鉴定 | 第35-37页 |
2.3 结果 | 第37-46页 |
2.3.1 RT-PCR产物的电泳结果 | 第37页 |
2.3.2 目的基因的克隆与鉴定 | 第37-46页 |
2.4 讨论 | 第46-47页 |
2.4.1 试验过程中要谨防RNase的污染 | 第46页 |
2.4.2 PCR成功的关键 | 第46-47页 |
2.4.3 N基因的高度保守性 | 第47页 |
2.5 小结 | 第47-48页 |
第三章 VSV印第安娜(IN)株 N基因原核表达载体的构建和表达 | 第48-62页 |
3.1 材料 | 第48-49页 |
3.1.1 质粒与菌种 | 第48页 |
3.1.2 工具酶及试剂 | 第48-49页 |
3.1.3 仪器与设备 | 第49页 |
3.1.4 DNA操作中其它有关主要试剂 | 第49页 |
3.2 方法 | 第49-53页 |
3.2.1 pGEM-T-N1、pET30c(+)的转化、扩增及目的质粒的提取 | 第49页 |
3.2.2 引物设计、合成及目的基因的获得 | 第49页 |
3.2.3 重组表达载体的构建与鉴定 | 第49-51页 |
3.2.4 重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第51页 |
3.2.5 表达蛋白的检测 | 第51-53页 |
3.3 结果 | 第53-58页 |
3.3.1 亚克隆结果 | 第53-54页 |
3.3.2 重组质粒的电泳、PCR及酶切鉴定 | 第54-55页 |
3.3.3 重组质粒的测序结果及所推导氨基酸序列 | 第55-56页 |
3.3.4 表达蛋白的SDS-PAGE结果 | 第56-57页 |
3.3.5 表达蛋白的Western blot检测 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-61页 |
3.4.1 表达系统及表达载体的选择 | 第58-59页 |
3.4.2 影响大肠杆菌表达系统表达的因素 | 第59-60页 |
3.4.3 实验中遇到的问题 | 第60-61页 |
3.5 小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简介 | 第73页 |