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外源G10aroA与VIP3基因在转基因棉花中的表达分析

摘要第7-9页
缩略词表第9-10页
第一章 前言第10-31页
    1 我国棉花产区及棉花种质资源简述第10页
    2 棉花转基因种质创新研究第10-11页
    3 草甘膦及在作物中的相关研究利用进展第11-23页
        3.1 草甘麟作用特点与抗草甘麟作物培育对策第12-16页
        3.2 抗草甘膦基因来源及相关分子生物学研究第16-18页
        3.3 棉花抗草甘膦的相关研究第18-19页
        3.4 草甘膦的降解及对生物安全性的影响第19-20页
        3.5 抗草甘膦基因专利与转基因作物的商业化竞争第20-21页
        3.6 草甘膦使用、杂草防治与抗性产生第21-23页
    4 抗虫基因的发掘及在作物中的利用第23-31页
        4.1 第一代抗虫基因Bt的相关研究第23-28页
            4.1.1 苏云金芽孢杆菌(Bt)毒素蛋白的作用机理及种类第23-24页
            4.1.2 Cry毒素对不同昆虫的作用特点第24-26页
            4.1.3 转Bt基因抗虫棉的成功及可能存在的风险第26-28页
        4.2 第二代杀虫蛋白VIPs的发掘第28-31页
            4.2.1 VIPs作用机理及种类第28-29页
            4.2.2 转vip3基因作物的杀虫研究第29-30页
            4.2.3 转多抗抗虫基因的发展第30-31页
第二章 立题背景及技术路线第31-33页
    1 立题背景第31-32页
    2 技术路线第32-33页
第三章 抗草甘膦除草剂棉花的获得及相关研究第33-52页
    1 材料方法第33-41页
        1.1 棉花材料及植物表达载体构建第33-34页
        1.2 农杆菌转化及菌株中目标基因的检测第34-35页
        1.3 草甘膦不同浓度梯度的筛选及愈伤诱导第35-36页
        1.4 外源G10aroA的棉花转化及再生植株的获得第36页
        1.5 棉花DNA提取及PCR检测第36-38页
        1.6 RNA提取及实时荧光定量PCR分析第38页
        1.7 Western-blot免疫印迹分析第38-41页
    2 结果与分析第41-52页
        2.1 草甘膦胁迫下棉花受体耐的伤诱导筛选比较第41页
        2.2 不同草甘膦浓度条件下棉花外植体的愈伤生长情况第41-42页
        2.3 不同草甘膦浓度条件下棉花外植体的愈伤诱导率统计第42页
        2.4 农杆菌介导的外源G10aroA棉花转化及再生株系的获得第42-43页
        2.5 再生棉花株系基因组外源G10aroA的PCR检测第43-44页
        2.6 转基因棉花的抗性筛选第44-45页
            2.6.1 受体材料种子发芽的草甘膦抗性鉴定第44-45页
            2.6.2 再生植株的的草甘膦抗性鉴定第45页
        2.7 转基因棉花株系不同组织中外源G10aroA的转录分析第45-46页
        2.8 外源G10aroA在棉花中的蛋白表达第46-47页
        2.9 转基因植株的田间抗性鉴定第47-48页
            2.9.1 受体材料的幼苗的抗性鉴定第47-48页
            2.9.2 转基因材料的田间抗性鉴定第48页
        2.10 讨论第48-52页
第四章 转抗虫抗草甘膦基因棉花株系的获得第52-63页
    1 材料方法第52-58页
        1.1 棉花材料及植物表达载体构建第52-53页
        1.2 农杆菌转化及菌株中目标基因的检测第53-54页
        1.3 草甘膦不同浓度梯度的筛选及愈伤诱导第54-55页
        1.4 棉花受体转化及再生植株的获得第55页
        1.5 棉花DNA提取及PCR检测第55-56页
        1.7 Western-blot免疫印迹分析第56-58页
    2 结果分析第58-60页
        2.1 转基因株系T_0的G10aroA基因检测第58页
        2.2 转基因株系的G10aroA蛋白的初步检测第58-59页
        2.3 转vip3基因棉花的PCR初步检测第59页
        2.4 再生株的抗草甘膦初步抗性筛选第59-60页
        2.5 转vip3基因棉花的抗虫性检测第60页
    3 讨论第60-63页
        3.1 转基因安全性及发展趋势第60-61页
        3.2 vips基因在棉花中利用的价值第61页
        3.3 本研究中草甘膦筛选存在的问题及对策第61-62页
        3.4 Vip3蛋白的检测第62-63页
第五章 结语第63-64页
参考文献第64-72页
附录第72-76页
ABSTRACT第76-77页
附录:博±期间发表的文章及专利等第78-80页
致谢第80页

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