摘要 | 第7-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第10-31页 |
1 我国棉花产区及棉花种质资源简述 | 第10页 |
2 棉花转基因种质创新研究 | 第10-11页 |
3 草甘膦及在作物中的相关研究利用进展 | 第11-23页 |
3.1 草甘麟作用特点与抗草甘麟作物培育对策 | 第12-16页 |
3.2 抗草甘膦基因来源及相关分子生物学研究 | 第16-18页 |
3.3 棉花抗草甘膦的相关研究 | 第18-19页 |
3.4 草甘膦的降解及对生物安全性的影响 | 第19-20页 |
3.5 抗草甘膦基因专利与转基因作物的商业化竞争 | 第20-21页 |
3.6 草甘膦使用、杂草防治与抗性产生 | 第21-23页 |
4 抗虫基因的发掘及在作物中的利用 | 第23-31页 |
4.1 第一代抗虫基因Bt的相关研究 | 第23-28页 |
4.1.1 苏云金芽孢杆菌(Bt)毒素蛋白的作用机理及种类 | 第23-24页 |
4.1.2 Cry毒素对不同昆虫的作用特点 | 第24-26页 |
4.1.3 转Bt基因抗虫棉的成功及可能存在的风险 | 第26-28页 |
4.2 第二代杀虫蛋白VIPs的发掘 | 第28-31页 |
4.2.1 VIPs作用机理及种类 | 第28-29页 |
4.2.2 转vip3基因作物的杀虫研究 | 第29-30页 |
4.2.3 转多抗抗虫基因的发展 | 第30-31页 |
第二章 立题背景及技术路线 | 第31-33页 |
1 立题背景 | 第31-32页 |
2 技术路线 | 第32-33页 |
第三章 抗草甘膦除草剂棉花的获得及相关研究 | 第33-52页 |
1 材料方法 | 第33-41页 |
1.1 棉花材料及植物表达载体构建 | 第33-34页 |
1.2 农杆菌转化及菌株中目标基因的检测 | 第34-35页 |
1.3 草甘膦不同浓度梯度的筛选及愈伤诱导 | 第35-36页 |
1.4 外源G10aroA的棉花转化及再生植株的获得 | 第36页 |
1.5 棉花DNA提取及PCR检测 | 第36-38页 |
1.6 RNA提取及实时荧光定量PCR分析 | 第38页 |
1.7 Western-blot免疫印迹分析 | 第38-41页 |
2 结果与分析 | 第41-52页 |
2.1 草甘膦胁迫下棉花受体耐的伤诱导筛选比较 | 第41页 |
2.2 不同草甘膦浓度条件下棉花外植体的愈伤生长情况 | 第41-42页 |
2.3 不同草甘膦浓度条件下棉花外植体的愈伤诱导率统计 | 第42页 |
2.4 农杆菌介导的外源G10aroA棉花转化及再生株系的获得 | 第42-43页 |
2.5 再生棉花株系基因组外源G10aroA的PCR检测 | 第43-44页 |
2.6 转基因棉花的抗性筛选 | 第44-45页 |
2.6.1 受体材料种子发芽的草甘膦抗性鉴定 | 第44-45页 |
2.6.2 再生植株的的草甘膦抗性鉴定 | 第45页 |
2.7 转基因棉花株系不同组织中外源G10aroA的转录分析 | 第45-46页 |
2.8 外源G10aroA在棉花中的蛋白表达 | 第46-47页 |
2.9 转基因植株的田间抗性鉴定 | 第47-48页 |
2.9.1 受体材料的幼苗的抗性鉴定 | 第47-48页 |
2.9.2 转基因材料的田间抗性鉴定 | 第48页 |
2.10 讨论 | 第48-52页 |
第四章 转抗虫抗草甘膦基因棉花株系的获得 | 第52-63页 |
1 材料方法 | 第52-58页 |
1.1 棉花材料及植物表达载体构建 | 第52-53页 |
1.2 农杆菌转化及菌株中目标基因的检测 | 第53-54页 |
1.3 草甘膦不同浓度梯度的筛选及愈伤诱导 | 第54-55页 |
1.4 棉花受体转化及再生植株的获得 | 第55页 |
1.5 棉花DNA提取及PCR检测 | 第55-56页 |
1.7 Western-blot免疫印迹分析 | 第56-58页 |
2 结果分析 | 第58-60页 |
2.1 转基因株系T_0的G10aroA基因检测 | 第58页 |
2.2 转基因株系的G10aroA蛋白的初步检测 | 第58-59页 |
2.3 转vip3基因棉花的PCR初步检测 | 第59页 |
2.4 再生株的抗草甘膦初步抗性筛选 | 第59-60页 |
2.5 转vip3基因棉花的抗虫性检测 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
3.1 转基因安全性及发展趋势 | 第60-61页 |
3.2 vips基因在棉花中利用的价值 | 第61页 |
3.3 本研究中草甘膦筛选存在的问题及对策 | 第61-62页 |
3.4 Vip3蛋白的检测 | 第62-63页 |
第五章 结语 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
附录 | 第72-76页 |
ABSTRACT | 第76-77页 |
附录:博±期间发表的文章及专利等 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |