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鹅OAZ基因克隆、表达及其在卵泡颗粒细胞中的作用研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写符号说明第8-11页
1 文献综述第11-23页
    1.1 多胺概述第11-15页
        1.1.1 多胺的合成与分解代谢第11-12页
        1.1.2 多胺稳态的维持第12-13页
        1.1.3 多胺调控细胞周期第13-14页
        1.1.4 多胺与细胞的增殖凋亡第14-15页
        1.1.5 多胺参与细胞凋亡过程的作用机理第15页
    1.2 多胺调控动物的繁殖第15-18页
        1.2.1 多胺与类固醇激素的相互作用第15-16页
        1.2.2 多胺调控雄性动物的繁殖第16-17页
        1.2.3 多胺调控雌性动物的繁殖第17-18页
    1.3 OAZ家族研究进展第18-20页
        1.3.1 OAZ家族成员简介第18-19页
        1.3.2 OAZs基因序列及结构第19页
        1.3.3 OAZ1基因的功能第19-20页
    1.4 禽类卵泡发育第20-22页
        1.4.1 禽类卵泡发育特点及形态划分第20-22页
        1.4.2 颗粒细胞与卵泡发育第22页
    1.5 本实验目的及意义第22-23页
2 材料与方法第23-35页
    2.1 试验材料第23-24页
        2.1.1 试验动物及样品采集第23页
        2.1.2 主要的仪器设备第23页
        2.1.3 主要的试剂及试剂盒第23-24页
        2.1.4 主要的试剂配制第24页
    2.2 试验方法第24-35页
        2.2.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2克隆第24-27页
        2.2.2 四川白鹅不同组织及卵泡组织中OAZ1和OAZ2的定量检测第27-28页
        2.2.3 OAZ1基因的T碱基定点缺失第28-29页
        2.2.4 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体的构建第29-31页
        2.2.5 四川白鹅卵泡颗粒细胞分离培养第31页
        2.2.6 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体转染鹅卵泡颗粒细胞第31-32页
        2.2.7 实时荧光定量PCR第32-33页
        2.2.8 细胞培养基中雌激素的ELISA检测第33-35页
3 结果与分析第35-53页
    3.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2基因克隆及序列分析第35-44页
        3.1.1 鹅卵巢总RNA提取结果第35页
        3.1.2 OAZ1和OAZ2基因PCR扩增结果第35-36页
        3.1.3 鹅OAZ1和OAZ2基因核苷酸序列分析第36-40页
        3.1.4 鹅OAZ1和OAZ2氨基酸序列分析第40-42页
        3.1.5 鹅OAZ1和OAZ2基因进化树构建第42-44页
    3.2 四川白鹅OAZ1和OAZ2的表达模式第44-47页
        3.2.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2在组织中的表达第44-45页
        3.2.2 OAZ1和OAZ2四川白鹅组织中表达比例第45-46页
        3.2.3 四川白鹅OAZ1和OAZ2基因在卵巢及卵泡组织中的表达第46-47页
    3.3 OAZ1-MUTATION基因过表达载体构建第47-50页
        3.3.1 OAZ1基因定点T碱基缺失第47-48页
        3.3.2 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体构建第48-49页
        3.3.3 pEGFP/N1-OAZ1-mutation转染卵泡颗粒细胞及鉴定第49-50页
    3.4 对多胺代谢基因的影响第50-51页
    3.5 对增殖、凋亡相关基因表达的影响第51页
    3.6 对激素受体基因表达及雌激素分泌的影响第51-53页
4 讨论第53-58页
    4.1 鹅OAZ1和OAZ2基因生物信息学分析第53页
    4.2 鹅OAZ1和OAZ2组织表达模式分析第53-55页
    4.3 鹅卵泡组织中OAZ1和OAZ2表达规律第55-56页
    4.4 OAZ1过表达对鹅卵泡颗粒细胞的作用第56-58页
        4.4.1 对多胺代谢基因表达的影响第56-57页
        4.4.2 对增殖和凋亡关键调控基因表达的影响第57页
        4.4.3 对类固醇激素受体基因表达及雌激素分泌的分析第57-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-68页
致谢第68-70页
硕士研究生学习期间发表文章第70页

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