摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写符号说明 | 第8-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 多胺概述 | 第11-15页 |
1.1.1 多胺的合成与分解代谢 | 第11-12页 |
1.1.2 多胺稳态的维持 | 第12-13页 |
1.1.3 多胺调控细胞周期 | 第13-14页 |
1.1.4 多胺与细胞的增殖凋亡 | 第14-15页 |
1.1.5 多胺参与细胞凋亡过程的作用机理 | 第15页 |
1.2 多胺调控动物的繁殖 | 第15-18页 |
1.2.1 多胺与类固醇激素的相互作用 | 第15-16页 |
1.2.2 多胺调控雄性动物的繁殖 | 第16-17页 |
1.2.3 多胺调控雌性动物的繁殖 | 第17-18页 |
1.3 OAZ家族研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 OAZ家族成员简介 | 第18-19页 |
1.3.2 OAZs基因序列及结构 | 第19页 |
1.3.3 OAZ1基因的功能 | 第19-20页 |
1.4 禽类卵泡发育 | 第20-22页 |
1.4.1 禽类卵泡发育特点及形态划分 | 第20-22页 |
1.4.2 颗粒细胞与卵泡发育 | 第22页 |
1.5 本实验目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
2.1 试验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 试验动物及样品采集 | 第23页 |
2.1.2 主要的仪器设备 | 第23页 |
2.1.3 主要的试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
2.1.4 主要的试剂配制 | 第24页 |
2.2 试验方法 | 第24-35页 |
2.2.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2克隆 | 第24-27页 |
2.2.2 四川白鹅不同组织及卵泡组织中OAZ1和OAZ2的定量检测 | 第27-28页 |
2.2.3 OAZ1基因的T碱基定点缺失 | 第28-29页 |
2.2.4 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体的构建 | 第29-31页 |
2.2.5 四川白鹅卵泡颗粒细胞分离培养 | 第31页 |
2.2.6 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体转染鹅卵泡颗粒细胞 | 第31-32页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.8 细胞培养基中雌激素的ELISA检测 | 第33-35页 |
3 结果与分析 | 第35-53页 |
3.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2基因克隆及序列分析 | 第35-44页 |
3.1.1 鹅卵巢总RNA提取结果 | 第35页 |
3.1.2 OAZ1和OAZ2基因PCR扩增结果 | 第35-36页 |
3.1.3 鹅OAZ1和OAZ2基因核苷酸序列分析 | 第36-40页 |
3.1.4 鹅OAZ1和OAZ2氨基酸序列分析 | 第40-42页 |
3.1.5 鹅OAZ1和OAZ2基因进化树构建 | 第42-44页 |
3.2 四川白鹅OAZ1和OAZ2的表达模式 | 第44-47页 |
3.2.1 四川白鹅OAZ1和OAZ2在组织中的表达 | 第44-45页 |
3.2.2 OAZ1和OAZ2四川白鹅组织中表达比例 | 第45-46页 |
3.2.3 四川白鹅OAZ1和OAZ2基因在卵巢及卵泡组织中的表达 | 第46-47页 |
3.3 OAZ1-MUTATION基因过表达载体构建 | 第47-50页 |
3.3.1 OAZ1基因定点T碱基缺失 | 第47-48页 |
3.3.2 pEGFP/N1-OAZ1-mutation过表达载体构建 | 第48-49页 |
3.3.3 pEGFP/N1-OAZ1-mutation转染卵泡颗粒细胞及鉴定 | 第49-50页 |
3.4 对多胺代谢基因的影响 | 第50-51页 |
3.5 对增殖、凋亡相关基因表达的影响 | 第51页 |
3.6 对激素受体基因表达及雌激素分泌的影响 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-58页 |
4.1 鹅OAZ1和OAZ2基因生物信息学分析 | 第53页 |
4.2 鹅OAZ1和OAZ2组织表达模式分析 | 第53-55页 |
4.3 鹅卵泡组织中OAZ1和OAZ2表达规律 | 第55-56页 |
4.4 OAZ1过表达对鹅卵泡颗粒细胞的作用 | 第56-58页 |
4.4.1 对多胺代谢基因表达的影响 | 第56-57页 |
4.4.2 对增殖和凋亡关键调控基因表达的影响 | 第57页 |
4.4.3 对类固醇激素受体基因表达及雌激素分泌的分析 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
硕士研究生学习期间发表文章 | 第70页 |