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山羊PTHrP基因对乳腺上皮细胞中几个钙代谢相关基因的表达调控研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·PTHrP 等几个基因在钙代谢方面的研究进展第13-18页
     ·PTHrP 基因的结构和功能概述第13页
     ·PTHrP 基因在动物骨钙代谢中的作用第13-14页
     ·PTHrP 基因在乳腺钙代谢中的作用第14-16页
     ·ΔFosB 基因在钙代谢中的作用第16页
     ·MMP-9 基因在钙代谢中的作用第16-17页
     ·Runx2、Smad4、S100A4 和 S100A13 基因在钙代谢中的作用第17-18页
     ·PTHrP 与几个钙代谢相关基因的关系第18页
   ·RNA 干扰的研究进展第18-20页
     ·RNAi 的定义及发展第18-19页
     ·RNAi 的作用机制及特征第19页
     ·RNAi 的生物学意义第19-20页
   ·腺病毒载体的研究进展第20-21页
     ·腺病毒的基本结构第20页
     ·腺病毒载体的发展简介第20-21页
     ·腺病毒载体的构建及优点第21页
   ·本研究的目的和意义第21-23页
第二章 靶向山羊 PTHrP 的基因 shRNA 干扰重组腺病毒的制备及干扰效率检测第23-35页
   ·试验材料第23-24页
     ·主要材料及试剂第23页
     ·主要仪器设备第23页
     ·主要试剂配方第23-24页
   ·试验方法第24-29页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒的包装与扩增第24-25页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞第25-26页
     ·RT-qPCR 检测 PTHrP mRNA 的表达第26-27页
     ·Western Blotting 检测 PTHrP 蛋白的表达量第27-29页
       ·细胞总蛋白的提取及定量第28页
       ·PTHrP 蛋白的 Western Blotting 检测第28-29页
   ·试验结果与分析第29-32页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒的包装、扩增及滴度测定第29-30页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞第30页
     ·荧光 RT-qPCR 检测 PTHrP 基因 mRNA 表达第30-32页
     ·Western Blotting 检测 PTHrP 蛋白的表达量第32页
   ·讨论第32-33页
     ·重组腺病毒的包装、扩增及滴度测定第32-33页
     ·干扰效率的检测第33页
   ·小结第33-35页
第三章 山羊 PTHrP 基因对ΔFosB 和 MMP-9 基因表达的影响第35-40页
   ·材料与方法第35-36页
     ·试验材料第35页
     ·试验仪器第35页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞第35页
     ·Western Blot 检测 PTHrP 干扰重组腺病毒对ΔFosB 蛋白表达的影响第35页
     ·RT-qPCR 检测 PTHrP 干扰重组腺病毒对ΔFosB 及 MMP-9 基因的影响第35-36页
   ·试验结果与分析第36-38页
     ·Western Blotting 检测 PTHrP 干扰重组腺病毒对ΔFosB 蛋白表达的影响第36页
     ·RT-qPCR 检测 PTHrP 干扰重组腺病毒对ΔFosB 和 MMP-9 基因的影响第36-38页
   ·讨论第38-39页
   ·小结第39-40页
第四章 山羊 PTHrP 基因对 Runx2、Smad4、S100A4 和 S100A13 表达的影响第40-46页
   ·材料与方法第40-41页
     ·试验材料第40页
     ·试验仪器第40页
     ·PTHrP 干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞第40页
     ·RT-qPCR 检测 PTHrP 干扰重组腺病毒对钙代谢相关基因的影响第40-41页
   ·试验结果与分析第41-44页
     ·乳腺上皮细胞中总 RNA 提取第41-42页
     ·RT-qPCR 检测第42-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第五章 ΔFosB 基因对 Runx2、Smad4、S100A4 和 S100A13 的表达调控研究第46-50页
   ·材料与方法第46-47页
     ·试验材料第46页
     ·主要仪器设备第46页
     ·ΔFosB 干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞第46页
     ·RT-qPCR 检测ΔFosB 干扰重组腺病毒对钙代谢相关基因的影响第46-47页
   ·试验结果与分析第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-56页
缩略词第56-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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