| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.1.1 课题背景及来源 | 第9-10页 |
| 1.1.2 研究的目的及意义 | 第10页 |
| 1.2 风湿性心脏病的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 风湿性心脏病临床表现 | 第10页 |
| 1.2.2 风湿性心脏病的发病机制 | 第10-11页 |
| 1.2.3 风湿性心脏病的流行病学研究 | 第11-12页 |
| 1.2.4 风湿性心脏病的分子生物学研究 | 第12-13页 |
| 1.3 转录组测序技术研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 转录组的概念 | 第13页 |
| 1.3.2 转录组测序技术的原理及优势 | 第13-15页 |
| 1.3.3 转录组测序技术的应用及面临的挑战 | 第15-16页 |
| 1.4 TPT1基因的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4.1 TPT1基因序列信息 | 第16页 |
| 1.4.2 TCTP蛋白的表达情况 | 第16-17页 |
| 1.4.3 TCTP蛋白的结构和功能 | 第17-18页 |
| 1.5 主要研究内容及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验材料、菌株及质粒载体 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验仪器与常用网站、软件 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 组织的获取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 总RNA提取、逆转录及实时定量PCR | 第23-25页 |
| 2.2.3 载玻片的处理 | 第25-26页 |
| 2.2.4 HE染色 | 第26页 |
| 2.2.5 RNA探针的制备 | 第26-29页 |
| 2.2.6 组织石蜡切片制备 | 第29-30页 |
| 2.2.7 组织冰冻切片制备 | 第30-31页 |
| 2.2.8 切片荧光原位杂交 | 第31-32页 |
| 2.2.9 荧光免疫组织化学 | 第32页 |
| 2.2.10 Western Blot | 第32-34页 |
| 2.2.11 甲基化分析 | 第34-37页 |
| 第3章 基于RNA-seq数据分析结果的风湿性心脏病关联基因的筛选与鉴定 | 第37-46页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 患者信息 | 第37-38页 |
| 3.3 瓣膜病组与风湿性心脏病组病理特点变化观察 | 第38-39页 |
| 3.4 RNA-seq数据分析和基因筛选 | 第39-43页 |
| 3.4.1 RNA-seq数据检测质量 | 第39页 |
| 3.4.2 分析瓣膜病组和风湿性心脏病组样本基因表达差异 | 第39-40页 |
| 3.4.3 瓣膜病组和风湿性心脏病组样本差异表达基因数量 | 第40-41页 |
| 3.4.4 瓣膜病组和风湿性心脏病组差异表达基因交集基因分类 | 第41页 |
| 3.4.5 瓣膜病组和风湿性心脏病组差异表达基因交集部分GO功能注释 | 第41-42页 |
| 3.4.6 根据RNA-seq数据结果初步选择候选基因 | 第42-43页 |
| 3.5 候选基因表达实验验证 | 第43-44页 |
| 3.5.1 SCARNA21、ACTA1、TRO基因差异水平鉴定 | 第43页 |
| 3.5.2 UBAP2L、SNORD9、TNNT3基因差异表达水平 | 第43-44页 |
| 3.5.3 TPT1基因差异表达水平 | 第44页 |
| 3.6 讨论 | 第44-45页 |
| 3.7 本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 TPT1基因在瓣膜病组和风湿性心脏病组样本中的差异表达分析 | 第46-54页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 TPT1 RNA探针合成 | 第46-47页 |
| 4.3 荧光原位杂交分析TPT1的表达情况 | 第47-49页 |
| 4.3.1 荧光原位杂交分析TPT1在瓣膜病组和风湿性心脏病组的表达 | 第47-48页 |
| 4.3.2 荧光原位杂交分析TPT1在成体小鼠心脏组织的表达 | 第48-49页 |
| 4.4 荧光免疫组化分析TPT1在瓣膜病组和风湿性心脏病组样本中的表达41 | 第49-50页 |
| 4.5 Western Blot分析TPT1在瓣膜病组和风湿性心脏病组样本中的表达 | 第50-51页 |
| 4.6 甲基化修饰调控与TPT1表达的关系 | 第51-52页 |
| 4.7 讨论 | 第52-53页 |
| 4.8 本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录一 | 第62-63页 |
| 附录二 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
