摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-31页 |
第一章 microRNA生物学功能 | 第13-23页 |
1 miRNA的发现 | 第13页 |
2 miRNA生物合成 | 第13-17页 |
·miRNA基因转录pri-miRNA | 第15页 |
·pri-miRNA经剪切产生pre-miRNA | 第15-16页 |
·pre-miRNA由exportin 5转运出核 | 第16页 |
·Dicer剪切pre-miRNA生产miRNA双链 | 第16页 |
·RISC的组装 | 第16-17页 |
3 miRNA的表达调控 | 第17-19页 |
·转录调控 | 第17页 |
·转录后调控 | 第17-19页 |
·miRNA网络中的反馈回路 | 第19页 |
4 miRNA生物学作用机制 | 第19-23页 |
·降解mRNA序列 | 第19-20页 |
·阻断翻译的起始 | 第20页 |
·转运到处理体 | 第20页 |
·激活翻译 | 第20-23页 |
第二章 Leptin对脂代谢相关基因及microRNA表达调控 | 第23-31页 |
1 肝脏脂代谢及其调控 | 第23-24页 |
·甘油三酯的合成 | 第23-24页 |
·胆固醇的合成 | 第24页 |
2 miRNA在脂代谢中的作用 | 第24-28页 |
·miR-122 | 第25-26页 |
·miR-370 | 第26-27页 |
·miR-33基因家族 | 第27-28页 |
·其它microRNA | 第28页 |
3 Leptin对肝脏胆固醇代谢的调控及MIRNA的参与 | 第28-31页 |
·leptin对胆固醇代谢的调控 | 第28-29页 |
·leptin与miRNA的关联性研究 | 第29页 |
·miRNA与鸡脂代谢 | 第29-31页 |
第二篇 试验研究 | 第31-63页 |
第三章 蛋内注射leptin对新生雏鸡肝脏胆固醇代谢相关基因表达的影响 | 第31-43页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
·试验动物及处理 | 第31-32页 |
·主要试剂和仪器 | 第32页 |
·主要溶液 | 第32-33页 |
·Real time RT-PCR定量测定胆固醇代谢相关基因表达 | 第33-34页 |
·免疫印迹(western blot,WB)检测胆固醇代谢关键点基因蛋白质含量 | 第34-36页 |
·数据分析及统计 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-40页 |
·胆固醇代谢相关基因的mRNA水平 | 第36-37页 |
·胆固醇代谢相关基因的蛋白质水平 | 第37-39页 |
·胆固醇代谢转录调节因子SREBP-1的mRNA及SREBP-2的mRNA和蛋白质表达 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
第四章 蛋内注射leptin对新生雏鸡肝脏胆固醇代谢相关microRNA表达的影响 | 第43-49页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
·试验动物及处理 | 第43页 |
·主要试剂和仪器 | 第43页 |
·Real time RT-PCR定量测定胆固醇代谢相关基因表达 | 第43-46页 |
·数据分析及统计 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-47页 |
·胆固醇代谢相关miRNA表达 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第五章 胆固醇代谢相关microRNA的功能验证 | 第49-63页 |
1 材料与方法 | 第49-59页 |
·细胞系、菌株及质粒 | 第49页 |
·主要试剂和仪器 | 第49-52页 |
·pGL3 control-3'UTR质粒构建 | 第52-59页 |
·数据分析及统计 | 第59页 |
2 结果与分析 | 第59-61页 |
·pGL3 control-SREBP-1/HMGCR 3'UTR质粒构建 | 第59页 |
·miRNA过表达质粒构建 | 第59-60页 |
·靶向SREBP-1的miRNA功能验证 | 第60-61页 |
·靶向HMGCR的miRNA功能验证 | 第61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第79页 |