目录 | 第3-5页 |
摘要 | 第5-11页 |
Abstract | 第11页 |
主要仪器和试剂 | 第21-23页 |
英文缩写词表 | 第23-24页 |
第一章 阿尔茨海默病(AD)的ApoE基因单核苷酸多态性分析 | 第24-36页 |
1 前言 | 第24-25页 |
2 研究对象 | 第25-26页 |
3 方法 | 第26-28页 |
3.1 外周血中基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
3.1.1 血样采集 | 第26页 |
3.1.2 外周血淋巴细胞的分离 | 第26页 |
3.1.3 DNA的提取 | 第26-27页 |
3.2 ApoE基因多态性分析 | 第27-28页 |
3.2.1 PCR反应扩增 | 第27页 |
3.2.2 PCR扩增产物的纯化 | 第27页 |
3.2.3 ApoE基因PCR扩增产物测序 | 第27-28页 |
3.2.4 统计学处理 | 第28页 |
4 结果 | 第28-30页 |
4.1 AD患者的ApoE基因突变位点分析 | 第28-29页 |
4.2 正常人群组的ApoE基因SNP位点分析 | 第29-30页 |
5 讨论 | 第30-36页 |
第二章 神经保护肽Humanin抗AD的作用研究和表达 | 第36-53页 |
第一节 Humanin抗β淀粉蛋白诱导神经细胞凋亡初探 | 第37-47页 |
1 前言 | 第37页 |
2 实验材料 | 第37-38页 |
2.1 细胞系 | 第37页 |
2.2 细胞培养试剂及材料 | 第37页 |
2.3 凋亡检测试剂盒 | 第37-38页 |
2.4 噻唑蓝MTT | 第38页 |
2.5 二甲基亚砜DMSO | 第38页 |
3 方法 神经细胞凋亡模型构建 | 第38-39页 |
3.1 神经元分化PC12细胞株的构建 | 第38页 |
3.1.1 PC12细胞培养 | 第38页 |
3.1.2 Rat-β-NGF处理 | 第38页 |
3.2 制备神经细胞凋亡模型 | 第38-39页 |
3.3 观察Humanin合成肽抗Aβ诱导的神经细胞凋亡作用 | 第39页 |
3.4 Aβ对Rat-β-NGF诱导的PC12细胞增殖活性的影响 | 第39页 |
3.5 统计学分析 | 第39页 |
4 实验结果 神经细胞凋亡模型构建结果 | 第39-43页 |
4.1 神经元分化PC12细胞株的构建结果 | 第39-41页 |
4.2 β-amyloid诱导神经元分化PC12细胞凋亡模型的构建结果 | 第41-42页 |
4.3 Humanin对Aβ诱导神经元分化PC12细胞凋亡作用结果 | 第42页 |
4.4 Aβ对Rat-β-NGF诱导的PC12细胞增殖活性的影响结果(MTT检测结果) | 第42-43页 |
5 讨论 | 第43-47页 |
第二节 Humanin克隆和表达 | 第47-53页 |
1 前言 | 第47页 |
2 材料 | 第47-48页 |
2.1 菌株和质粒 | 第47页 |
2.2 限制性内切酶、连接酶 | 第47页 |
2.3 模板和引物合成 | 第47-48页 |
3 方法 | 第48页 |
3.1 目的基因扩增 | 第48页 |
3.2 重组质粒构建及测序鉴定 | 第48页 |
3.3 重组蛋白表达及分子量测定 | 第48页 |
4 结果 | 第48-51页 |
4.1 目的基因扩增结果 | 第48-49页 |
4.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第49-50页 |
4.3 重组蛋白表达及分子量测定 | 第50-51页 |
5 讨论 | 第51-53页 |
综述一 单核苷酸多态性在神经科学领域研究进展 | 第53-60页 |
综述二 阿尔茨海默病相关基因分析和治疗 | 第60-70页 |
致谢 | 第70-81页 |