| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| 1.1 甘蔗概况 | 第9-14页 |
| 1.1.1 甘蔗简介 | 第9-10页 |
| 1.1.2 甘蔗的起源和遗传基础 | 第10-11页 |
| 1.1.3 甘蔗体内蔗糖的转运和运输途径 | 第11-14页 |
| 1.2 植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 蔗糖转运蛋白的存在 | 第15-16页 |
| 1.2.2 蔗糖转运蛋白的分类 | 第16-17页 |
| 1.2.3 蔗糖转运蛋白的结构 | 第17-19页 |
| 1.2.4 蔗糖转运蛋白的运输特征 | 第19页 |
| 1.2.5 蔗糖转运蛋白的生物学功能 | 第19页 |
| 1.3 甘蔗转基因研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 增强糖代谢转基因甘蔗 | 第20页 |
| 1.3.2 抗虫转基因甘蔗 | 第20页 |
| 1.3.3 抗病转基因甘蔗 | 第20-21页 |
| 1.4 RNA干扰技术 | 第21-24页 |
| 1.4.1 RNAi的产生与发展 | 第21-22页 |
| 1.4.2 RNAi的作用特征 | 第22页 |
| 1.4.3 RNAi与其它基因表达抑制技术的比较 | 第22页 |
| 1.4.4 RNAi技术的应用 | 第22-24页 |
| 1.5 本研究的目的意义、内容和技术路线 | 第24-25页 |
| 1.5.1 研究目的意义 | 第24-25页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第25页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-41页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25-26页 |
| 2.1.2 质粒及菌种 | 第26页 |
| 2.1.3 工具酶和主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 常用培养基、抗生素和激素的配制 | 第26-27页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 甘蔗ShSUT4的RNAi载体的构建 | 第27-34页 |
| 2.2.2 ShSUT4RI基因遗传转化甘蔗 | 第34-36页 |
| 2.2.3 转化植株的分子检测 | 第36-39页 |
| 2.2.4 转基因植株的HPLC检测 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-51页 |
| 3.1 甘蔗ShSUT4的RNAi体构建 | 第41-44页 |
| 3.1.1 甘蔗ShSUT4的克隆载体SUT4RI19T的构建 | 第41页 |
| 3.1.2 甘蔗ShSUT4的RNAi干扰载体pCAMBIA-iShSUT4的构建 | 第41-43页 |
| 3.1.3 植物表达载体303-3300的构建 | 第43页 |
| 3.1.4 植物表达载体303-3300转化根癌农杆菌 | 第43-44页 |
| 3.2 农杆菌介导的甘蔗转化 | 第44-46页 |
| 3.2.1 甘蔗胚性愈伤组织的诱导 | 第44页 |
| 3.2.2 农杆菌浸染后的愈伤组织分化成苗 | 第44-45页 |
| 3.2.3 甘蔗幼苗的PPT筛选 | 第45-46页 |
| 3.2.4 甘蔗抗性苗的炼苗 | 第46页 |
| 3.3 转基因植株的分子检测 | 第46-49页 |
| 3.3.1 转化植株的PCR检测 | 第46-48页 |
| 3.3.2 转化植株的RT-PCR检测 | 第48页 |
| 3.3.3 转化植株的ShSUT4基因的表达模式分析 | 第48-49页 |
| 3.4 转基因植株的HPLC分析 | 第49-51页 |
| 3.4.1 标准曲线的制作 | 第49页 |
| 3.4.2 样品分析 | 第49-50页 |
| 3.4.3 精密度与回收率 | 第50页 |
| 3.4.4 计算方法 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51页 |
| 5 讨论 | 第51-52页 |
| 5.1 关于HPLC对甘蔗叶片糖含量的测定 | 第51页 |
| 5.2 关于RNAi技术 | 第51-52页 |
| 5.3 关于甘蔗转基因 | 第52页 |
| 6 本实验的后续工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
