| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词简表 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| ·背景 | 第12-16页 |
| ·p53 的结构功能以及突变意义 | 第12-13页 |
| ·wrap53 基因的结构和与p53 的相互作用关系 | 第13-16页 |
| ·顺铂的化疗机理以及在骨肉瘤临床的应用 | 第16页 |
| ·本项研究课题的研究意义 | 第16页 |
| ·研究目标与研究内容 | 第16-18页 |
| ·研究目标 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 骨肉瘤细胞中wrap531α和p53 基因的克隆 | 第18-24页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·细胞来源以及菌种、质粒 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·酶、试剂盒及主要试剂 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-22页 |
| ·细胞培养 | 第19页 |
| ·总 RNA 提取、纯度鉴定以及 RT-PCR | 第19-20页 |
| ·3'-RACE | 第20-21页 |
| ·DNA 测序以及序列分析 | 第21页 |
| ·生物信息学方法分析wrap53 和p53 序列 | 第21-22页 |
| ·结果 | 第22-24页 |
| ·RT-PCR 检测wrap531α | 第22-23页 |
| ·PCR 产物DNA 测序结果 | 第23-24页 |
| 第三章 顺铂处理后wrap53 和p53 基因的表达情况 | 第24-32页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·细胞系 | 第24页 |
| ·培养基和药物 | 第24页 |
| ·酶、试剂盒以及主要试剂 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·细胞培养和顺铂药物处理 | 第24-25页 |
| ·总 RNA 提取、实时荧光定量 RT-PCR | 第25-26页 |
| ·蛋白电泳样品处理及 SDS-PAGE | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-32页 |
| ·wrap53 和 p53 的 mRNA 及 p53 蛋白的本底表达量 | 第27-28页 |
| ·MTT 检测顺铂对 U-2OS 和 HOS 细胞的毒性 | 第28-29页 |
| ·不同浓度顺铂处理后 wrap53 和 p53 基因的表达情况 | 第29-30页 |
| ·wrap53 和 p53 基因在 10μM 顺铂处理不同时间后的表达情况 | 第30-31页 |
| ·wrap53 和 p53 在 10 μM 顺铂处理不同时间后的表达情况 | 第31-32页 |
| 第四章 讨论 | 第32-34页 |
| ·U-2OS 中顺铂对于 wrap53 和 p53 的调节 | 第32页 |
| ·HOS 细胞中 wrap53 对于 p53 的调节 | 第32-33页 |
| ·结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 附件 综述 | 第37-44页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 个人简介 | 第46页 |
