中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略语表 | 第13-14页 |
前言 | 第14-15页 |
第一部分:C57BL/6 小鼠骨髓间充质干细胞、内皮祖细胞的分离、扩增及培养 | 第15-19页 |
实验一:C57BL/6 小鼠骨髓间充质干细胞及血管内皮前体细胞的分离、扩增及培养 | 第15-19页 |
1 材料 | 第15-16页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第15-16页 |
1.2 实验动物 | 第16页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第16页 |
2 方法 | 第16-17页 |
2.1 小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的分离和培养 | 第16-17页 |
2.2 小鼠血管内皮前体细胞(EPCs)的分离和培养 | 第17页 |
3 结果 | 第17-18页 |
3.1 MSCs及EPCs的形态学特征 | 第17-18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
第二部分:细胞间黏附分子 1(ICAM-1)在间充质干细胞(MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)间黏附作用的研究 | 第19-34页 |
实验一:细胞间黏附分子 1(ICAM-1)在间充质干细胞(MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)间黏附作用的研究 | 第19-34页 |
1 材料 | 第19-20页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第19-20页 |
1.2 实验动物 | 第20页 |
2 方法 | 第20-29页 |
2.1 细胞免疫荧光检测MSCs、EPCs及MSCs&EPCs组中ICAM-1 表达 | 第20-21页 |
2.2 实时定量PCR( RT-PCR)检测MSCs、EPCs及MSCs&EPCs组中ICAM-1m RNA表达水平 | 第21-23页 |
2.2.1 细胞准备及总RNA提取 | 第21-22页 |
2.2.2 反转录 | 第22页 |
2.2.3 荧光定量PCR检测 | 第22-23页 |
2.3 Western blotting检测MSCs、EPCs及MSCs&EPCs组中ICAM-1 蛋白表达水平 | 第23-27页 |
2.3.1 细胞准备 | 第23页 |
2.3.2 细胞总蛋白的提取 | 第23-24页 |
2.3.3 Western blot相关试剂的配制 | 第24-26页 |
2.3.4 凝胶的配制 | 第26页 |
2.3.5 凝胶电泳 | 第26-27页 |
2.3.6 转印蛋白及免疫检测 | 第27页 |
2.4 MSCs和EPCs的黏附实验 | 第27-29页 |
2.4.1 细胞准备 | 第27-28页 |
2.4.2 Mitotracker red的配制 | 第28页 |
2.4.3 DAPI标记MSCs | 第28页 |
2.4.4 Mitotracker red标记EPCs | 第28页 |
2.4.5 黏附实验 | 第28-29页 |
2.5 统计学方法 | 第29页 |
3 结果 | 第29-32页 |
3.1 细胞免疫荧光及荧光半定量检测ICAM-1 表达水平 | 第29-30页 |
3.2 RT-PCR检测ICAM-1 m RNA表达水平 | 第30页 |
3.3 Western blot检测ICAM-1 蛋白表达水平 | 第30-31页 |
3.4 抗ICAM-1 抗体对MSCs和EPCs间黏附作用的影响 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第三部分:白细胞介素 1(IL-1)诱导细胞间黏附分子 1(ICAM-1)表达增强促进骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)间黏附作用通过P38MAPK通路的研究 | 第34-44页 |
实验一:白细胞介素 1(IL-1)诱导细胞间黏附分子 1(ICAM-1)表达增强促进骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)间黏附作用通过P38MAPK通路的研究 | 第34-44页 |
1 材料 | 第34-35页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第34页 |
1.2 实验动物 | 第34页 |
1.3 主要溶液的配制 | 第34-35页 |
2 方法 | 第35-37页 |
2.1 条件培养基的提取 | 第35页 |
2.2 Elisa检测条件培养基中IL-1β 的表达水平 | 第35-37页 |
2.3 细胞免疫荧光检测IL-1β 诱导组、正常组及P38MAPK通路抑制剂组ICAM-1 的表达水平 | 第37页 |
2.3.1 细胞准备 | 第37页 |
2.3.2 细胞免疫荧光检测IL-1β 诱导组、正常组及P38MAPK通路抑制剂组ICAM-1 的表达水平 | 第37页 |
2.4 Western blot检测IL-1β 诱导组、正常组及P38MAPK通路抑制剂组ICAM-1的表达水平 | 第37页 |
2.5 黏附实验 | 第37页 |
2.6 统计学方法 | 第37页 |
3 结果 | 第37-42页 |
3.1 Elisa检测条件培养基中IL-1β 的表达水平 | 第37-38页 |
3.2 细胞免疫荧光检测IL-1β 诱导组、正常组及P38MAPK通路抑制剂组ICAM-1 的表达水平 | 第38-40页 |
3.3 Western blot检测ICAM-1 及P38MAPK蛋白的表达水平 | 第40-42页 |
3.4 MSCs和EPCs间的黏附实验 | 第42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 | 第50-65页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第67页 |