| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 禽网状内皮组织增生病研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 禽网状内皮组织增生病定义 | 第11页 |
| 1.1.2 病毒的形态结构及核酸组成 | 第11-12页 |
| 1.1.3 REV的稳定性 | 第12页 |
| 1.1.4 RE动物的临床主要症状 | 第12页 |
| 1.1.5 RE动物的主要病理变化 | 第12页 |
| 1.1.6 RE的流行病学 | 第12-14页 |
| 1.1.7 REV引起病禽免疫抑制机制 | 第14页 |
| 1.1.8 REV与其他病原的混合感染 | 第14-15页 |
| 1.1.9 RE的诊断方法 | 第15页 |
| 1.1.10 RE的防治 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞凋亡研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 细胞凋亡定义及形态特点 | 第16页 |
| 1.2.2 细胞凋亡主要途径 | 第16-17页 |
| 1.2.3 细胞凋亡有关的主要基因 | 第17-18页 |
| 1.2.4 细胞凋亡的意义 | 第18-19页 |
| 1.2.5 细胞凋亡主要的检测方法 | 第19-20页 |
| 1.3 p53基因的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 p53基因的结构及功能 | 第20页 |
| 1.3.2 P53家族 | 第20-21页 |
| 1.3.3 P53与细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.3.4 P53失活机制 | 第21-22页 |
| 1.3.5 P53蛋白的检测 | 第22页 |
| 1.3.6 p53突变与肿瘤的发生 | 第22-23页 |
| 1.3.7 P53调控机制 | 第23页 |
| 1.3.8 p53基因治疗 | 第23页 |
| 1.3.9 P53在兽医学中的研究现状 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第25页 |
| 2.1.2 REV毒株 | 第25页 |
| 2.1.3 主要生物制剂及化学试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器与设备 | 第26页 |
| 2.1.5 常用溶液及其配置 | 第26-30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 试验对象分组及处理 | 第30页 |
| 2.2.2 鸡P53的原核表达及多克隆抗体制备 | 第30-35页 |
| 2.2.3 病毒的繁殖 | 第35-37页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测鸡胚成纤维细胞凋亡数量 | 第37-38页 |
| 2.2.5 REV感染鸡胚成纤维细胞p53 m RNA表达的检测 | 第38-42页 |
| 2.2.6 REV感染鸡胚成纤维细胞P53蛋白表达变化 | 第42-43页 |
| 2.3 数据处理 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-63页 |
| 3.1 鸡p53截短基因的原核表达及多克隆抗体制备 | 第44-51页 |
| 3.1.1 鸡p53截短基因的克隆及序列分析 | 第44-47页 |
| 3.1.2 重组蛋白表达条件优化 | 第47-49页 |
| 3.1.3 重组蛋白纯化效果 | 第49页 |
| 3.1.4 重组蛋白及纯化后Western Blot检测 | 第49-50页 |
| 3.1.5 Western Blot检测多克隆抗体的特异性 | 第50页 |
| 3.1.6 兔抗鸡P53多克隆抗体效价测定 | 第50-51页 |
| 3.2 REV感染CEF后PCR鉴定 | 第51页 |
| 3.3 REV感染对SPF鸡胚成纤维细胞凋亡数量的影响 | 第51-54页 |
| 3.3.1 流式细胞术检测CEF细胞凋亡数量方法的建立 | 第51-52页 |
| 3.3.2 REV感染CEF对细胞凋亡数量的变化 | 第52-54页 |
| 3.4 REV感染CEF p53 mRNA表达变化 | 第54-61页 |
| 3.4.1 鸡胚成纤维细胞p53mRNA检测方法建立 | 第54-57页 |
| 3.4.2 p MD-18T-β-actin重组质粒标准曲线绘制 | 第57-58页 |
| 3.4.3 p MD-18T-p53重组质粒标准曲线绘制 | 第58-59页 |
| 3.4.4 鸡胚成纤维细胞p53mRNA含量检测 | 第59-61页 |
| 3.5 REV感染CEF p53 mRNA表达变化 | 第61页 |
| 3.6 REV感染CEF P53蛋白表达变化 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-68页 |
| 4.1 REV感染对SPF鸡胚成纤维细胞凋亡的影响 | 第63-64页 |
| 4.2 REV感染鸡胚成纤维细胞后p53m RNA表达及其蛋白的变化 | 第64-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第78页 |
