| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 脂肪组织及脂肪细胞分化调控 | 第11-14页 |
| 1.1.1 脂肪组织 | 第11页 |
| 1.1.2 脂肪细胞因子 | 第11-12页 |
| 1.1.3 脂肪细胞分化过程的基因调控 | 第12-14页 |
| 1.1.4 肥胖与代谢综合症 | 第14页 |
| 1.2 PPARγ 的结构与功能 | 第14-16页 |
| 1.2.1 PPARγ 的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 PPARγ 的功能及生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.3 脂联素的结构与功能 | 第16-18页 |
| 1.3.1 脂联素的结构 | 第16-18页 |
| 1.3.2 脂联素的功能 | 第18页 |
| 1.4 RUVBL2 蛋白的结构与功能 | 第18-21页 |
| 1.4.1 RUVBL2 的结构 | 第18-20页 |
| 1.4.2 RUVBL2 的功能及研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第23页 |
| 2.1.2 实验小鼠 | 第23页 |
| 2.1.3 载体、菌株及感受态 | 第23页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 分子生物学软件及相关网站 | 第25页 |
| 2.4 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.4.1 细胞培养及转染 | 第25-27页 |
| 2.4.2 目的片段的扩增、纯化与载体构建 | 第27-30页 |
| 2.4.3 RUVBL2 启动子区域PPARγ 位点的预测 | 第30页 |
| 2.4.4 双荧光素酶报告系统检测 | 第30-31页 |
| 2.4.5 染色质免疫共沉淀（Ch IP） | 第31-32页 |
| 2.4.6 实时定量PCR | 第32-33页 |
| 2.4.7 RNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.4.8 反转录 | 第34页 |
| 2.4.9 Western Blotting | 第34-35页 |
| 2.4.10 数据统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 RUVBL2 的组织表达谱 | 第36页 |
| 3.2 3T3-L1 成脂分化过程中PPARγ 和RUVBL2 的表达 | 第36-38页 |
| 3.2.1 PPARγ 和RUVBL2 的mRNA水平变化 | 第36-37页 |
| 3.2.2 3T3-L1 成脂分化过程中PPARγ 和RUVBL2 蛋白表达变化 | 第37-38页 |
| 3.3 PPARγ 对RUVBL2 启动子的调控 | 第38-44页 |
| 3.3.1 RUVBL2 启动子顺式元件的分析及启动子的克隆 | 第38-40页 |
| 3.3.2 PPARγ 上调RUVBL2 启动子活性 | 第40页 |
| 3.3.3 PPARγ 对RUVBL2 突变启动子的影响 | 第40-42页 |
| 3.3.4 PPARγ 与RUVBL2 启动子特异性的结合 | 第42-43页 |
| 3.3.5 RUVBL2 启动子上PPRE元件保守位点的分析 | 第43-44页 |
| 3.4 RUVBL2 敲减以及 PPARγ 激动剂/抑制剂对脂联素分泌的影响 | 第44-46页 |
| 3.4.1 RUVBL2 敲减脂联素分泌的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.2 PPARγ 激动剂/抑制剂对脂联素分泌的影响 | 第45-46页 |
| 3.5 RUVBL2 以及 PPARγ 超表达对脂联素分泌的影响 | 第46-50页 |
| 3.5.1 稳定转染脂联素基因HEK293 细胞的检测 | 第46页 |
| 3.5.2 RUVBL2 超表达对脂联素分泌的影响 | 第46-48页 |
| 3.5.3 PPARγ 超表达对脂联素分泌的影响 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论与创新点 | 第52-53页 |
| 5.1 结论 | 第52页 |
| 5.2 创新点 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
