| 符号说明 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-18页 |
| 1.1 鸭大舌-短喙综合征概述 | 第15页 |
| 1.2 病毒学 | 第15-16页 |
| 1.3 病毒的理化特性 | 第16-17页 |
| 1.3.1 鹅细小病毒的理化特性 | 第16-17页 |
| 1.3.2 鸭圆环病毒的理化特性 | 第17页 |
| 1.4 病毒的培养特性 | 第17-18页 |
| 1.4.1 鹅细小病毒的培养特性 | 第17页 |
| 1.4.2 鸭圆环病毒的培养特性 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 病例史 | 第18页 |
| 2.1.2 实验样本及其准备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 病毒、鸭胚和实验动物 | 第19页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.5 实验设备 | 第19页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.7 试验地点 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方案 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.3.1 实验室检测 | 第21-27页 |
| 2.3.1.1 送检病鸭的病理组织学诊断 | 第21-22页 |
| 2.3.1.2 送检病鸭的血涂片镜检 | 第22页 |
| 2.3.1.3 送检病鸭的血清指标检测 | 第22-23页 |
| 2.3.1.4 病料的RNA和DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.1.5 RNA逆转录为cDNA | 第24页 |
| 2.3.1.6 PCR鉴定 | 第24-26页 |
| 2.3.1.7 目的基因克隆转化及测序 | 第26-27页 |
| 2.3.1.8 测序结果的比对 | 第27页 |
| 2.3.2 细菌分离 | 第27页 |
| 2.3.3 病毒分离与增殖 | 第27-29页 |
| 2.3.3.1 病料处理 | 第27页 |
| 2.3.3.2 接种鸭胚，收集鸭胚尿囊液 | 第27-28页 |
| 2.3.3.3 鸭胚尿囊液的病毒基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.3.4 鸭胚尿囊液的PCR检测 | 第29页 |
| 2.3.3.5 鸭胚胚体的大体剖检观察 | 第29页 |
| 2.3.3.6 鸭胚胚体的大体剖检观察 | 第29页 |
| 2.3.4 纯化病毒 | 第29-31页 |
| 2.3.4.1 利用蔗糖梯度法纯化病毒 | 第29-30页 |
| 2.3.4.2 纯化后病毒的DNA提取 | 第30页 |
| 2.3.4.3 利用全基因扩增法增加鸭胚尿囊液的病毒基因组DNA的含量 | 第30-31页 |
| 2.3.5 鉴定纯化病毒 | 第31页 |
| 2.3.5.1 纯化病毒的电镜观察 | 第31页 |
| 2.3.5.2 鸭胚肝脏的透射电镜超薄切片观察 | 第31页 |
| 2.3.5.3 高通量测法鉴定病毒 | 第31页 |
| 2.3.6 实验动物接种GPV+DuCV鸭胚尿囊液的人工致病实验 | 第31-33页 |
| 2.3.6.1 GPV+DuCV感染健康樱桃谷鸭的临床指标检测 | 第32页 |
| 2.3.6.2 生长情况和体重检测 | 第32页 |
| 2.3.6.3 免疫器官指数检测 | 第32页 |
| 2.3.6.4 大体剖检病变观察 | 第32页 |
| 2.3.6.5 血液学指标 | 第32页 |
| 2.3.6.6 实验组鸭各组织器官组织病理观察 | 第32页 |
| 2.3.6.7 血清生化指标检测 | 第32-33页 |
| 2.3.6.8 提取实验组鸭和对照组鸭的肝脏和舌的DNA | 第33页 |
| 2.3.6.9 针对DuCV和GPV的PCR检测 | 第33页 |
| 2.3.6.10 各组鸭的胆汁的SDS-PAGE的分析 | 第33页 |
| 2.3.7 统计学方法 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-54页 |
| 3.1 送检病鸭大体剖检及组织病理学诊断 | 第33-37页 |
| 3.1.1 临床症状及剖检病变 | 第33-34页 |
| 3.1.2 血液形态学观察 | 第34-35页 |
| 3.1.3 病理组织学诊断 | 第35-37页 |
| 3.1.4 送检病鸭的PCR诊断 | 第37页 |
| 3.2 GPV和DuCV的序列测定与分析 | 第37-39页 |
| 3.2.1 GPV的序列测定与分析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 DuCV的序列测定与分析 | 第38-39页 |
| 3.3 送检病鸭的细菌检测 | 第39-40页 |
| 3.4 自然感染鸭关于GPV与DuCV共感染的流行调查 | 第40页 |
| 3.5 送检鸭的血清生化指标分析 | 第40-41页 |
| 3.6 感染鸭胚的大体剖检病变分析 | 第41-42页 |
| 3.7 感染鸭胚的胚胎的病理组织学分析 | 第42-43页 |
| 3.8 感染鸭胚的PCR检测 | 第43页 |
| 3.9 纯化病毒的电镜观察分析 | 第43-44页 |
| 3.10 感染鸭胚胚体的肝脏的透射电镜观察分析 | 第44-45页 |
| 3.11 纯化病毒的高通量测序 | 第45页 |
| 3.12 感染樱桃谷鸭实验结果 | 第45-54页 |
| 3.12.1 感染樱桃谷鸭的大体剖检病变观察 | 第45-46页 |
| 3.12.2 感染樱桃谷鸭的血涂片观察 | 第46-47页 |
| 3.12.3 感染樱桃谷鸭的病理组织学观察 | 第47-49页 |
| 3.12.4 感染樱桃谷鸭的PCR检测 | 第49页 |
| 3.12.5 感染樱桃谷鸭的血清生化指标检测 | 第49-51页 |
| 3.12.6 感染樱桃谷鸭的免疫器官指数和体重的分析 | 第51-53页 |
| 3.12.7 感染樱桃谷鸭的胆汁的SDS-PAGE试验分析 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
