中文摘要 | 第12-14页 |
ABSTRACT | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-27页 |
1.1 东亚钳蝎氯离子通道毒素治疗神经胶质瘤的研究进展 | 第16-18页 |
1.1.1 神经胶质瘤细胞概述 | 第16-17页 |
1.1.2 东亚钳蝎氯离子通道毒素对神经胶质瘤的作用机制研究进展 | 第17-18页 |
1.2 常见非病毒载体在基因治疗中的研究 | 第18-19页 |
1.2.1 阳性脂质体介导的基因转染 | 第18-19页 |
1.2.2 聚乙烯亚胺作为基因载体的研究进展 | 第19页 |
1.3 氯化锂对肿瘤细胞的作用机制研究 | 第19页 |
1.4 纳米材料介导氯离子通道毒素在治疗神经胶质瘤的应用 | 第19-21页 |
1.5 介孔分子筛MCM-41和SBA-15的研究进展 | 第21-23页 |
1.6 论文设计思路 | 第23-27页 |
1.6.1 研究内容及意义 | 第23-24页 |
1.6.2 实验方案及流程 | 第24-25页 |
1.6.3 研究的创新点 | 第25-27页 |
第二章 脂质体介导的pEGFP-N1-BmK CT对神经胶质瘤细胞迁移的影响和机制分析 | 第27-39页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 实验材料 | 第27-29页 |
2.2.1 细胞和质粒 | 第27页 |
2.2.2 主要试剂 | 第27-28页 |
2.2.3 主要仪器 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-34页 |
2.3.1 重组质粒pEGFP-N1-/BmK CT的构建 | 第29-31页 |
2.3.2 大鼠神经胶质瘤C6细胞的培养 | 第31页 |
2.3.3 重组表达质粒转染C6细胞 | 第31-32页 |
2.3.4 明胶酶谱实验 | 第32页 |
2.3.5 转染pEGFP-N1-BmK CT后MMP-2的Western blot检测 | 第32-33页 |
2.3.6 细胞划痕擦伤实验 | 第33页 |
2.3.7 BmK CT与MMP-2在神经胶质瘤细胞上的共定位实验 | 第33-34页 |
2.4 实验结果 | 第34-37页 |
2.4.1 pEGFP-N1-BmK CT重组质粒构建 | 第34-35页 |
2.4.2 激光共聚焦扫描显微镜检测脂质体介导pEGFP-N1和pEGFP-N1-BmKCT的转染效率 | 第35页 |
2.4.3 转染重组质粒pEGFP-N1-BmK CT后对C6细胞MMP-2分泌水平的影响 | 第35页 |
2.4.4 转染重组质粒pEGFP-N1-BmK CT后对C6细胞迁移的影响 | 第35-37页 |
2.4.5 Bmk CT与MMP-2在神经胶质瘤细胞上的共定位分析 | 第37页 |
2.5 讨论 | 第37-39页 |
第三章 LiCl对转染pEGFP-N1-BmK CT的C6细胞的迁移的影响 | 第39-46页 |
3.1 引言 | 第39页 |
3.2 实验材料 | 第39-40页 |
3.2.1 细胞和质粒 | 第39页 |
3.2.2 主要试剂 | 第39-40页 |
3.2.3 主要仪器 | 第40页 |
3.3 实验方法 | 第40-42页 |
3.3.1 细胞培养 | 第40页 |
3.3.2 质粒pEGFP-N1-BmK CT转染C6细胞 | 第40页 |
3.3.3 LiCl理C6细胞 | 第40页 |
3.3.4 LiCl作用分别转染两种质粒的C6细胞后对细胞增殖活力的影响 | 第40页 |
3.3.5 明胶酶谱实验 | 第40-41页 |
3.3.6 体外划痕擦伤实验 | 第41页 |
3.3.7 LiCl作用分别转染两种质粒的C6细胞后p-catenin的核积累量的分析 | 第41-42页 |
3.4 实验结果 | 第42-44页 |
3.4.1 LiCl作用分别转染两种质粒的C6细胞后对细胞增殖活力的影响 | 第42页 |
3.4.2 明胶酶谱实验检测C6细胞内pro-MMP-2的分泌水平 | 第42-43页 |
3.4.3 体外划痕擦伤实验检测LiCl对C6细胞迁移能力的影响 | 第43页 |
3.4.4 LiCl对分别转染两种质粒的C6细胞中β-catenin在细胞核积累量的影响 | 第43-44页 |
3.5 讨论 | 第44-46页 |
第四章 PEI和纳米材料介导pEGFP-N1-BmK CT的表达对C6细胞迁移的影响 | 第46-55页 |
4.1 前言 | 第46页 |
4.2 实验材料 | 第46页 |
4.2.1 细胞和质粒 | 第46页 |
4.2.2 主要试剂 | 第46页 |
4.2.3 主要仪器 | 第46页 |
4.3 实验方法 | 第46-49页 |
4.3.1 PEI的制备 | 第47页 |
4.3.2 ND-PEI-pEGFP-N1,ND-PEI-pEGFP-N1-BmK CT纳米钻石颗粒的制备 | 第47页 |
4.3.3 MCM-41-APTES-pEGFP-N1,MCM-41-APTES-pEGFP-N1-BmK CT,SBA-15-APTES-·pEGFP-N1,SBA-15-APTES-pEGFP-N1-BmK CT的合成 | 第47-48页 |
4.3.4 明胶酶谱实验 | 第48页 |
4.3.5 细胞划痕擦伤实验 | 第48-49页 |
4.3.6 纳米材料与pEGFP-N1结合效率分析 | 第49页 |
4.3.7 动态光散射观察ND-PEI,MCM-41,SBA-15,SiO_2-PEI四种纳米材料的粒径分散 | 第49页 |
4.4 实验结果 | 第49-54页 |
4.4.1 激光共聚焦扫描显微镜检测PEI介导pEGFP-N1和pEGFP-N1-BmK CT的转染效率 | 第49-50页 |
4.4.2 PEI介导转染重组质粒pEGFP-N1-BmK CT后对C6细胞中pro-MMP- | 第50页 |
4.4.3 PEI介导转染重组质粒pEGFP-N1-BmK CT后对C6细胞迁移的影响 | 第50页 |
4.4.4 激光共聚焦扫描显微镜检测ND-PEI介导pEGFP-N1和pEGFP-N1-BmKCT的转染效率 | 第50页 |
4.4.5 纳米材料与pEGFP-N1结合效率分析 | 第50-52页 |
4.4.6 纳米材料的粒径分散分析 | 第52-54页 |
4.5 讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
总结与展望 | 第60-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
个人简况及联系方式 | 第64-65页 |
承诺书 | 第65-66页 |