| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 涡虫研究概况 | 第15-24页 |
| 2 WD-重复蛋白的研究进展 | 第24-29页 |
| 3 STAG蛋白的研究进展 | 第29-30页 |
| 4 研究意义和主要内容 | 第30-33页 |
| 第二章 东亚三角涡虫DjPreb基因的特征、表达和进化分析 | 第33-73页 |
| 1 前言 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-55页 |
| ·试验材料 | 第33-36页 |
| ·实验方法 | 第36-55页 |
| ·DjPreb与pcDNA3载体的连接 | 第36-40页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第40页 |
| ·东亚三角涡虫DjPreb基因组DNA的PCR扩增和测序 | 第40-43页 |
| ·Northern杂交 | 第43-49页 |
| ·涡虫Djpreb基因的胚胎和幼虫整体原位杂交 | 第49-51页 |
| ·再生涡虫中DjPreb基因的整体原位杂交 | 第51页 |
| ·相对定量检测再生不同时期涡虫DjPreb基因表达 | 第51-55页 |
| 3 结果 | 第55-72页 |
| ·DjPreb与pcDNA3载体的连接 | 第55-56页 |
| ·东亚三角涡虫DjPreb基因的序列分析 | 第56-59页 |
| ·东亚三角涡虫DjPreb基因的进化树分析 | 第59-61页 |
| ·东亚三角涡虫DjPreb基因组DNA的克隆和结构分析 | 第61-62页 |
| ·涡虫Djpreb基因Northern杂交 | 第62-65页 |
| ·整体原位杂交检测Djpreb基因在涡虫胚胎不同发育时期的时空表达 | 第65-68页 |
| ·整体原位杂交检测DjPreb基因在涡虫不同再生阶段的时空表达 | 第68-69页 |
| ·相对定量检测DjPreb基因在涡虫不同再生阶段的表达 | 第69-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 第三章 东亚三角涡虫DjStag基因的特征、表达和进化分析 | 第73-96页 |
| 1 前言 | 第73页 |
| 2 材料与方法 | 第73-78页 |
| ·试验材料 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-78页 |
| ·DjStag与pcDNA3载体的连接 | 第74-75页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第75页 |
| ·Northern杂交 | 第75-76页 |
| ·涡虫DjStag基因的胚胎和幼虫整体原位杂交 | 第76页 |
| ·再生涡虫中DjStag基因的整体原位杂交 | 第76页 |
| ·相对定量检测再生不同时期涡虫DjStag基因表达 | 第76-78页 |
| 3 结果 | 第78-94页 |
| ·DjStag与pcDNA3载体的连接 | 第78-79页 |
| ·东亚三角涡虫DjStag基因的序列分析 | 第79-82页 |
| ·东亚三角涡虫DjStag基因的进化树分析 | 第82-84页 |
| ·涡虫DjStag基因Northern杂交 | 第84-86页 |
| ·整体原位杂交检测DjStag基因在涡虫不同发育时期的时空表达 | 第86-88页 |
| ·整体原位杂交检测DjStag基因在涡虫不同再生阶段的时空表达 | 第88-92页 |
| ·相对定量检测DjStag基因在涡虫不同再生阶段的表达 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-96页 |
| 第四章 东亚三角涡虫DjPreb和DjStag基因的干扰 | 第96-115页 |
| 1 前言 | 第96页 |
| 2 材料和方法 | 第96-102页 |
| ·试验材料 | 第96-97页 |
| ·实验方法 | 第97-102页 |
| ·干扰载体的构建 | 第97-99页 |
| ·大肠杆菌HT115感受态细胞的制备 | 第99-100页 |
| ·连接产物向大肠杆菌HT115的转化 | 第100页 |
| ·挑阳性克隆PCR检测 | 第100页 |
| ·提取质粒双酶切检测 | 第100-101页 |
| ·重组质粒L4440-DjStag和L4440-DjPreb的序列测定 | 第101页 |
| ·dsRNA的诱导表达 | 第101页 |
| ·含dSRNA的菌喂食涡虫 | 第101-102页 |
| ·Real-time PCR检测干扰后涡虫DjPreb和DjStag基因表达 | 第102页 |
| 3 结果 | 第102-113页 |
| ·DjPreb克隆载体和L4440表达载体质粒的提取 | 第102-103页 |
| ·DjPreb基因的PCR扩增 | 第103-104页 |
| ·L4440-DjPreb表达载体的构建 | 第104-105页 |
| ·DjPreb基因RNAi后再生涡虫的表型 | 第105-108页 |
| ·Real-time PCR检测干扰后DjPreb基因的表达 | 第108-109页 |
| ·DjStag克隆载体和L4440表达载体质粒的提取 | 第109页 |
| ·DjStag基因的PCR扩增 | 第109-110页 |
| ·L4440-DjStag表达载体的构建 | 第110-111页 |
| ·DjStag基因RNAi后再生涡虫的表型 | 第111-112页 |
| ·Real-time PCR检测干扰后DjStag基因的表达 | 第112-113页 |
| 4 讨论 | 第113-115页 |
| 结论 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-128页 |
| 附录 | 第128-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 个人简历 | 第132页 |
| 已发表和待发表的学术论文 | 第132页 |
