摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
引言 | 第11-13页 |
第一部分 氧环境对大肠杆菌SM10接合反应的影响 | 第13-25页 |
1.1 材料 | 第13-14页 |
1.1.1 菌株和质粒 | 第13页 |
1.1.2 培养基和试剂 | 第13页 |
1.1.3 主要仪器 | 第13-14页 |
1.1.4 溶液配制 | 第14页 |
1.2 方法 | 第14-19页 |
1.2.1 体外接合实验 | 第14-16页 |
1.2.2 qPCR内参基因的确定 | 第16-17页 |
1.2.3 荧光定量PCR(qPCR) | 第17-19页 |
1.2.4 统计学分析 | 第19页 |
1.3 结果 | 第19-23页 |
1.3.1 体外接合实验 | 第19-21页 |
1.3.2 qPCR内参基因的确定 | 第21-23页 |
1.3.3 qPCR检测接合相关基因 | 第23页 |
1.4 讨论 | 第23-25页 |
第二部分 Fnr调控接合反应的机制研究 | 第25-42页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第25页 |
2.1.2 培养基和试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 主要仪器 | 第26页 |
2.1.4 溶液配制 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-34页 |
2.2.1 大肠杆菌SM10 fnr基因的缺失突变 | 第27-29页 |
2.2.2 fnr基因突变对大肠杆菌SM10接合频率的影响 | 第29页 |
2.2.3 fnr基因突变对接合基因表达的影响 | 第29-32页 |
2.2.4 FNR蛋白识别位点分析 | 第32-33页 |
2.2.5 FNR蛋白的表达纯化和琼脂糖凝胶迁移实验 | 第33-34页 |
2.2.6 统计学分析 | 第34页 |
2.3 结果 | 第34-40页 |
2.3.1 大肠杆菌SM10 fnr基因的缺失突变 | 第34-36页 |
2.3.2 fnr基因突变对大肠杆菌SM10接合频率的影响 | 第36-38页 |
2.3.3 fnr基因突变对接合基因表达的影响 | 第38-39页 |
2.3.4 FNR蛋白的表达纯化和琼脂糖凝胶迁移实验 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-42页 |
结语 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
附录 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |