| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 铅 | 第12-14页 |
| 1.1.1 铅的概述 | 第12页 |
| 1.1.2 铅的神经毒性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 铅神经毒性的机制 | 第13-14页 |
| 1.2 人参皂苷 | 第14-16页 |
| 1.2.1 人参皂苷的来源及成分 | 第14-15页 |
| 1.2.2 人参皂苷的药理作用 | 第15页 |
| 1.2.3 人参皂苷Rb1对神经系统的影响 | 第15-16页 |
| 1.3 ROCK通路在神经系统中的作用 | 第16-17页 |
| 1.4 低氧诱导因子-1 及其抑制剂 | 第17-20页 |
| 1.4.1 低氧诱导因子-1 的构造和生物学功能 | 第17-19页 |
| 1.4.2 HIF-1α的抑制剂 2-甲氧基雌二醇 | 第19-20页 |
| 1.5 科学问题与假设 | 第20-21页 |
| 1.5.1 科学问题 | 第20页 |
| 1.5.2 提出假设 | 第20-21页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第21页 |
| 1.6.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 1.7 研究思路与技术路线 | 第22-23页 |
| 1.7.1 研究思路 | 第22页 |
| 1.7.2 实验技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 HIF-1α介导的ROCK信号通路在醋酸铅诱导PC12细胞损伤中的作用 | 第23-52页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 实验仪器及设备 | 第25页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 细胞培养及药物处理 | 第26-27页 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞活力 | 第27页 |
| 2.2.3 LDH法检测细胞毒性 | 第27-29页 |
| 2.2.4 细胞内氧自由基含量检测 | 第29-31页 |
| 2.2.5 细胞内ATP含量的检测 | 第31页 |
| 2.2.6 DCFH-DA探针法检测细胞内ROS水平 | 第31-32页 |
| 2.2.7 细胞形态学观察 | 第32页 |
| 2.2.8 细胞凋亡检测 | 第32-33页 |
| 2.2.9 细胞内HIF-1α，ROCK-2 的表达定位检测 | 第33页 |
| 2.2.10 细胞内HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白的表达检测 | 第33-35页 |
| 2.2.10.1 蛋白质提取方法 | 第33页 |
| 2.2.10.2 蛋白质定量方法 | 第33页 |
| 2.2.10.3 Western Blot方法 | 第33-35页 |
| 2.2.10.4 操作步骤 | 第35页 |
| 2.2.11 细胞转染的方法 | 第35-36页 |
| 2.2.12 数据统计 | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-48页 |
| 2.3.1 不同浓度Pb(Ac)2处理PC12细胞 24h后细胞存活率的作用 | 第36-37页 |
| 2.3.2 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞LDH漏出率的作用 | 第37-38页 |
| 2.3.3 不同浓度Pb(Ac)2损伤后PC12细胞内SOD和MDA水平变化 | 第38页 |
| 2.3.4 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞内ATP含量的作用 | 第38-39页 |
| 2.3.5 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞内ROS水平的作用 | 第39-40页 |
| 2.3.6 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞的形态影响 | 第40-41页 |
| 2.3.7 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.8 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞HIF-1α和ROCK-2 表达定位的影响 | 第42-44页 |
| 2.3.9 不同浓度Pb(Ac)2对PC12细胞HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、CytoC、Caspase-9、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的作用 | 第44-46页 |
| 2.3.10 HIF-1α siRNA干扰对HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2 蛋白表达的作用 | 第46-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-52页 |
| 第三章 人参皂苷Rb1和 2-甲氧基雌二醇在醋酸铅损伤PC12细胞中的作用 | 第52-70页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第52-53页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第52-53页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第53页 |
| 3.1.3 实验仪器及设备 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 细胞培养及实验分组 | 第53页 |
| 3.2.2 MTT法检测细胞活力 | 第53-54页 |
| 3.2.3 LDH法检测细胞毒性 | 第54页 |
| 3.2.4 细胞内氧自由基含量检测 | 第54页 |
| 3.2.5 细胞内ATP含量的检测 | 第54页 |
| 3.2.6 DCFH-DA探针法检测细胞内ROS水平 | 第54页 |
| 3.2.7 细胞形态学观察 | 第54页 |
| 3.2.8 细胞凋亡检测 | 第54页 |
| 3.2.9 细胞内HIF-1α，ROCK-2 的表达定位检测 | 第54页 |
| 3.2.10 细胞内HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白的表达检测 | 第54-55页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-66页 |
| 3.3.1 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞活力的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.2 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞LDH的影响 | 第56页 |
| 3.3.3 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞SOD和MDA的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.4 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞内ATP含量的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.5 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞内ROS水平的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.6 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞形态学的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.7 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞凋亡的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.8 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组PC12细胞内HIF-1α和ROCK-2 核转位的影响 | 第61-63页 |
| 3.3.9 Gs-Rb1和 2ME2对损伤模型组细胞HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的作用 | 第63-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-70页 |
| 第四章 总结与展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读硕士期间取得的学术成果 | 第81页 |
