| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 对虾白斑综合症病毒（WSSV） | 第13-15页 |
| 1.1.1 对虾白斑综合症的危害 | 第13页 |
| 1.1.2 白斑综合症的防治 | 第13-14页 |
| 1.1.3 vp28基因极其表达产物 | 第14-15页 |
| 1.2 蓝藻转基因 | 第15-19页 |
| 1.2.1 蓝藻基因工程概况 | 第15页 |
| 1.2.2 集胞藻6803简介 | 第15页 |
| 1.2.3 蓝藻的三亲结合以及自然转化 | 第15-19页 |
| 1.3 转基因藻的纯化 | 第19-22页 |
| 1.3.1 藻类纯化的现状 | 第20页 |
| 1.3.2 转基因藻纯化的意义 | 第20-21页 |
| 1.3.3 纯化工作的进展 | 第21-22页 |
| 2.转基因集胞藻6803的构建 | 第22-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1.1 藻种、菌株及质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 蓝藻的培养 | 第24-26页 |
| 2.1.5 大肠杆菌的培养 | 第26页 |
| 2.1.6 vp28基因片段的克隆 | 第26-27页 |
| 2.1.7 大肠杆菌TOP10的转化与筛选 | 第27-28页 |
| 2.1.8 克隆载体的鉴定 | 第28页 |
| 2.1.9 大肠杆菌质粒的制备 | 第28-29页 |
| 2.1.10 酶切体系的建立 | 第29页 |
| 2.1.11 酶切片段的纯化和回收 | 第29-30页 |
| 2.1.12 连接反应体系的建立 | 第30-31页 |
| 2.1.13 集胞藻6803的转化 | 第31-32页 |
| 2.1.14 自然转化 | 第32页 |
| 2.1.15 转基因藻的筛选与纯化 | 第32页 |
| 2.1.16 vp28基因的PCR反应 | 第32-33页 |
| 2.1.17 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| 2.2 实验结果 | 第33-36页 |
| 2.2.1 基因检测 | 第33-34页 |
| 2.2.2 酶切鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.3 Western Blot蛋白印迹检测 | 第35-36页 |
| 2.2.4 转化效率对比 | 第36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-37页 |
| 2.4 结论 | 第37-38页 |
| 3.转基因集胞藻6803的生理生化活性检测 | 第38-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 3.1.1 集胞藻6803细胞生长曲线的测定 | 第38页 |
| 3.1.2 蓝藻叶绿素的提取和测定 | 第38页 |
| 3.1.3 蓝藻放氧光合活性的的测定 | 第38-41页 |
| 3.1.4 RT-qPCR检测vp28基因表达率 | 第41页 |
| 3.2 实验结果 | 第41-46页 |
| 3.2.1 光强对转vp28基因集胞藻光合作用的影响，以及最适光强的探究 | 第41-42页 |
| 3.2.2 温度对转vp28基因集胞藻光合作用的影响，以及最适温度探究 | 第42-43页 |
| 3.2.3 盐度对转vp28基因集胞藻光合作用的影响，以及最适盐度的探究 | 第43-44页 |
| 3.2.4 pH对转vp28基因集胞藻光合作用的影响，以及最适pH的探究 | 第44-45页 |
| 3.2.5 生长曲线的测定 | 第45页 |
| 3.2.6 不同生长时间vp28基因表达效率 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4 结论 | 第47-48页 |
| 4.转基因藻的纯化 | 第48-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-50页 |
| 4.1.1 藻种 | 第49页 |
| 4.1.2 培养基 | 第49页 |
| 4.1.3 培养方法 | 第49页 |
| 4.1.4 抗生素筛选 | 第49页 |
| 4.1.5 平板划线分离法 | 第49-50页 |
| 4.1.6 蓝藻提取质粒 | 第50页 |
| 4.1.7 常规PCR检测方法 | 第50页 |
| 4.1.8 RT-qPCR检测目的基因表达的方法 | 第50页 |
| 4.1.9 Western Blot检测目的蛋白的方法 | 第50页 |
| 4.1.10 藻种保存方法 | 第50页 |
| 4.1.11 主要仪器 | 第50页 |
| 4.2.结果 | 第50-59页 |
| 4.2.1 培养液筛选 | 第50-52页 |
| 4.2.2 平板上划线和抗生素筛选 | 第52-53页 |
| 4.2.3 植板率的变化 | 第53-56页 |
| 4.2.4 提取总DNA或质粒进行常规PCR检测： | 第56-57页 |
| 4.2.5 RT-qPCR检测 | 第57-58页 |
| 4.2.6 Western Blot检测 | 第58-59页 |
| 4.3.讨论 | 第59-62页 |
| 4.3.1 分离纯化方法的讨论 | 第59-62页 |
| 4.3.2 对生产的意义 | 第62页 |
| 4.4 总结 | 第62-63页 |
| 总结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
