| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 绵羊肺炎支原体的形态结构与培养特性 | 第11-12页 |
| 1.2 绵羊肺炎支原体的流行病学 | 第12-13页 |
| 1.3 绵羊肺炎支原体的免疫学 | 第13-14页 |
| 1.4 羊支原体疫苗研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5 展望 | 第16页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第16-19页 |
| 第2章 绵羊肺炎支原体的分离与鉴定 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 病料来源 | 第19页 |
| 2.1.2 实验所用试剂及配置方法 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 支原体的分离培养 | 第21页 |
| 2.2.2 支原体形态观察 | 第21-22页 |
| 2.2.3 生化试验 | 第22页 |
| 2.2.4 药敏试验 | 第22页 |
| 2.2.5 支原体试剂盒检测 | 第22-23页 |
| 2.2.6 16SrRNA基因序列的扩增和测序 | 第23-24页 |
| 2.2.7 基因序列的比对分析和进化树的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.8 绵羊肺炎支原体原始种子批的建立 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-31页 |
| 2.3.1 病例描述 | 第25-26页 |
| 2.3.2 支原体的分离结果 | 第26-27页 |
| 2.3.3 支原体形态观察 | 第27-28页 |
| 2.3.4 支原体生物化学试验 | 第28页 |
| 2.3.5 支原体药敏试验 | 第28页 |
| 2.3.6 支原体试剂盒检测 | 第28页 |
| 2.3.7 绵羊肺炎支原体的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.8 16SrRNA基因序列的分析 | 第29-30页 |
| 2.3.9 系统发育树的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.10 绵羊肺炎支原体原始种子批的建立 | 第31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 绵羊肺炎支原体HSP70、P30基因的克隆及序列分析 | 第33-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第33页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第33-34页 |
| 3.1.3 实验所需溶液配制 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 绵羊肺炎支原体的复苏与培养 | 第35页 |
| 3.2.2 支原体基因组的提取 | 第35页 |
| 3.2.3 目的基因的引物设计及合成 | 第35-36页 |
| 3.2.4 HSP70、P30基因的PCR扩增 | 第36页 |
| 3.2.5 PCR产物的检测 | 第36页 |
| 3.2.6 PCR产物的纯化 | 第36页 |
| 3.2.7 PCR产物的回收 | 第36-37页 |
| 3.2.8 HSP70、P30基因的克隆 | 第37页 |
| 3.2.9 阳性克隆的筛选 | 第37页 |
| 3.2.10 克隆质粒的提取 | 第37-38页 |
| 3.2.11 克隆基因的双酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.12 基因序列的比对分析和进化树的构建 | 第39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-46页 |
| 3.3.1 支原体复苏培养 | 第39-40页 |
| 3.3.2 HSP70、P30片段的PCR扩增 | 第40-41页 |
| 3.3.3 HSP70、P30阳性克隆的筛选 | 第41-42页 |
| 3.3.4 连接载体的双酶切鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3.5 连接载体的序列测定分析 | 第43-44页 |
| 3.3.6 HSP70、P30基因序列分析 | 第44-45页 |
| 3.3.7 系统发育树的构建 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第4章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58页 |