| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 阿魏酸 | 第7-8页 |
| 1.1.1 阿魏酸的简介 | 第7页 |
| 1.1.2 阿魏酸的功能和应用 | 第7页 |
| 1.1.3 阿魏酸的获取方式 | 第7-8页 |
| 1.2 阿魏酸酯酶 | 第8-12页 |
| 1.2.1 阿魏酸酯酶的简介 | 第8页 |
| 1.2.2 阿魏酸酯酶的来源 | 第8页 |
| 1.2.3 阿魏酸酯酶的催化机理 | 第8-9页 |
| 1.2.4 阿魏酸酯酶的分类 | 第9-10页 |
| 1.2.5 阿魏酸酯酶的应用 | 第10-11页 |
| 1.2.6 阿魏酸酯酶的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 论文的立题依据和意义 | 第12页 |
| 1.4 论文的研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-22页 |
| 2.1 菌株与载体 | 第14页 |
| 2.2 主要仪器与试剂 | 第14-15页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.2.2 主要试剂和工具酶 | 第15页 |
| 2.3 培养基 | 第15-16页 |
| 2.4 实验方法 | 第16-22页 |
| 2.4.1 菌种的筛选及阿魏酸酯酶活性的确定 | 第16页 |
| 2.4.2 阿魏酸酯酶活力的测定及液相色谱条件 | 第16页 |
| 2.4.3 细菌基因组的提取 | 第16-17页 |
| 2.4.4 大肠杆菌感受态的制备 | 第17页 |
| 2.4.5 目的基因的克隆与重组菌的构建 | 第17-19页 |
| 2.4.6 重组大肠杆菌的诱导表达 | 第19页 |
| 2.4.7 蛋白电泳 | 第19页 |
| 2.4.8 蛋白质含量测定 | 第19页 |
| 2.4.9 重组蛋白的分离纯化 | 第19页 |
| 2.4.10 重组蛋白酶学性质的研究 | 第19-20页 |
| 2.4.11 重组酶底物作用范围的测定 | 第20页 |
| 2.4.12 重组酶水解麸皮的初步研究 | 第20-21页 |
| 2.4.13 反应动力学常数的测定 | 第21-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-41页 |
| 3.1 菌种的筛选及阿魏酸酯酶活性的确定 | 第22-24页 |
| 3.1.1 菌种筛选 | 第22页 |
| 3.1.2 B.amyloliquefaciens H47产阿魏酸酯酶活性的确定 | 第22-24页 |
| 3.2 阿魏酸酯酶的预测及克隆表达验证 | 第24-32页 |
| 3.2.1 阿魏酸酯酶基因的预测 | 第24-26页 |
| 3.2.2 阿魏酸酯酶预测基因的克隆 | 第26-27页 |
| 3.2.3 重组菌的表达验证 | 第27-29页 |
| 3.2.4 阿魏酸酯酶的序列分析 | 第29-32页 |
| 3.3 阿魏酸酯酶的分离纯化及酶学特性的研究 | 第32-41页 |
| 3.3.1 重组蛋白的分离纯化 | 第32-33页 |
| 3.3.2 重组蛋白的最适反应条件 | 第33-34页 |
| 3.3.3 重组蛋白的pH和温度稳定性 | 第34-35页 |
| 3.3.4 重组蛋白的底物范围及水解DSWB的初步研究 | 第35-38页 |
| 3.3.5 金属离子、EDTA·2Na和PMSF对阿魏酸酯酶活性的影响 | 第38页 |
| 3.3.6 阿魏酸酯酶的动力学分析 | 第38-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-42页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录1：作者在攻读硕士学位期间的论文成果 | 第47-48页 |
| 附录2：基因序列 | 第48-51页 |
