摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
一、牛病毒性腹泻病毒概述 | 第11-14页 |
1、牛病毒性腹泻病毒的分类 | 第11页 |
2、牛病毒性腹泻病毒的流行现状 | 第11-12页 |
3、牛病毒性腹泻病毒的致病机理 | 第12-13页 |
3.1 持续感染与免疫耐受 | 第12页 |
3.2 黏膜病(Mucosal disease,MD) | 第12-13页 |
3.3 繁殖障碍 | 第13页 |
3.4 血小板减少症与出血综合征 | 第13页 |
4、抗病毒免疫 | 第13-14页 |
4.1 体液免疫 | 第13-14页 |
4.2 细胞免疫 | 第14页 |
二、Ⅰ型牛疱疹病毒概述 | 第14-16页 |
1、牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)流行病学 | 第14-15页 |
2、牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)的危害 | 第15-16页 |
2.1 呼吸道感染型 | 第15页 |
2.2 生殖道感染型 | 第15-16页 |
2.3 结膜炎型 | 第16页 |
2.4 脑膜炎型 | 第16页 |
2.5 流产型 | 第16页 |
三、BVDV和BHV-1疫苗的概述 | 第16-21页 |
1、疫苗种类 | 第16页 |
2、牛病毒性腹泻病毒疫苗研究进展 | 第16-18页 |
2.1 疫苗在BVDV防控中的应用 | 第16-17页 |
2.2 国外BVDV疫苗的研究进展 | 第17页 |
2.3 国内BVDV疫苗研究进展 | 第17-18页 |
3、 牛疱疹病毒Ⅰ型疫苗研究进展 | 第18-21页 |
3.1 BHV-1的弱毒苗 | 第18页 |
3.2 BHV-1灭活苗 | 第18页 |
3.3 BHV-1亚单位疫苗 | 第18-19页 |
3.4 基因工程活载体疫苗 | 第19页 |
3.5 DNA疫苗 | 第19-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第二章 表达BVDV E2基因重组BHV-1病毒的鉴定 | 第25-37页 |
1. 材料与方法 | 第26-31页 |
1.1 细胞、毒株和单克隆抗体(MAb) | 第26页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第26页 |
1.3 主要溶液配制 | 第26-27页 |
1.4 重组病毒疫苗候选株的扩大培养 | 第27页 |
1.5 提取病毒总RNA | 第27-28页 |
1.6 cDNA的合成 | 第28页 |
1.7 重组病毒疫苗候选株的PCR鉴定 | 第28-29页 |
1.8 应用Western blot方法检测重组病毒疫苗候选株E2蛋白的表达 | 第29-30页 |
1.9 应用间接免疫荧光实验(IFA)方法检测重组病毒E2蛋白的的表达 | 第30页 |
1.10 病毒毒价的测定 | 第30-31页 |
2 实验结果 | 第31-36页 |
2.1 重组病毒疫苗候选株PCR鉴定结果 | 第31页 |
2.2 重组病毒疫苗候选株Western blot检测结果 | 第31-32页 |
2.3 重组病毒疫苗候选株免疫荧光检测结果 | 第32-34页 |
2.4 重组病毒疫苗候选株毒价(TCID_(50))测定结果 | 第34页 |
2.5 讨论 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-37页 |
第三章 表达BVDV E2基因的重组BHV-1病毒的免疫效力评价 | 第37-64页 |
1 实验材料 | 第39-40页 |
1.1 细胞与毒株 | 第39页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-46页 |
2.1 实验用牛筛选和抗原抗体检测 | 第40-42页 |
2.2 实验牛免疫程序的制定 | 第42-43页 |
2.3 实验牛临床症状的监测 | 第43页 |
2.4 实验牛的生理指标检测 | 第43页 |
2.5 实验牛排毒情况监测 | 第43-44页 |
2.6 实验牛血清中抗体的检测 | 第44-45页 |
2.7 攻毒保护试验 | 第45-46页 |
3、实验结果 | 第46-60页 |
3.1 实验牛BVDV,BHW1抗原检测 | 第46-47页 |
3.2 免疫前实验牛BVDV抗体的Elisa检测 | 第47-48页 |
3.3 免疫前实验牛BH-1抗体的Elisa检测 | 第48-49页 |
3.4 实验牛临床症状的检测 | 第49-51页 |
3.5 实验牛生理指标检测 | 第51-53页 |
3.6 实验牛排毒情况监测 | 第53页 |
3.7 实验牛血清中抗体效价检测结果 | 第53-57页 |
3.8 攻毒保护实验结果 | 第57-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
第四章 全文总结 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |