| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 Abbreviations | 第9-11页 |
| 第一章 狂犬病和利用CRISPR-Cas9技术基因治疗的研究进展 | 第11-26页 |
| 1 狂犬病概述 | 第12-14页 |
| 1.1 狂犬病流行病学 | 第12页 |
| 1.2 狂犬病的临床特征 | 第12-14页 |
| 2 狂犬病病毒病原特征 | 第14-20页 |
| 2.1 狂犬病病毒的分类 | 第14页 |
| 2.2 狂犬病病毒的形态与结构 | 第14-15页 |
| 2.3 狂犬病病毒的基因组结构 | 第15-17页 |
| 2.4 狂犬病病毒各结构蛋白的功能 | 第17-20页 |
| 3 狂犬病病毒的感染和复制过程 | 第20-21页 |
| 3.1 狂犬病病毒的感染过程 | 第20页 |
| 3.2 病毒的复制过程 | 第20-21页 |
| 4 狂犬病的防预和治疗 | 第21-22页 |
| 4.1 狂犬病的防预 | 第21-22页 |
| 4.2 狂犬病的治疗 | 第22页 |
| 5 CRISPR-Cas9在基因编辑中的研究概述 | 第22-26页 |
| 5.1 CRISPR-Cas系统概述 | 第22-23页 |
| 5.2 CRISPR-Cas系统基本工作原理与特点 | 第23-24页 |
| 5.3 CRISPR-Cas9技术在RNA编辑中的应用 | 第24-25页 |
| 5.4 CRISPR-Cas9在基因治疗中的应用与展望 | 第25-26页 |
| 第二章 利用CRISPR-Cas9系统抑制狂犬病病毒复制的研究 | 第26-60页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-41页 |
| 1.1 试验仪器与材料 | 第27-29页 |
| 1.2 试验方法 | 第29-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-57页 |
| 2.1 病料的采集与鉴定 | 第41-43页 |
| 2.1.1 病羊脑组织采取 | 第41页 |
| 2.1.2 PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 2.1.3 直接免疫荧光鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2 PX459-gRNA重组质粒构建 | 第43-46页 |
| 2.2.1 g RNA的设计 | 第43-44页 |
| 2.2.2 线性化PX459表达质粒制备 | 第44-45页 |
| 2.2.3 gRNA的连接与质粒鉴定 | 第45-46页 |
| 2.3 流式细胞术筛选高效率g RNA | 第46-47页 |
| 2.4 细胞活力检测 | 第47-48页 |
| 2.5 gRNA活性检测 | 第48-50页 |
| 2.5.1 T7EN1检测gRNA活性 | 第48-49页 |
| 2.5.2 免疫荧光检测gRNA活性 | 第49-50页 |
| 2.6 测序验证CRISPR-Cas9抑制细胞内RABV的复制 | 第50-52页 |
| 2.7 细胞免疫反应检测 | 第52-53页 |
| 2.8 病毒滴度检测验证CRISPR-Cas9对狂犬病病毒的抑制 | 第53-54页 |
| 2.9 狂犬病病毒vRNA、cRNA、mRNA含量变化检测 | 第54-55页 |
| 2.10 CRISPR-Cas9对各基因型RABV的抑制效果 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 3.1 gRNA的筛选 | 第57-58页 |
| 3.2 PX459-G223gRNA介导的CRISPR-Cas9系统对RABV抑制效果的评价 | 第58-59页 |
| 4 结论与展望 | 第59-60页 |
| 结论 | 第59页 |
| 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
