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高温胁迫下水稻热激蛋白的作用机理研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 引言第9-19页
   ·国内外研究现状第10-13页
     ·植物HSP 家族的研究概况第10-12页
     ·水稻HSP 的研究进展第12-13页
   ·蛋白质互作技术研究进展第13-17页
     ·免疫共沉淀第14页
     ·蛋白质亲和层析第14页
     ·沉降分析第14页
     ·Far-Westerm blotting第14-16页
     ·酵母双杂交系统第16页
     ·蛋白质芯片第16-17页
     ·绿色荧光蛋白邻近成像法第17页
     ·Blue Native-PAGE 和Native-PAGE第17页
   ·本课题的研究思路第17-19页
2 材料与方法第19-29页
   ·试验材料第19页
   ·试验设计第19页
   ·蛋白质组学研究方法第19-23页
     ·差异蛋白质:利用常规的双向电泳的方法进行(2-DE)第19-21页
     ·蛋白质的互作:利用非变性双向电泳技术(2-D Native/SDS-PAGE,(N-PAGE))第21页
     ·蛋白质表达图谱的建立及差异点的确定第21-22页
       ·差异蛋白质表达图谱的建立及差异点的确定第21-22页
       ·互作蛋白质表达图谱的建立及互作变化蛋白点的确定第22页
     ·蛋白质点胶内酶解及肽段提取第22页
     ·MALDI-TOF/MS,MALDI-TOF/TOF/MS 和 LC MS/MS第22-23页
   ·RT-PCR第23-25页
   ·酵母双杂验证蛋白互作第25-27页
   ·原核表达 HSP16.9A 及其His-Pull down第27-28页
   ·Western Blotting第28页
   ·水稻叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性测定第28-29页
3 结果第29-45页
   ·高温胁迫下,不同水稻品种苗期叶片的差异表达蛋白质第29-30页
   ·高温胁迫下,不同水稻品种sHSP 的上调表达第30-33页
   ·高温胁迫下,日本晴开花期sHSP 的表达分析第33-34页
   ·高温胁迫下,日本晴根系sHSP 的上调表达第34-36页
   ·高温胁迫下,水稻叶片的蛋白互作变化第36-40页
     ·高温胁迫下,叶片蛋白互作变化图谱构建第36-39页
     ·高温胁迫下,叶片蛋白质互作变化结果第39-40页
   ·酵母双杂结果第40-41页
   ·氨酰胺合成酶(GS)活性测定第41-42页
   ·His-Pull-down第42-45页
4 讨论第45-48页
   ·高温胁迫下不同水稻品种的蛋白质差异表达第45页
   ·高温胁迫下不同水稻品种若干sHSP 的差异表达第45-46页
   ·高温胁迫下水稻体内sHSP 间的互作第46-47页
   ·高温胁迫下热激蛋白与其他蛋白质间的互作第47-48页
5 小结第48-49页
参考文献第49-53页
附录一 本研究所使用的酵母双杂交载体及表达载体第53-54页
附录二 高温处理下不同水稻品种叶片差异蛋白的质谱分析结果第54-55页
附录三 高温处理下日本晴根系差异蛋白的质谱分析结果第55页
附录四 攻硕期间发表的论文第55-56页
致谢第56页

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