中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-19页 |
·国内外研究现状 | 第10-13页 |
·植物HSP 家族的研究概况 | 第10-12页 |
·水稻HSP 的研究进展 | 第12-13页 |
·蛋白质互作技术研究进展 | 第13-17页 |
·免疫共沉淀 | 第14页 |
·蛋白质亲和层析 | 第14页 |
·沉降分析 | 第14页 |
·Far-Westerm blotting | 第14-16页 |
·酵母双杂交系统 | 第16页 |
·蛋白质芯片 | 第16-17页 |
·绿色荧光蛋白邻近成像法 | 第17页 |
·Blue Native-PAGE 和Native-PAGE | 第17页 |
·本课题的研究思路 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-29页 |
·试验材料 | 第19页 |
·试验设计 | 第19页 |
·蛋白质组学研究方法 | 第19-23页 |
·差异蛋白质:利用常规的双向电泳的方法进行(2-DE) | 第19-21页 |
·蛋白质的互作:利用非变性双向电泳技术(2-D Native/SDS-PAGE,(N-PAGE)) | 第21页 |
·蛋白质表达图谱的建立及差异点的确定 | 第21-22页 |
·差异蛋白质表达图谱的建立及差异点的确定 | 第21-22页 |
·互作蛋白质表达图谱的建立及互作变化蛋白点的确定 | 第22页 |
·蛋白质点胶内酶解及肽段提取 | 第22页 |
·MALDI-TOF/MS,MALDI-TOF/TOF/MS 和 LC MS/MS | 第22-23页 |
·RT-PCR | 第23-25页 |
·酵母双杂验证蛋白互作 | 第25-27页 |
·原核表达 HSP16.9A 及其His-Pull down | 第27-28页 |
·Western Blotting | 第28页 |
·水稻叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性测定 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-45页 |
·高温胁迫下,不同水稻品种苗期叶片的差异表达蛋白质 | 第29-30页 |
·高温胁迫下,不同水稻品种sHSP 的上调表达 | 第30-33页 |
·高温胁迫下,日本晴开花期sHSP 的表达分析 | 第33-34页 |
·高温胁迫下,日本晴根系sHSP 的上调表达 | 第34-36页 |
·高温胁迫下,水稻叶片的蛋白互作变化 | 第36-40页 |
·高温胁迫下,叶片蛋白互作变化图谱构建 | 第36-39页 |
·高温胁迫下,叶片蛋白质互作变化结果 | 第39-40页 |
·酵母双杂结果 | 第40-41页 |
·氨酰胺合成酶(GS)活性测定 | 第41-42页 |
·His-Pull-down | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·高温胁迫下不同水稻品种的蛋白质差异表达 | 第45页 |
·高温胁迫下不同水稻品种若干sHSP 的差异表达 | 第45-46页 |
·高温胁迫下水稻体内sHSP 间的互作 | 第46-47页 |
·高温胁迫下热激蛋白与其他蛋白质间的互作 | 第47-48页 |
5 小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录一 本研究所使用的酵母双杂交载体及表达载体 | 第53-54页 |
附录二 高温处理下不同水稻品种叶片差异蛋白的质谱分析结果 | 第54-55页 |
附录三 高温处理下日本晴根系差异蛋白的质谱分析结果 | 第55页 |
附录四 攻硕期间发表的论文 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |