摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-21页 |
1.1 产油微生物研究概述 | 第10-14页 |
1.1.1 产油微生物简介 | 第10-11页 |
1.1.2 产油微生物的应用 | 第11-12页 |
1.1.3 产油微生物油脂积累生化机制 | 第12-14页 |
1.2 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在油脂合成中的作用 | 第14-18页 |
1.2.1 DGAT的分类和结构 | 第14-16页 |
1.2.2 DGAT底物偏好性 | 第16-17页 |
1.2.3 DGAT在油脂合成中的应用 | 第17-18页 |
1.3 圆红冬孢酵母的研究现状 | 第18页 |
1.4 立题依据和研究内容 | 第18-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第21-22页 |
2.1.2 实验所用的试剂 | 第22页 |
2.1.3 培养基和主要试剂的配置 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-32页 |
2.2.1 圆红冬孢酵母的发酵培养 | 第23-24页 |
2.2.2 发酵过程中的参数测定 | 第24-25页 |
2.2.3 实时定量PCR测定DGAT表达水平 | 第25-26页 |
2.2.4 圆红冬孢酵母DGAT的氨基酸序列分析 | 第26-27页 |
2.2.5 圆红冬孢酵母DGAT表达载体的构建 | 第27-30页 |
2.2.6 酿酒酵母的感受态细胞制备和转化 | 第30页 |
2.2.7 酿酒酵母转化子验证和蛋白质表达水平分析 | 第30-31页 |
2.2.8 酿酒酵母突变菌株的培养和油脂含量分析 | 第31页 |
2.2.9 实验数据统计学分析 | 第31-32页 |
第三章 结果与讨论 | 第32-47页 |
3.1 圆红冬孢酵母油脂积累与DGAT表达水平的相关性 | 第32-35页 |
3.1.1 圆红冬孢酵母细胞内的油脂积累 | 第32-34页 |
3.1.2 圆红冬孢酵母DGAT基因表达水平分析 | 第34-35页 |
3.2 圆红冬孢酵母DGAT氨基酸序列分析 | 第35-39页 |
3.3 圆红冬孢酵母DGAT在酿酒酵母H1246中的表达 | 第39-47页 |
3.3.1 表达载体的构建 | 第40-41页 |
3.3.2 酿酒酵母H1246的转化的验证 | 第41-42页 |
3.3.3 Western blot检测酿酒酵母H1246细胞内蛋白质表达水平 | 第42-43页 |
3.3.4 圆红冬孢酵母DGAT表达对酿酒酵母油脂合成的影响 | 第43-45页 |
3.3.5 外源添加脂肪酸对酿酒酵母H1246油脂合成的影响 | 第45-47页 |
主要结论与展望 | 第47-49页 |
主要结论 | 第47-48页 |
展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |