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泰山松花粉多糖对重组PRRSV GP5蛋白免疫增强作用的研究

符号说明第5-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1.前言第14-22页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征第14-17页
        1.1.1 PRRSV生物学特性第14-15页
        1.1.2 PRRSV分子生物学研究第15页
            1.1.2.1 PRRSV基因结构第15页
            1.1.2.2 PRRSV编码的蛋白第15页
        1.1.3 PRRS流行现状第15-16页
        1.1.4 PRRS致病机理第16页
        1.1.5 临床症状及病理变化第16-17页
        1.1.6 诊断和防制第17页
    1.2 疫苗的发展现状第17-18页
        1.2.1 传统疫苗第17-18页
            1.2.1.1 PRRSV灭活苗第18页
            1.2.1.2 PRRSV减毒活疫苗第18页
    1.3 疫苗佐剂的研究现状第18-21页
        1.3.1 不溶性铝盐类佐剂第19页
        1.3.2 油乳佐剂第19-20页
        1.3.3 表面活性剂类佐剂第20页
        1.3.4 细菌微生物类佐剂第20页
        1.3.5 中药类佐剂第20-21页
        1.3.6 多糖佐剂第21页
    1.4 松花粉多糖的研究进展第21页
    1.5 本研究的目的与意义第21-22页
2. 材料与方法第22-36页
    2.1 重组质粒pET-32a-GP5的鉴定与蛋白的表达第22-29页
        2.1.1 试剂与仪器第22-23页
        2.1.2 试剂和培养基的配制第23-24页
        2.1.3 重组质粒pET-32a-GP5的鉴定第24-27页
            2.1.3.1 重组质粒pET-32a-GP5的转化第24-25页
            2.1.3.2 PCR的鉴定第25-26页
            2.1.3.3 双酶切的鉴定第26-27页
        2.1.4 重组PRRSV GP5蛋白的表达与纯化第27-29页
            2.1.4.1 重组PRRSV GP5蛋白的诱导表达第27-28页
            2.1.4.2 蛋白的制备与纯化第28-29页
    2.2 泰山松花粉多糖对PRRSV GP5蛋白的免疫增强作用第29-36页
        2.2.1 主要试剂与仪器第29页
        2.2.2 主要试剂的配制第29-30页
        2.2.3 亚单位疫苗及免疫佐剂制备第30页
        2.2.4 动物试验及免疫程序第30页
        2.2.5 松花粉多糖对小鼠体液免疫测定第30-34页
            2.2.5.1 血清抗体效价的检测第30-31页
            2.2.5.2 PRRSV特异性中和抗体检测第31-33页
            2.2.5.3 血清中IL-4 的含量检测第33-34页
        2.2.6 松花粉多糖对小鼠细胞免疫的影响第34-35页
            2.2.6.1 血清中IFN-γ和IL-2 的含量检测第34页
            2.2.6.2 外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量的测定第34-35页
            2.2.6.3 外周血T淋巴细胞增殖第35页
        2.2.7 数据分析第35-36页
3. 结果第36-44页
    3.1 重组质粒pET-32a-GP5的鉴定与蛋白表达第36-38页
        3.1.1 重组质粒pET-32a-GP5的鉴定第36-37页
        3.1.2 重组PRRSV GP5蛋白的表达第37-38页
    3.2 松花粉多糖对小鼠体液免疫的影响第38-40页
        3.2.1 血清抗体效价第38-39页
        3.2.2 免疫血清对PRRSV的中和作用第39页
        3.2.3 血清中IL-4 含量的变化第39-40页
    3.3 松花粉多糖对小鼠细胞免疫的影响第40-44页
        3.3.1 血清中IFN-γ含量的变化第40-41页
        3.3.2 血清中IL-2 含量的变化第41页
        3.3.3 外周血CD4+ T淋巴细胞百分含量第41-42页
        3.3.4 外周血CD8+ T淋巴细胞百分含量第42-43页
        3.3.5 外周T淋巴细胞转化率第43-44页
4. 讨论第44-46页
5. 结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
个人简介第53-54页
攻读硕士学位期间发表论文情况第54页

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