| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 第一部分 C57BL/6小鼠回肠类器官培养系统的建立 | 第16-24页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| 1.1 实验动物及饲料 | 第16页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第16-17页 |
| 2. 方法 | 第17-20页 |
| 2.1 小鼠回肠隐窝的分离 | 第17-18页 |
| 2.2 小肠类器官(Enteroids)的培养 | 第18-19页 |
| 2.3 Enteroids传代培养 | 第19页 |
| 2.4 Enteroids冻存和复苏 | 第19-20页 |
| 3. 结果 | 第20-21页 |
| 4. 讨论 | 第21-23页 |
| 5. 结论 | 第23-24页 |
| 第二部分 脱氧胆酸对Enteroids生长和肠道屏障功能的影响 | 第24-41页 |
| 1. 材料 | 第24-25页 |
| 1.1 实验动物及饲料 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 2. 方法 | 第25-28页 |
| 2.1 Enteroids培养 | 第25页 |
| 2.2 DCA干预Enteroids | 第25-26页 |
| 2.3 Enteroids生长情况的量化 | 第26页 |
| 2.4 Fluorescein isothiocyanate-dextran 4000(FD-4)Enteroids通透性实验 | 第26-27页 |
| 2.5 透射电镜观察Enteroids的细胞结构 | 第27页 |
| 2.6 统计学分析 | 第27-28页 |
| 3. 结果 | 第28-36页 |
| 3.1 短期高浓度DCA干预对Enteroids生长的影响 | 第28-30页 |
| 3.2 长期低浓度DCA干预对Enteroids生长的影响 | 第30-32页 |
| 3.3 FD-4实验检测Enteroids肠道通透性情况 | 第32-34页 |
| 3.4 透射电镜观察低浓度DCA长期干预后Enteroids的超微结构变化 | 第34-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-40页 |
| 5. 结论 | 第40-41页 |
| 第三部分 脱氧胆酸对Enteroids生长和屏障功能影响的机制研究 | 第41-100页 |
| 1. 材料 | 第42-44页 |
| 1.1 实验动物及饲料 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第42-44页 |
| 2. 方法 | 第44-51页 |
| 2.1 Enteroids培养和DCA干预 | 第44页 |
| 2.2 小鼠基因表达谱芯片分析 | 第44-45页 |
| 2.3 荧光实时定量PCR (Realtime PCR) | 第45-47页 |
| 2.4 免疫印迹(Western Blot, WB) | 第47-51页 |
| 2.5 统计学分析 | 第51页 |
| 3. 结果 | 第51-91页 |
| 3.1 RNA质控结果 | 第51页 |
| 3.2 芯片数据的质控结果 | 第51-54页 |
| 3.3 芯片数据分析结果 | 第54-88页 |
| 3.4 ERK2和TCF4在Enteroids中的表达 | 第88-89页 |
| 3.5 紧密连接相关蛋白Occludin和MLCK在Enteroids中的表达改变 | 第89-91页 |
| 4. 讨论 | 第91-99页 |
| 5. 结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-109页 |
| 文献综述 肠道类器官研究进展 | 第109-121页 |
| 参考文献 | 第116-121页 |
| 附录 英语缩写说明 | 第121-127页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
