| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-18页 |
| 第一节：REGγ与蛋白质酶体降解系统 | 第10-15页 |
| ·蛋白酶体系统 | 第11-12页 |
| ·20s蛋白酶体核心颗粒 | 第12页 |
| ·REGγ的生物化学特性 | 第12-13页 |
| ·REGγ的靶蛋白 | 第13-14页 |
| ·20s蛋白酶体的纯化 | 第14-15页 |
| 第二节 PKA信号通路 | 第15-17页 |
| ·PKA的同工酶 | 第15-16页 |
| ·PKA同工酶的特征 | 第16-17页 |
| 第三节 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 ：实验材料与方法 | 第18-35页 |
| 第一节 实验材料 | 第18-23页 |
| ·蛋白纯化所用主要试剂和层析柱 | 第18页 |
| ·主要细胞 | 第18页 |
| ·培养细胞主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·蛋白纯化自配溶液 | 第19-22页 |
| ·主要设备 | 第22-23页 |
| 第二节 实验方法 | 第23-35页 |
| ·蛋白纯化方法 | 第23-28页 |
| ·克隆的构建 | 第28-31页 |
| ·免疫印记分析(Western Blotting) | 第31-33页 |
| ·免疫荧光 | 第33页 |
| ·GST-pull down实验 | 第33-35页 |
| 第三章 ：实验结果与分析 | 第35-52页 |
| 第一节：蛋白酶体核心颗粒20s的纯化 | 第35-38页 |
| ·纯化方案 | 第35页 |
| ·过分子筛柱 | 第35-38页 |
| 第二节：蛋白酶体激活因子REGγ的纯化 | 第38-41页 |
| ·纯化方案Ⅰ | 第38页 |
| ·纯化方案Ⅱ | 第38-39页 |
| ·纯化方案Ⅲ | 第39-41页 |
| 第三节：REGγ蛋白酶体对底物的降解 | 第41-44页 |
| ·REGγ降解靶蛋白 | 第41-42页 |
| ·REGγ与20sα亚基的相互作用 | 第42-44页 |
| ·体外纯化REGγ突变体七聚体的形成 | 第44页 |
| 第四节：REGγ对PKA Cα的调节 | 第44-48页 |
| ·REGγ调节PKA Cα的蛋白水平 | 第45-46页 |
| ·PKA Cα与REGγ蛋白酶体的相互作用 | 第46-47页 |
| ·REGγ调控PKA信号通路 | 第47-48页 |
| 第五节：转录因子Smad3和突变型p53相互作用区域的确定 | 第48-52页 |
| ·体外实验证明野生型p53和突变型p53和Smad3的相互作用能力较Smad2要强 | 第49页 |
| ·确定Smad3与突变型或野生型p53相互作用区域 | 第49-50页 |
| ·确定突变型或野生型p53与Smad3相互作用区域 | 第50页 |
| ·确定突变型p53碳末端392位点是介导Smad3相互作用的若干重要位点之一 | 第50-52页 |
| 第四章 结论与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
