| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第18-31页 |
| 1.1 木质纤维素酶概述 | 第18-23页 |
| 1.1.1 木质纤维素概况 | 第18-19页 |
| 1.1.2 纤维素的水解机制 | 第19-21页 |
| 1.1.3 纤维素酶的生产技术 | 第21-22页 |
| 1.1.4 纤维素酶应用 | 第22-23页 |
| 1.2 黑曲霉纤维素酶及改造 | 第23-25页 |
| 1.2.1 丝状真菌遗传转化系统 | 第23-24页 |
| 1.2.2 黑曲霉纤维素酶改造研究进展 | 第24-25页 |
| 1.3 酿酒酵母在纤维素乙醇工业上的应用及改造 | 第25-27页 |
| 1.3.1 酿酒酵母在乙醇工业上的应用 | 第25-26页 |
| 1.3.2 酿酒酵母中表达纤维素酶 | 第26-27页 |
| 1.4 木质纤维素乙醇工业研究进展 | 第27-28页 |
| 1.4.1 发展历程及现状 | 第27页 |
| 1.4.2 木质纤维素乙醇生产工艺 | 第27-28页 |
| 1.5 本课题研究的目的意义及主要内容 | 第28-31页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第29-30页 |
| 1.5.3 主要技术路线框架图 | 第30-31页 |
| 第二章 黑曲霉中表达纤维素酶基因及粗酶液糖化水稻秸秆 | 第31-52页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第31-33页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第31页 |
| 2.1.2 试剂 | 第31-33页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 2.1.4 培养基 | 第33页 |
| 2.2 试验方法 | 第33-41页 |
| 2.2.1 溶液的配制 | 第33-34页 |
| 2.2.2 表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.3 黑曲霉原生质体的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.4 转化与筛选 | 第36页 |
| 2.2.5 透明圈分析与发酵液的SDS-PAGE | 第36-37页 |
| 2.2.6 液态发酵产纤维素酶历程研究 | 第37-39页 |
| 2.2.7 水稻秸秆的碱性氧化预处理 | 第39页 |
| 2.2.8 不同碳源诱导产纤维素酶研究 | 第39页 |
| 2.2.9 硫酸铵分段盐析初步纯化纤维素酶 | 第39-41页 |
| 2.2.10 粗酶液水解水稻秸秆研究 | 第41页 |
| 2.3 结果与分析 | 第41-50页 |
| 2.3.1 表达载体pgF-sestc构建 | 第41-43页 |
| 2.3.2 黑曲霉原生质体制备 | 第43-44页 |
| 2.3.3 最低潮霉素浓度的确定 | 第44页 |
| 2.3.4 PCR筛选转化子 | 第44-45页 |
| 2.3.5 透明圈分析与SDS-PAGE | 第45-47页 |
| 2.3.6 液态发酵产纤维素酶 | 第47-48页 |
| 2.3.7 不同碳源诱导产纤维素酶 | 第48-49页 |
| 2.3.8 分段盐析初步分离纤维素酶 | 第49-50页 |
| 2.3.9 工程菌No.17 纤维素酶粗酶液水解预处理水稻秸秆 | 第50页 |
| 2.4 本章小结 | 第50-52页 |
| 第三章 sestc在酿酒酵母中的表达及其酶学性质 | 第52-69页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第52-54页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第52页 |
| 3.1.2 所用试剂 | 第52-53页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第53页 |
| 3.1.4 培养基 | 第53-54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 3.2.1 溶液的配制 | 第54页 |
| 3.2.2 表达载体转化与分子验证 | 第54-55页 |
| 3.2.3 透明圈鉴定 | 第55页 |
| 3.2.4 纤维素酶表达 | 第55页 |
| 3.2.5 纤维素粗酶液酶学性质研究 | 第55-56页 |
| 3.2.6 CBP乙醇发酵 | 第56-57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-68页 |
| 3.3.1 酿酒酵母原生质体的制备 | 第57-58页 |
| 3.3.2 潮霉素筛选转化子 | 第58-59页 |
| 3.3.3 转化子的筛选和分子鉴定 | 第59-60页 |
| 3.3.4 转化子透明圈试验 | 第60-61页 |
| 3.3.5 酵母转化子发酵产纤维素酶 | 第61-62页 |
| 3.3.6 表达纤维素酶的酶学性质 | 第62-67页 |
| 3.3.7 酵母工程菌CBP乙醇发酵 | 第67-68页 |
| 3.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 原位糖化水稻秸秆及产乙醇 | 第69-81页 |
| 4.1 材料与设备 | 第69-71页 |
| 4.1.1 菌株 | 第69页 |
| 4.1.2 试剂 | 第69-70页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第70页 |
| 4.1.4 培养基 | 第70-71页 |
| 4.2 试验方法 | 第71-73页 |
| 4.2.1 溶液配置 | 第71页 |
| 4.2.2 接种体制备 | 第71页 |
| 4.2.3 水稻秸秆固态发酵历程研究 | 第71页 |
| 4.2.4 水稻秸秆的原位糖化及发酵产乙醇 | 第71页 |
| 4.2.5 水稻秸秆的原位同步糖化发酵 | 第71-72页 |
| 4.2.6 测定方法 | 第72-73页 |
| 4.3 结果与分析 | 第73-80页 |
| 4.3.1 固态发酵过程中的滤纸酶活 | 第73页 |
| 4.3.2 固态发酵过程中内切葡聚糖酶活的变化 | 第73-74页 |
| 4.3.3 固态发酵过程中的外切葡聚糖酶活 | 第74-75页 |
| 4.3.4 固态发酵过程中的木聚糖酶活 | 第75-76页 |
| 4.3.5 固态发酵过程中产生还原糖含量 | 第76页 |
| 4.3.6 固态发酵过程中底物水稻秸秆的降解 | 第76-77页 |
| 4.3.7 水稻秸秆的原位产酶糖化 | 第77-78页 |
| 4.3.8 水解液的乙醇发酵 | 第78-79页 |
| 4.3.9 同步糖化发酵产乙醇 | 第79-80页 |
| 4.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第五章 结论与展望 | 第81-83页 |
| 5.1 结论 | 第81-82页 |
| 5.2 展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第93-94页 |