| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 葡萄 | 第11页 |
| 2 植物的氮素营养 | 第11-14页 |
| 2.1 在植物体内氮元素的含量以及其在各器官的分布状况 | 第11-12页 |
| 2.2 氮的营养功能 | 第12页 |
| 2.3 植物对氮的吸收与利用 | 第12-14页 |
| 3 硝酸还原酶的研究进展 | 第14-16页 |
| 3.1 硝酸还原酶的组成 | 第14页 |
| 3.2 硝酸还原酶的分布 | 第14页 |
| 3.3 硝酸还原酶活性调节 | 第14-16页 |
| 3.4 硝酸还原酶在农业上的应用 | 第16页 |
| 4 基因人工合成法 | 第16-18页 |
| 4.1 重叠延伸PCR | 第17页 |
| 4.2 连续延伸PCR | 第17页 |
| 4.3 基于PCR的两步PTDS方法 | 第17-18页 |
| 5 研究目的和研究内容 | 第18-19页 |
| 5.1 研究目的 | 第18页 |
| 5.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 葡萄硝酸还原酶NR基因的合成及序列分析 | 第19-31页 |
| 1 材料与方法 | 第19-26页 |
| 1.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 1.2 引物设计和PCR扩增 | 第20-23页 |
| 1.3 克隆与序列分析 | 第23-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-29页 |
| 2.1 VVNR1I基因的合成 | 第26页 |
| 2.2 VVNR1I基因序列分析 | 第26-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 VVNR1I基因在毕赤酵母中的异源表达 | 第31-43页 |
| 1 材料与方法 | 第31-37页 |
| 1.1 试验材料 | 第31-32页 |
| 1.2 试验方法 | 第32-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-41页 |
| 2.1 表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.2 VvNR1I基因的表达和纯化 | 第38-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 葡萄硝酸还原酶测定条件的优化 | 第43-51页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 1.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 1.2 试验方法 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| 2.1 亚硝酸盐标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
| 2.2 培养时间对葡萄硝酸还原酶测定的影响 | 第46-47页 |
| 2.3 培养基中添加硝酸钾的浓度对葡萄硝酸还原酶测定的影响 | 第47页 |
| 2.4 不同pH对葡萄硝酸还原酶测定的影响 | 第47-48页 |
| 2.5 不同金属离子对葡萄硝酸还原酶测定的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 全文总结 | 第51-53页 |
| 本文创新点 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |