| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1 植物遗传转化方法 | 第12-13页 |
| 2 农杆菌介导的遗传转化技术及其在菊花中应用 | 第13-16页 |
| ·启动子选择 | 第14-15页 |
| ·农杆菌菌株类型 | 第15页 |
| ·植物基因型及转化受体类型 | 第15-16页 |
| ·伤口及化学物质 | 第16页 |
| ·其他影响因素 | 第16页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第二章 CaMV启动子(35S)在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析 | 第18-48页 |
| 摘要 | 第18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·试剂与仪器 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·仪器设备 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-32页 |
| ·启动子序列的克隆 | 第19-22页 |
| ·表达载体构建 | 第22-24页 |
| ·重组质粒提取 | 第24页 |
| ·重组质粒的双酶切验证 | 第24页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·农杆菌转化与筛选 | 第25页 |
| ·农杆菌介导法转化菊花 | 第25-26页 |
| ·化学染色法检测GUS表达 | 第26-27页 |
| ·转基因‘神马’抗性株系的分子验证 | 第27-32页 |
| ·数据处理方法 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-45页 |
| ·35S启动子、2×35S启动子全长序列 | 第32-34页 |
| ·35S及2×35S驱动GUS基因的植物表达载体 | 第34页 |
| ·重组质粒双酶切验证 | 第34-35页 |
| ·菊花遗传表达载体的菌液检测 | 第35-36页 |
| ·菊花转基因抗性株系的获得 | 第36-38页 |
| ·转基因抗性株系的GUS基因表达水平检测 | 第38-41页 |
| ·转基因株系叶片GUS染色 | 第38页 |
| ·转基因株系花GUS染色 | 第38-39页 |
| ·不同苗龄pORE R1-2×35S:GUS转基因株系GUS染色 | 第39-40页 |
| ·5-Aza-C处理转基因株系GUS染色 | 第40-41页 |
| ·转基因株系DNA水平检测 | 第41-42页 |
| ·DNA提取质量检测 | 第41页 |
| ·DNA PCR扩增效果检测 | 第41-42页 |
| ·转基因抗性株系的基因转录水平检测 | 第42-45页 |
| ·RNA提取质量与反转录效果检测 | 第42-43页 |
| ·GUS基因RT-PCR检测 | 第43-44页 |
| ·荧光定量PCR | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 农杆菌介导的菊花叶片瞬时转化体系的构建 | 第48-60页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·试剂与仪器 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-52页 |
| ·农杆菌介导法瞬时转化材料叶片 | 第49-51页 |
| ·化学染色法检测筛选瞬时转化叶片中GUS表达 | 第51页 |
| ·瞬时转化叶片的分子鉴定 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-58页 |
| ·瞬时转化材料选择 | 第52页 |
| ·pORE R1-2×35S：GUS瞬时转化植株叶片 | 第52-56页 |
| ·瞬时转化后植株叶面表现 | 第52-53页 |
| ·化学染色法检测转化叶片中GUS瞬时表达 | 第53-54页 |
| ·叶片中GUS瞬时表达RT-PCR验证 | 第54-56页 |
| ·pMDC 43-2×35S:GUS瞬时转化植物叶片 | 第56-58页 |
| ·化学染色法检测转化叶片中GUS瞬时表达 | 第56页 |
| ·叶片中GUS瞬时表达RT-PCR检测 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第60-62页 |
| 创新点 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文、申请专利 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
