| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 研究综述 | 第12-22页 |
| ·LEA 蛋白概述 | 第12-13页 |
| ·LEA 蛋白的结构 | 第13-14页 |
| ·LEA 蛋白的分类 | 第14-16页 |
| ·LEA 蛋白的功能 | 第16-19页 |
| ·抗氧化功能 | 第16-17页 |
| ·离子结合作用 | 第17-18页 |
| ·冷冻保护剂 | 第18页 |
| ·参与内膜系统的连接、折叠和稳定 | 第18页 |
| ·其他潜在的功能 | 第18-19页 |
| ·LEA 蛋白在植物细胞和亚细胞中的定位 | 第19-20页 |
| ·LEA 蛋白异源表达的研究 | 第20-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第22页 |
| ·研究技术路线 | 第22页 |
| ·研究主要内容 | 第22-23页 |
| ·创新之处 | 第23-24页 |
| 第三章 大豆 Lea5 基因的克隆与表达分析 | 第24-37页 |
| ·试验材料与试剂 | 第24-26页 |
| ·试验材料 | 第24页 |
| ·试验试剂与仪器 | 第24-25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·试验方法与步骤 | 第26-33页 |
| ·试验材料处理 | 第26页 |
| ·大豆幼苗总 RNA 提取与检测 | 第26-27页 |
| ·cDNA 的合成 | 第27-28页 |
| ·DDRT-PCR | 第28-29页 |
| ·核酸 SDS-PAGE 凝胶电泳及银染 | 第29-30页 |
| ·差异条带回收与二次扩增 | 第30-31页 |
| ·差异片段的克隆、测序以及分析 | 第31-32页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第31页 |
| ·制作感受态大肠杆菌 | 第31页 |
| ·连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·质粒提取与测序 | 第32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32页 |
| ·半定量 PCR 表达分析 | 第32-33页 |
| ·试验结果与分析 | 第33-36页 |
| ·大豆 Lea5 基因的克隆 | 第33-35页 |
| ·Lea5 蛋白序列分析 | 第35页 |
| ·Lea5 基因的表达分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 农杆菌介导的 Lea5 转化烟草的研究 | 第37-55页 |
| ·试验材料、试剂和实验仪器 | 第37-39页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·试验试剂 | 第37-39页 |
| ·试验仪器及设备 | 第39页 |
| ·试验方法及步骤 | 第39-48页 |
| ·pBI121-Lea5 表达载体的构建以及转化 | 第39-41页 |
| ·pBI121-Lea5 表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·CaCl2法制备大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第41页 |
| ·pBI121-Lea5 表达载体的转化 | 第41页 |
| ·阳性菌落质粒的提取及鉴定 | 第41页 |
| ·农杆菌 LB4404 介导烟草转化 | 第41-42页 |
| ·农杆菌 LB4404 感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·农杆菌 LB4404 的转化及鉴定 | 第41-42页 |
| ·叶圆盘法转化烟草 | 第42页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定 | 第42-45页 |
| ·转基因烟草植株的 DNA 的鉴定 | 第42-45页 |
| ·转 Lea5 基因植株的表达检测 | 第45-46页 |
| ·蛋白质 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第46-48页 |
| ·试验结果与分析 | 第48-53页 |
| ·pBI121-Lea5 表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·转 Lea5 基因烟草的转化与再生 | 第49页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定 | 第49-51页 |
| ·叶盘转化法获得转基因烟草 | 第51页 |
| ·转 Lea5 基因植株的表达半定量检测 | 第51-52页 |
| ·转 Lea5 基因烟草总蛋白 SDS-PAGE 电泳 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 总结与展望 | 第55-56页 |
| ·总结 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 攻读硕士学位期间出版或发表的论著、论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |