中英文缩略词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一部分 | 第12-65页 |
前言 | 第13-16页 |
材料与方法 | 第16-41页 |
1. 实验材料 | 第16-24页 |
·组织样本 | 第16页 |
·菌种、质粒及细胞株 | 第16-17页 |
·主要试剂 | 第17-19页 |
·主要仪器设备 | 第19-21页 |
·实时定量PCR引物序列 | 第21页 |
·重要试剂的配制 | 第21-24页 |
2. 研究方法 | 第24-41页 |
·细胞处理 | 第24-25页 |
·总RNA和总蛋白的提取 | 第25-27页 |
·RNA和蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
·利用基因芯片检测mRNA表达谱 | 第28-33页 |
·PCR | 第33-34页 |
·Western Blotting | 第34-35页 |
·感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
·转化 | 第36页 |
·质粒提取及鉴定 | 第36-38页 |
·质粒瞬时转染 | 第38-39页 |
·Transwell实验 | 第39页 |
·免疫组织化学 | 第39-40页 |
·统计学分析 | 第40-41页 |
实验结果 | 第41-59页 |
1. ESCC组织中差异性表达的基因 | 第41-44页 |
·利用表达谱芯片检测ESCC组织样本中总mRNA表达谱 | 第42-43页 |
·ESCC组织mRNA表达的总体特征 | 第43页 |
·ESCC组织中差异性表达基因的功能分析 | 第43-44页 |
2. 重度不典型增生组织中差异性表达的基因 | 第44-48页 |
·重度不典型增生组织mRNA表达的总体特征 | 第46-47页 |
·在正常组织、切缘组织及病变组织中逐渐高表达的基因 | 第47页 |
·在正常组织、切缘组织及病变组织中逐渐降低表达的基因 | 第47-48页 |
3. 在ESCC及重度不典型增生组织中均出现差异性表达的基因 | 第48-49页 |
4. 差异性表达的候选基因 | 第49-53页 |
·候选基因在临床组织中mRNA水平的表达情况 | 第49-51页 |
·候选基因在各细胞株中的表达情况 | 第51-53页 |
5. 候选基因Aurora-A | 第53-59页 |
·候选基因Aurora-A在ESCC及其癌前病变组织中的表达特征 | 第54-57页 |
·过表达Aurora-A基因,人食管上皮永生化细胞体外增殖和迁移能力均上升 | 第57-59页 |
讨论 | 第59-63页 |
展望 | 第63-64页 |
小结 | 第64-65页 |
第二部分 | 第65-82页 |
前言 | 第66-68页 |
材料与方法 | 第68-73页 |
1. 实验材料 | 第68-69页 |
·组织样本 | 第68页 |
·菌种、质粒及细胞株 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68页 |
·主要仪器设备 | 第68-69页 |
·引物的合成与设计 | 第69页 |
·重要试剂的配制 | 第69页 |
2. 研究方法 | 第69-73页 |
·对细胞的处理 | 第69页 |
·细胞总RNA和总蛋白的提取 | 第69-70页 |
·RNA和蛋白的浓度测定 | 第70页 |
·P C R | 第70页 |
·Western Blotting | 第70页 |
·Transwell实验 | 第70-71页 |
·免疫组织化学 | 第71-72页 |
·数据的获取及分析 | 第72-73页 |
实验结果 | 第73-78页 |
1. Nlp基因在ESCC及其癌前病变组织中的表达特征 | 第73-75页 |
·Nlp的表达水平与食管上皮鳞状细胞的病变严重程度呈正相关 | 第73-74页 |
·Nlp的表达水平与其他主要临床特征无明显相关性 | 第74-75页 |
2. Nlp基因和Aurora-A基因的表达水平呈线性正相关 | 第75-76页 |
3. Nlp基因mRNA在临床组织中的表达情况 | 第76-77页 |
4. 过表达Nlp基因,人食管上皮永生化细胞迁移能力显著上升、体外增殖能力也存在上升现象 | 第77-78页 |
讨论 | 第78-81页 |
小结 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
文献综述 | 第87-93页 |
参考文献 | 第90-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
硕士在读期间发表与待发表论文 | 第94-95页 |
基金资助 | 第95-96页 |