| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| ·深海微生物资源研究概况 | 第13-14页 |
| ·龙须菜及琼胶简介 | 第14-15页 |
| ·菌株Flammeovirga pacifica WPAGA1介绍 | 第15页 |
| ·琼胶酶 | 第15-17页 |
| ·琼胶酶简介 | 第15-16页 |
| ·琼胶酶的应用 | 第16-17页 |
| ·琼胶寡糖研究进展 | 第17-19页 |
| ·本论文研究的思路、目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 Flammeovirga pacifica WPAGA1中琼胶酶基因的克隆表达 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·琼胶酶基因克隆引物 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·常用溶液 | 第22-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·数据库和主要分析软件 | 第24-25页 |
| ·基本方法 | 第25-29页 |
| ·Flammeovirga pacifica WPAGA1全基因组序列分析及琼胶酶基因的分析 | 第25页 |
| ·细菌染色体DNA的提取 | 第25页 |
| ·琼胶酶基因的PCR扩增及重组克隆质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第26页 |
| ·琼胶酶的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第27页 |
| ·重组琼胶酶活力的检测 | 第27-28页 |
| ·重组琼胶酶的纯化 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-35页 |
| ·Flammeovirga pacifica WPAGA1全基因组序列分析 | 第29-30页 |
| ·琼胶酶基因序列的分析 | 第30-33页 |
| ·琼胶酶基因的克隆表达 | 第33-34页 |
| ·重组琼胶酶的纯化 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 3 重组琼胶酶的酶学性质及其降解产物的初步研究 | 第37-50页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·重组琼胶酶 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·常用溶液 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·重组琼胶酶的酶学性质的分析 | 第39页 |
| ·酶解产物的初步分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·重组琼胶酶Aga P2049、Aga P4255、Aga P4383的酶学性质 | 第40-46页 |
| ·酶解产物的分析 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 4 重组琼胶酶Aga P4383诱导表达条件的优化 | 第50-57页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·琼胶酶Aga P4383动力学参数的研究 | 第50页 |
| ·单因素试验优化重组琼胶酶Aga P4383诱导表达条件 | 第50-51页 |
| ·正交试验优化重组琼胶酶Aga P4383的诱导表达 | 第51页 |
| ·验证性实验 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·动力学参数 | 第52页 |
| ·单因素试验优化重组琼胶酶Aga P4383诱导表达条件 | 第52-54页 |
| ·正交试验优化重组琼胶酶Aga P4383的诱导表达 | 第54-55页 |
| ·验证性试验 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 5 琼胶寡糖酶法制备及其生物活性的初步研究 | 第57-73页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·原料及试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-62页 |
| ·琼胶寡糖的酶法制备 | 第57-58页 |
| ·琼胶寡糖体外清除DPPH自由基的能力 | 第58-59页 |
| ·细胞水平上抗氧化活性的研究 | 第59-60页 |
| ·琼胶寡糖对圣女果的保鲜作用 | 第60-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-71页 |
| ·琼胶寡糖的酶法制备 | 第62页 |
| ·琼胶寡糖体外清除DPPH自由基的能力 | 第62页 |
| ·在细胞水平上研究寡糖的抗氧化活性 | 第62-65页 |
| ·琼胶寡糖对圣女果的保鲜作用 | 第65-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 6 总结与展望 | 第73-75页 |
| ·总结 | 第73页 |
| ·展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |