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猪脑心肌炎HB10株的3C蛋白酶对Ⅰ型干扰素信号通路的影响

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 文献综述第10-25页
   ·猪脑心肌炎病毒第10-14页
     ·猪脑心肌炎的流行病学第10-11页
     ·猪脑心肌炎病毒的生物学特征第11-12页
     ·猪脑心肌炎病毒的致病机理第12-14页
   ·Ⅰ型干扰素信号通路的概述第14-23页
     ·Ⅰ型干扰素的产生及功能第15-16页
     ·Ⅰ型干扰素的调控机制及信号传导通路第16-23页
   ·研究的目的及意义第23-25页
第2章 猪脑心肌炎HB10 3C蛋白的单克隆抗体的制备第25-46页
   ·实验材料第25-29页
     ·病毒株、菌株和细胞株第25页
     ·载体、重组质粒、引物和实验动物第25-26页
     ·试剂第26页
     ·实验仪器第26-27页
     ·培养基、抗生素和缓冲液的配制第27-29页
   ·实验方法第29-40页
     ·3C目的基因片段的扩增第29-31页
     ·PCR产物和载体酶切回收第31-33页
     ·目的片段与载体连接第33页
     ·感受态转化第33-34页
     ·重组质粒的阳性鉴定第34-35页
     ·重组3C蛋白的表达纯化及免疫BALB/c小鼠第35-37页
     ·单克隆抗体的制备第37-39页
     ·腹水的制备第39页
     ·单克隆抗体特异性分析第39-40页
   ·实验结果第40-45页
     ·重组质粒pET-28a-3C和pCAGGS-HA-3C的构建第40-42页
     ·重组3C蛋白的诱导表达及纯化的结果第42-43页
     ·单克隆抗体制备及腹水效价测定结果第43-44页
     ·单克隆抗体特异性分析结果第44-45页
   ·讨论第45-46页
第3章 猪脑心肌炎病毒HB10 3C蛋白酶对Ⅰ型干扰素信号通路的影响第46-64页
   ·实验材料第46-48页
     ·病毒株和细胞株第46页
     ·质粒第46-47页
     ·主要试剂配制第47页
     ·主要试剂配制第47-48页
   ·实验方法第48-51页
     ·细胞培养、外源基因瞬时转染和病毒纯化第48页
     ·RNA的提取及荧光定量RT-PCR的检测第48-49页
     ·双荧光素酶报告基因试验第49-50页
     ·酶联免疫吸附试验第50页
     ·干扰素敏感性试验第50页
     ·激光共聚焦试验第50-51页
     ·数据统计与分析第51页
   ·实验结果第51-62页
     ·EMCV-HB10感染不能激活干扰素的产生第51-53页
     ·EMCV-HB10感染抑制poly(I:C)介导的Ⅰ型干扰素信号通路第53-55页
     ·EMCV-3C蛋白酶抑制Ⅰ型干扰素信号通路第55-57页
     ·EMCV 3C蛋白酶抑制poly(I:C)激活的Ⅰ型干扰素信号通路第57-59页
     ·EMCV 3C蛋白酶抑制IRF3磷酸化,并依赖于其蛋白酶活性第59-61页
     ·EMCV 3C抑制先天性免疫分子介导的IFN-β启动子活性第61-62页
   ·讨论第62-64页
第4章 结论第64-65页
   ·结果分析第64页
   ·创新点第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-76页
个人简介第76-77页

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