摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-25页 |
·猪脑心肌炎病毒 | 第10-14页 |
·猪脑心肌炎的流行病学 | 第10-11页 |
·猪脑心肌炎病毒的生物学特征 | 第11-12页 |
·猪脑心肌炎病毒的致病机理 | 第12-14页 |
·Ⅰ型干扰素信号通路的概述 | 第14-23页 |
·Ⅰ型干扰素的产生及功能 | 第15-16页 |
·Ⅰ型干扰素的调控机制及信号传导通路 | 第16-23页 |
·研究的目的及意义 | 第23-25页 |
第2章 猪脑心肌炎HB10 3C蛋白的单克隆抗体的制备 | 第25-46页 |
·实验材料 | 第25-29页 |
·病毒株、菌株和细胞株 | 第25页 |
·载体、重组质粒、引物和实验动物 | 第25-26页 |
·试剂 | 第26页 |
·实验仪器 | 第26-27页 |
·培养基、抗生素和缓冲液的配制 | 第27-29页 |
·实验方法 | 第29-40页 |
·3C目的基因片段的扩增 | 第29-31页 |
·PCR产物和载体酶切回收 | 第31-33页 |
·目的片段与载体连接 | 第33页 |
·感受态转化 | 第33-34页 |
·重组质粒的阳性鉴定 | 第34-35页 |
·重组3C蛋白的表达纯化及免疫BALB/c小鼠 | 第35-37页 |
·单克隆抗体的制备 | 第37-39页 |
·腹水的制备 | 第39页 |
·单克隆抗体特异性分析 | 第39-40页 |
·实验结果 | 第40-45页 |
·重组质粒pET-28a-3C和pCAGGS-HA-3C的构建 | 第40-42页 |
·重组3C蛋白的诱导表达及纯化的结果 | 第42-43页 |
·单克隆抗体制备及腹水效价测定结果 | 第43-44页 |
·单克隆抗体特异性分析结果 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第3章 猪脑心肌炎病毒HB10 3C蛋白酶对Ⅰ型干扰素信号通路的影响 | 第46-64页 |
·实验材料 | 第46-48页 |
·病毒株和细胞株 | 第46页 |
·质粒 | 第46-47页 |
·主要试剂配制 | 第47页 |
·主要试剂配制 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-51页 |
·细胞培养、外源基因瞬时转染和病毒纯化 | 第48页 |
·RNA的提取及荧光定量RT-PCR的检测 | 第48-49页 |
·双荧光素酶报告基因试验 | 第49-50页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第50页 |
·干扰素敏感性试验 | 第50页 |
·激光共聚焦试验 | 第50-51页 |
·数据统计与分析 | 第51页 |
·实验结果 | 第51-62页 |
·EMCV-HB10感染不能激活干扰素的产生 | 第51-53页 |
·EMCV-HB10感染抑制poly(I:C)介导的Ⅰ型干扰素信号通路 | 第53-55页 |
·EMCV-3C蛋白酶抑制Ⅰ型干扰素信号通路 | 第55-57页 |
·EMCV 3C蛋白酶抑制poly(I:C)激活的Ⅰ型干扰素信号通路 | 第57-59页 |
·EMCV 3C蛋白酶抑制IRF3磷酸化,并依赖于其蛋白酶活性 | 第59-61页 |
·EMCV 3C抑制先天性免疫分子介导的IFN-β启动子活性 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
第4章 结论 | 第64-65页 |
·结果分析 | 第64页 |
·创新点 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
个人简介 | 第76-77页 |