| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| ·镰刀菌研究概况 | 第10-11页 |
| ·赤霉病 | 第10页 |
| ·禾谷镰刀菌 | 第10-11页 |
| ·禾谷镰刀菌在小麦穗部的侵染过程 | 第11页 |
| ·真菌细胞壁 | 第11-13页 |
| ·真菌细胞壁的组成及结构 | 第11-12页 |
| ·几丁质合成酶的分类与结构 | 第12-13页 |
| ·几丁质合成酶的生物学功能 | 第13页 |
| ·RNAi技术 | 第13-15页 |
| ·RNAi技术的发现 | 第13-14页 |
| ·RNAi的特点 | 第14-15页 |
| ·RNAi作用机制 | 第15页 |
| ·丝状真菌中与RNAi相关的基因沉默 | 第15-17页 |
| ·RNA压制（quelling） | 第15-16页 |
| ·非配对DNA诱导的减数分裂沉默现象 | 第16页 |
| ·真菌中的小RNA | 第16-17页 |
| ·真菌RNAi研究路线 | 第17-18页 |
| ·转化的方法 | 第17页 |
| ·RNAi发卡结构表达载体应用 | 第17-18页 |
| ·RNAi双启动子系统的应用 | 第18页 |
| ·研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·真菌菌株 | 第19页 |
| ·小麦材料 | 第19页 |
| ·质粒载体 | 第19页 |
| ·试剂及培养基 | 第19-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·Gateway反应步骤 | 第23页 |
| ·感受态细胞制备及转化 | 第23-24页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·质粒DNA的提取试剂盒回收DNA片段 | 第25页 |
| ·原生质体的制备及转化 | 第25-26页 |
| ·转化子PCR检测 | 第26-27页 |
| ·转化子Southern blot分析 | 第27-28页 |
| ·转化子产孢能力分析和分生孢子形态大小的比较 | 第28页 |
| ·压力敏感性分析 | 第28页 |
| ·几丁质含量分析 | 第28-29页 |
| ·转化子田间花期单花接种 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-47页 |
| ·几丁质合成酶（Chs1）小片段功能分析和鉴定 | 第30-38页 |
| ·基因序列比对 | 第30页 |
| ·目的片段的扩增 | 第30页 |
| ·pSXSH-RNAi-Chs1 系列干扰表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·导入Chs1 小片段RNAi载体菌株的筛选与鉴定 | 第31-33页 |
| ·导入Chs1 小片段RNAi载体菌株southern blot鉴定 | 第33-34页 |
| ·Chs1 小片段RNAi真菌菌株对不同外界压力的敏感性分析 | 第34-35页 |
| ·Chs1 小片段RNAi真菌菌株产孢量和分生孢子形态大小的分析 | 第35-36页 |
| ·Chs1 小片段RNAi真菌菌株致病力分析 | 第36-37页 |
| ·Chs1 小片段RNAi真菌菌株几丁质含量的测定分析 | 第37-38页 |
| ·几丁质合成酶（Chs2）小片段功能分析和鉴定 | 第38-47页 |
| ·基因序列比对 | 第38页 |
| ·目的片段的扩增 | 第38-39页 |
| ·pSXSH-RNAi-Chs2 系列干扰表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·导入Chs2 小片段RNAi载体菌株的筛选与鉴定 | 第40-42页 |
| ·导入Chs2 小片段RNAi载体菌株southern blot鉴定 | 第42页 |
| ·Chs2 小片段RNAi真菌菌株对不同外界压力的敏感性分析 | 第42-43页 |
| ·Chs2 小片段RNAi真菌菌株产孢量和分生孢子形态大小的分析 | 第43-44页 |
| ·Chs2 小片段RNAi真菌菌株致病力分析 | 第44-45页 |
| ·Chs2 小片段RNAi真菌菌株几丁质含量的测定分析 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
