基于表面增强拉曼光谱法的新型高灵敏度核酸传感器
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-31页 |
| ·RNA概述 | 第12-16页 |
| ·RNA简介 | 第12页 |
| ·miRNA简介 | 第12-13页 |
| ·miRNA在体内的基本生理作用 | 第13页 |
| ·检测miRNA的意义 | 第13-14页 |
| ·miRNA的检测方法 | 第14-15页 |
| ·基于探针杂交技术的miRNA检测方法 | 第14页 |
| ·Northern blotting法及其改进 | 第14-15页 |
| ·基于微阵列芯片和微球技术的高通量检测方法 | 第15页 |
| ·miRNA的研究进展 | 第15-16页 |
| ·几种工具酶简介 | 第16-18页 |
| ·T7 RNA聚合酶 | 第16-17页 |
| ·T4 DNA连接酶 | 第17页 |
| ·DNA限制性内切酶 | 第17-18页 |
| ·孔雀石绿 | 第18-20页 |
| ·孔雀石绿简介 | 第18-19页 |
| ·孔雀石绿与适体序列的结合 | 第19-20页 |
| ·表面增强拉曼散射 | 第20-24页 |
| ·拉曼散射简介 | 第20-22页 |
| ·拉曼散射的特点 | 第22页 |
| ·表面增强拉曼散射技术 | 第22-24页 |
| ·表面增强拉曼散射简介 | 第22-24页 |
| ·表面增强拉曼散射在生物分析中的应用 | 第24页 |
| ·DNA循环放大技术 | 第24-30页 |
| ·滚环复制放大反应 | 第25-27页 |
| ·聚合酶链替代反应 | 第27页 |
| ·杂交链式反应 | 第27-28页 |
| ·链取代反应 | 第28-29页 |
| ·滚环转录 | 第29-30页 |
| ·立题依据及研究内容 | 第30-31页 |
| 2 滚环聚合和滚环转录联合放大检测miRNA | 第31-51页 |
| ·实验部分 | 第33-37页 |
| ·试剂 | 第33-34页 |
| ·溶液的配制 | 第34页 |
| ·酶及其缓冲液 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·金纳米粒子的制备 | 第34-35页 |
| ·金纳米粒子与DNA的连接 | 第35-36页 |
| ·磁珠上连接DNA | 第36页 |
| ·环探针的制备 | 第36页 |
| ·滚环聚合和滚环转录联合放大反应 | 第36页 |
| ·孔雀石绿与适体的结合 | 第36页 |
| ·拉曼信号的检测 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-50页 |
| ·金纳米粒子的表征 | 第37-38页 |
| ·金纳米粒子接DNA的紫外表征 | 第37页 |
| ·金纳米粒子的TEM表征 | 第37-38页 |
| ·反应原料及产物的电泳表征 | 第38-39页 |
| ·转录产物与孔雀石绿结合的激光共聚焦显微镜成像 | 第39-40页 |
| ·反应条件的优化 | 第40-41页 |
| ·反应时间的影响 | 第40页 |
| ·三种酶对信号的影响 | 第40-41页 |
| ·阶梯放大实验 | 第41-45页 |
| ·“只滚环转录”模式 | 第42-43页 |
| ·“不剪切”模式 | 第43-45页 |
| ·滚环聚合和滚环转录联合放大的拉曼信号 | 第45-46页 |
| ·荧光对比实验 | 第46-47页 |
| ·选择性实验 | 第47-48页 |
| ·生物基质和实际样品实验 | 第48-50页 |
| ·生物基质实验 | 第48-49页 |
| ·实际样品的拉曼响应 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 3 非线性树枝状杂交应用于拉曼检测方法的开发 | 第51-61页 |
| ·实验部分 | 第52-55页 |
| ·试剂 | 第52-53页 |
| ·仪器 | 第53页 |
| ·金纳米粒子的制备 | 第53页 |
| ·金纳米粒子与DNA的连接 | 第53-54页 |
| ·金片的洗涤 | 第54页 |
| ·A探针和B探针的制备 | 第54页 |
| ·树枝状杂交产物的形成 | 第54页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤 | 第54-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-59页 |
| ·金纳米粒子的表征 | 第55-56页 |
| ·金纳米粒子的紫外表征 | 第55-56页 |
| ·金纳米粒子的TEM表征 | 第56页 |
| ·纳米金生物条码的紫外表征 | 第56-57页 |
| ·反应原料和产物的电泳表征 | 第57-58页 |
| ·反应产物的拉曼响应 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 4 熵驱动和树枝状杂交联合检测miRNA | 第61-71页 |
| ·实验部分 | 第62-65页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·仪器 | 第63-64页 |
| ·金纳米粒子的制备 | 第64页 |
| ·金纳米粒子与DNA的连接 | 第64页 |
| ·金片的准备 | 第64页 |
| ·磁珠上接DNA | 第64页 |
| ·熵驱动杂交聚合 | 第64页 |
| ·A探针和B探针的制备 | 第64页 |
| ·转录和树枝状杂交 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-68页 |
| ·金纳米粒子的表征 | 第65-66页 |
| ·金纳米粒子的紫外表征 | 第65页 |
| ·金纳米粒子的电镜表征 | 第65-66页 |
| ·金纳米粒子接DNA的紫外表征 | 第66页 |
| ·反应产物的电泳表征 | 第66-67页 |
| ·可行性实验 | 第67-68页 |
| ·小结与展望 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第80-81页 |
