| 摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·硒与硒蛋白W | 第11-13页 |
| ·硒的作用 | 第11页 |
| ·硒蛋白W | 第11-13页 |
| ·RNA 干扰 | 第13-15页 |
| ·RNAi 的发现 | 第13-14页 |
| ·RNAi 的基本原理 | 第14页 |
| ·RNAi 现象的主要特征 | 第14-15页 |
| ·Stealth RNA | 第15页 |
| ·骨骼肌发育与再生 | 第15-17页 |
| ·Myo D 家族生肌调节因子 | 第16页 |
| ·MRFs 与其他因子共同实现成肌特异性 | 第16页 |
| ·MRFs 在成肌不同阶段的作用 | 第16页 |
| ·成肌细胞的最后分化 | 第16-17页 |
| ·试验的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂及配制 | 第18-20页 |
| ·试验方法 | 第20-26页 |
| ·鸡胚成肌细胞的原代培养及鉴定 | 第20-21页 |
| ·不同硒浓度对雏鸡和鸡胚成肌细胞的处理 | 第21-22页 |
| ·qPCR 对目的基因mRNA 水平检测方法的建立 | 第22-23页 |
| ·SelW RNAi 条件的优化及引物的筛选 | 第23-25页 |
| ·成肌细胞SelW RNAi 试验 | 第25页 |
| ·试验数据的统计与分析 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-39页 |
| ·鸡胚成肌细胞的原代培养及纯度鉴定 | 第26-27页 |
| ·鸡胚成肌细胞的形态学观察 | 第26页 |
| ·鸡胚成肌细胞增殖生长曲线 | 第26页 |
| ·鸡胚成肌细胞的免疫细胞化学染色鉴定 | 第26-27页 |
| ·qPCR 对目的基因mRNA 水平检测方法的建立 | 第27-28页 |
| ·总RNA 的抽提结果的鉴定 | 第27页 |
| ·SelW、Myf-5、Myogenin、MRF4、P21 及β-Actin 基因qPCR 方法的鉴定 | 第27-28页 |
| ·硒对雏鸡肌肉组织SelW 转录水平影响的检测结果 | 第28-29页 |
| ·硒对雏鸡翅肌组织中硒浓度和SelW mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第28-29页 |
| ·硒对雏鸡胸肌组织中硒浓度和SelW mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第29页 |
| ·硒对雏鸡腿肌组织中硒浓度和SelW mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第29页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞SelW 转录水平影响的检测结果 | 第29-31页 |
| ·SelW RNAi 条件的建立及引物的筛选结果 | 第31-36页 |
| ·S-RNA 序列的BLAST 比对结果 | 第31-34页 |
| ·S-RNA 的转染效率 | 第34-35页 |
| ·SelW S-RNA 干扰引物的筛选 | 第35-36页 |
| ·成肌细胞SelW RNAi 试验结果 | 第36-39页 |
| ·SelW RNAi 后成肌细胞SelW 转录水平的检测结果 | 第36页 |
| ·SelW RNAi 后MRFs 和P21 基因表达水平的检测结果 | 第36-37页 |
| ·SelW RNAi 后细胞总GSH 含量、细胞周期的检测结果 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-48页 |
| ·鸡胚成肌细胞的原代培养及鉴定 | 第39-40页 |
| ·肌成肌细胞的分离与纯化 | 第39页 |
| ·骨骼肌成肌细胞体外培养及生长特性 | 第39-40页 |
| ·分子水平骨骼肌成肌细胞的鉴定 | 第40页 |
| ·硒对雏鸡肌肉组织硒浓度和SelW 转录水平的影响 | 第40-41页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞SelW 转录水平的影响 | 第41-42页 |
| ·SelW RNAi 条件的建立和干扰引物的筛选 | 第42-44页 |
| ·S-RNA 的设计 | 第42页 |
| ·RNAi 中的转染效率的优化 | 第42-43页 |
| ·SelW 基因S-RNA 干扰引物的筛选 | 第43-44页 |
| ·SelW RNAi 对鸡胚成肌细胞生长分化的影响 | 第44-48页 |
| ·RNAi 对成肌细胞SelW 表达的影响 | 第44-45页 |
| ·RNAi 对成肌细胞成肌调节因子表达的影响 | 第45-46页 |
| ·SelW RNAi 对成肌细胞细胞周期的影响 | 第46页 |
| ·SelW RNAi 对成肌细胞GSH 含量的影响 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
