| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·WRKY 转录因子简介 | 第10-17页 |
| ·WRKY 转录因子的起源及国内外研究现状 | 第10-11页 |
| ·WRKY 转录因子结构特点及其分类 | 第11-12页 |
| ·WRKY 转录因子的生物学功能 | 第12-14页 |
| ·WRKY 转录因子的作用机理 | 第14-17页 |
| ·棉花黄萎病致病菌 | 第17-19页 |
| ·烟草野火病菌致病菌 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 棉花转录因子 GhWRKY31 基因克隆及其序列分析 | 第22-34页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验材料和方法 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·试剂与酶 | 第22页 |
| ·常用抗生素与激素的配置 | 第22-23页 |
| ·模板与引物 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·仪器与设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·GhWRKY31 转录因子基因的扩增 | 第23-27页 |
| ·序列分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·总 RNA 的提取和棉花 GhWRKY31 基因 EST 片段的扩增 | 第28页 |
| ·棉花 GhWRKY31 基因克隆 | 第28-29页 |
| ·棉花 GhWRKY31 基因氨基酸序列分析 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 干扰 GhWRKY31 基因表达对棉花抗黄萎病的影响 | 第34-43页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·供试材料 | 第34页 |
| ·菌株与载体 | 第34页 |
| ·试剂与酶 | 第34-35页 |
| ·模板与引物 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·仪器与设备 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第36页 |
| ·带有酶切位点的 GhWRKY31(E)基因扩增与回收 | 第36页 |
| ·pYL156 双酶切及酶切产物回收 | 第36页 |
| ·GhWRKY31(E)双酶切及酶切产物回收 | 第36-37页 |
| ·目的基因与病毒载体 pYL156 的连接 | 第37页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第37页 |
| ·pYL156-GhWRKY31(E)质粒提取 | 第37页 |
| ·转化农杆菌 GV310128 | 第37-38页 |
| ·病毒表达载体 pYL156-GhWRKY31(E)的酶切鉴定及测序 | 第38页 |
| ·VIGS 植株的获得及黄萎病菌的接种 | 第38页 |
| ·干扰植株对黄萎病抗性检测 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·棉花总 RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·病毒干扰载体 pYL156-GhWRKY31（E）的构建 | 第39页 |
| ·棉花 VIGS 植株的表型观察 | 第39-40页 |
| ·棉花 VIGS 植株的 pYL156 病毒 PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 GhWRKY31 基因表达载体构建及烟草遗传转化 | 第43-60页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-46页 |
| ·菌株与载体 | 第43页 |
| ·试剂与酶 | 第43页 |
| ·常用抗生素与激素的配置 | 第43-44页 |
| ·模板与引物 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44-46页 |
| ·仪器与设备 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-52页 |
| ·带有酶切位点的 GhWRKY31 转录因子基因的扩增 | 第46页 |
| ·克隆载体 pGEM-T-GhWRKY31 的构建及序列检测 | 第46页 |
| ·pGEM-T-GhWRKY31 质粒提取 | 第46页 |
| ·pGEM-T-GhWRKY31 质粒双酶切鉴定及酶切产物回收 | 第46页 |
| ·pBin438 质粒双酶切及酶切产物回收 | 第46-47页 |
| ·目的基因和 pBin438 质粒的连接 | 第47页 |
| ·连接产物转化感受态大肠杆菌 | 第47页 |
| ·真核表达载体 pBin438- GhWRKY31 的酶切鉴定 | 第47页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·农杆菌的电击转化 | 第48页 |
| ·烟草无菌苗的培养 | 第48页 |
| ·烟草转化 | 第48-49页 |
| ·转基因烟草植株筛选 | 第49-51页 |
| ·转基因烟草植株抗病性研究 | 第51页 |
| ·转基因烟草植株抗盐性研究 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·重组质粒 pGEM-T-GhWRKY31 的构建与分析 | 第52页 |
| ·真核表达载体 pBin438- GhWRKY31 的构建与分析 | 第52-53页 |
| ·工程菌的制备及 PCR 鉴定 | 第53页 |
| ·烟草转化结果 | 第53-55页 |
| ·转基因烟草抗病性测定 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草抗盐性检测 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第五章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
| 司怀军导师简介 | 第74-75页 |
| 吴家和导师简介 | 第75-76页 |
