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1,3-丙二醇氧化还原酶酶促动力学研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 绪论第10-22页
   ·1,3-丙二醇第10-11页
     ·1,3-丙二醇的应用第10-11页
     ·1,3-丙二醇的生产方法第11页
   ·甘油转化为1,3-丙二醇的代谢途径第11-12页
   ·1,3-丙二醇氧化还原酶第12-13页
   ·酶促反应动力学第13-19页
     ·酶促反应动力学的特点第13页
     ·酶的抑制作用模型第13-16页
     ·双底物反应的动力学模型第16-18页
     ·酶促反应动力学参数测定方法第18-19页
   ·PDOR 酶促动力学反应模型研究现状第19-20页
   ·选题目的及意义第20页
   ·研究内容第20-22页
第2章 实验方法和材料第22-29页
   ·实验药品与仪器第22-23页
     ·实验药品第22页
     ·实验仪器第22-23页
   ·实验方法第23-29页
     ·Klebsiella pneumonise 基因组DNA 的提取第23-24页
     ·PCR 产物的回收方法第24页
     ·PCR 产物与pMD18–T–Simple 克隆质粒的连接方法第24页
     ·热冲击法转化大肠杆菌第24-25页
     ·无细胞粗提液第25页
     ·酶活分析方法第25页
     ·蛋白质的测定第25-26页
     ·SDS-PAGE 电泳和PDOR 蛋白含量第26页
     ·气相色谱法分析3–HPA第26-27页
     ·醛基总含量测定-色氨酸-盐酸法(Try–HCl)第27页
     ·NADH 和NAD+含量的测定第27页
     ·酶促反应初速度测定第27-29页
第3章 PROR 的克隆、表达与纯化第29-42页
   ·概述第29页
   ·克隆基因dhaT 并构建表达质粒第29-32页
     ·dhaT 基因的克隆第29-30页
     ·PCR 产物的克隆与测序第30页
     ·dhaT 的表达质粒pDK-dhaT 的构建第30-32页
   ·PDOR 的表达第32-34页
     ·PDOR 基因dhaT 在E.coli DH5α中表达第32-33页
     ·发酵培养E.coli DH5α(pDK-dhaT)菌体第33-34页
   ·1,3-丙二醇氧化还原酶的纯化第34-41页
     ·硫酸铵沉淀法第34-35页
     ·凝胶过滤层析第35-37页
     ·阴离子交换层析第37-40页
     ·硫酸铵沉淀-Sephadex G-200-DE23 Cellulose第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第4章 丙烯醛水合法制3-羟基丙醛第42-52页
   ·概述第42-44页
     ·3-羟基丙醛的物理和化学性质第42页
     ·3-HPA 水溶液体系第42-44页
   ·3-HPA 的制备第44-45页
   ·气相色谱方法的建立第45-47页
     ·柱子与内标物的选择第45-46页
     ·合成3-HPA 溶液各组分初步定性分析实验第46-47页
   ·3-HPA 的合成条件优化第47-48页
   ·萃取提纯3-HPA 实验研究第48-51页
     ·3-HPA 在正丁醇、乙酸乙酯和正己烷中的溶解性第48-49页
     ·3-HPA 在乙酸乙酯和水中的分配第49-50页
     ·反萃实验第50-51页
   ·结论第51-52页
第5章 PDOR 动力学模型的建立及计算第52-71页
   ·概述第52页
   ·PDOR 动力学模型建立第52-55页
   ·PDOR 动力学模型求解方法第55-61页
     ·动力学模型求解步骤第55-57页
     ·实验方法第57-58页
     ·实验第58-61页
   ·结果与讨论第61-70页
     ·酶浓度与初速度关系第61-63页
     ·正、逆反应非抑制区域的确定第63-65页
     ·PDOR 动力学模型中参数计算第65-69页
     ·PDOR 动力学模型的验证第69-70页
   ·本章小结第70-71页
结论第71-72页
参考文献第72-77页
攻读硕士学位期间承担的科研任务和主要成果第77-78页
致谢第78-79页
作者简介第79页

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