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基于荚膜及外毒素的免疫策略防治金黄色葡萄球菌感染效果研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
缩略词表第10-17页
引言第17-19页
1 绪论第19-46页
   ·金黄色葡萄球菌荚膜第19-23页
     ·金黄色葡萄球菌简介第19页
     ·5型和8型荚膜第19-21页
     ·5型和8型荚膜的毒力第21-23页
     ·5型和8型荚膜多糖在动物模型中的保护作用第23页
   ·金黄色葡萄球菌毒素及其作为疫苗在动物模型中的保护作用第23-26页
     ·α-毒素第24-25页
     ·PVL-杀白细胞素第25-26页
   ·本研究涉及的金黄色葡萄球菌感染及其免疫防治策略研究进展第26-43页
     ·金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎第26-34页
       ·金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎简介第26-28页
       ·金黄色葡萄球菌性乳房炎疫苗研究进展第28-30页
       ·卵黄抗体(IgY)简介第30-32页
       ·卵黄抗体在家畜疾病防治中的应用第32-34页
     ·人类主要的金黄色葡萄球菌感染第34-43页
       ·金黄色葡萄球菌菌血症和心内膜炎概述第34-35页
       ·金黄色葡萄球菌肺炎概述第35页
       ·人用金黄色葡萄球菌疫苗研究进展第35-43页
   ·论文选题依据及研究内容第43-46页
     ·选题依据第43页
     ·研究内容第43-46页
2 金黄色葡萄球菌荚膜及外毒素特异性IGY治疗奶牛乳房炎效果研究第46-68页
   ·金黄色葡萄球菌荚膜特异性IgY的制备及体外活性研究第46-58页
     ·引言第46页
     ·实验材料第46-48页
     ·实验方法第48-50页
       ·三种荚膜血清型全菌抗原的获得第48页
       ·蛋鸡免疫第48-49页
       ·检测卵黄中特异性IgY水平第49页
       ·检测三种IgY的荚膜特异性(ELISA)第49页
       ·大规模分离纯化IgY第49页
       ·纯化IgY的SDS-PAGE第49-50页
       ·荚膜特异性IgY的体外抑菌实验第50页
       ·细菌侵袭乳腺上皮细胞(MAC-T细胞)实验第50页
     ·实验结果第50-55页
       ·金黄色葡萄球菌全菌疫苗免疫后IgY水平变化第50-51页
       ·纯化IgY的SDS-PAGE第51-52页
       ·荚膜特异性IgY的体外抑菌效果第52-53页
       ·三种IgY对金黄色葡萄球菌荚膜的特异性(交叉反应)第53-54页
       ·三种荚膜特异性IgY阻断金黄色葡萄球菌入侵MAC-T细胞第54-55页
     ·讨论第55-57页
     ·小结第57-58页
   ·金黄色葡萄球菌外毒素及荚膜特异性卵黄抗体联合治疗临床型乳房炎效果第58-68页
     ·引言第58页
     ·实验材料第58-60页
     ·实验方法第60-62页
       ·金黄色葡萄球菌外毒素的分离第60页
       ·蛋鸡免疫第60页
       ·检测卵黄中抗毒素IgY水平变化第60页
       ·抗外毒素IgY的分离纯化及其SDS-PAGE第60页
       ·牛外周血嗜中性粒细胞(PMNs)的分离第60-61页
       ·乳酸脱氢酶(LDH)实验检测IgY对奶牛细胞的保护作用第61页
       ·细菌侵袭乳腺上皮细胞(MAC-T)实验第61-62页
       ·临床型乳房炎实验第62页
     ·实验结果第62-66页
       ·卵黄中抗外毒素IgY水平的变化第62-63页
       ·抗外毒素IgY的SDS-PAGE第63页
       ·抗外毒素IgY有效中和外毒素对牛PMNs和MAC-T细胞的裂解第63-64页
       ·抗外毒素及荚膜IgY联合使用有效阻断金葡菌入侵MAC-T细胞第64-65页
       ·抗外毒素及荚膜IgY联合使用对临床型乳房炎的治疗效果第65-66页
     ·讨论第66-67页
     ·小结第67-68页
3 金黄色葡萄球菌荚膜多糖-外毒素生物结合疫苗预防人类感染疾病效果研究第68-124页
   ·荚膜多糖-外毒素生物结合疫苗体外功能性研究第68-82页
     ·引言第68-69页
     ·实验材料第69-70页
       ·人永生化PMNs(HL60细胞系)调理吞噬杀伤实验所用材料第69页
       ·人原代PMNs调理吞噬杀伤实验所用材料第69-70页
       ·毒素中和实验所用材料第70页
     ·实验方法第70-74页
       ·人HL60细胞系调理吞噬杀伤实验第70-72页
       ·人原代PMNs调理吞噬杀伤实验第72-73页
       ·毒素中和实验方法第73-74页
     ·实验结果第74-80页
       ·抗体αCP5-Epa,αCP5-Hla,αCP8-Epa调理金葡菌被HL60噬杀第74-75页
       ·抗体αCP5-Epa有效调理金黄色葡萄球菌被原代PMNs噬杀第75-77页
       ·抗体αCP5-Epa对荚膜的特异性第77-78页
       ·特异性抗血清(鼠抗)有效调理杀伤金黄色葡萄球菌第78-79页
       ·抗体α CP5-Hla有效中和金黄色葡萄球菌α-毒素的细胞毒作用第79-80页
     ·讨论第80-81页
     ·小结第81-82页
   ·荚膜多糖生物结合疫苗对系统性感染-菌血症的预防效果第82-101页
     ·引言第82页
     ·实验材料第82-83页
     ·实验方法第83-87页
       ·本实验中佐剂(铝剂)的选择依据第83-84页
       ·主动免疫方法第84-85页
       ·应用ELISA检测荚膜多糖特异性抗体第85-86页
       ·被动免疫方法第86-87页
       ·小鼠菌血症模型的建立第87页
     ·实验结果第87-99页
       ·主动免疫CP5-Epa的最佳剂量为0.2μg CP5-2 μg Epa第87-88页
       ·主动免疫CP5-Epa对菌血症的预防效果第88-90页
       ·被动免疫αCP5-Epa对菌血症的预防效果第90-92页
       ·主动免疫CP5-Hla对菌血症的预防效果第92-96页
       ·被动免疫α CP5-Hla对菌血症的预防效果第96-97页
       ·主动及被动免疫CP8-Epa对菌血症的预防效果第97-99页
     ·讨论第99-100页
     ·小结第100-101页
   ·多糖-外毒素生物结合疫苗对局部感染-肺炎的预防效果第101-114页
     ·引言第101页
     ·实验材料第101-102页
     ·实验方法第102-104页
       ·小鼠肺炎模型的建立第102-103页
       ·T细胞剔除实验第103-104页
     ·实验结果第104-112页
       ·主动免疫CP5-Hla对致死性肺炎的预防效果第104-106页
       ·单剂被动免疫αCP5-Hla对肺炎的预防效果第106-107页
       ·主动免疫CP5-Hla预防肺炎过程中T细胞的作用第107-111页
       ·双剂被动免疫αCP5-Hla对肺炎的保护效果第111页
       ·金黄色葡萄球菌荚膜在肺炎中的毒力研究第111-112页
     ·讨论第112-113页
     ·小结第113-114页
   ·抗CP5-Hla特异性抗体对导管所致感染-心内膜炎的预防效果第114-124页
     ·引言第114页
     ·实验材料第114-115页
     ·实验方法第115-117页
     ·实验结果第117-122页
       ·攻毒前24h静脉注射1mg的α CP5-Hla的保护效果第117-119页
       ·攻毒前24h腹腔注射15mg的αCP5-Hla的保护效果第119-122页
     ·讨论第122-123页
     ·小结第123-124页
4 结论与展望第124-126页
   ·结论第124页
   ·创新点摘要第124-125页
   ·展望第125-126页
参考文献第126-139页
附录A 本研究使用的仪器第139-141页
附录B 图S1-S4第141-144页
附录C 本研究中所用的统计学方法第144-145页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第145-148页
致谢第148-149页
作者简介第149-150页

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