致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
1 文献综述: | 第13-26页 |
·模式植物拟南芥 | 第13-18页 |
·拟南芥研究计划 | 第15页 |
·拟南芥主要研究策略 | 第15-16页 |
·拟南芥功能基因组学研究技术 | 第16-17页 |
·拟南芥研究成果 | 第17-18页 |
·拟南芥磷胁迫研究进展 | 第18-22页 |
·植物低磷胁迫反应 | 第18-19页 |
·植物应对低磷的分子机理 | 第19-20页 |
·拟南芥磷饥饿主要突变体 | 第20-21页 |
·拟南芥磷调控网络 | 第21-22页 |
·拟南芥转录因子研究进展 | 第22-26页 |
·转录因子概述 | 第22-23页 |
·拟南芥基因组中的转录因子家族 | 第23-24页 |
·MADs-box 转录因子家族 | 第24-25页 |
·磷调控转录因子及其功能 | 第25-26页 |
2 引言 | 第26-27页 |
3 At5g55690 过量表达突变株生理测定 | 第27-36页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·植物材料 | 第27页 |
·种子消毒及培养条件 | 第27页 |
·转基因植株的检测 | 第27-28页 |
·秧苗水培及收获 | 第28-29页 |
·RNA 制备和 RT-PCR | 第29-31页 |
·磷含量测定 | 第31页 |
·实验结果 | 第31-36页 |
·拟南芥水培实验体系 | 第31页 |
·转基因植株鉴定 | 第31-32页 |
·突变株at5g55690 基因表达分析 | 第32-33页 |
·过量表达at5g55690 基因促进了拟南芥营养生长 | 第33-34页 |
·过量表达at5g55690 促进了低磷条件下拟南芥的生长 | 第34页 |
·过量表达at5g55690 促进了拟南芥对磷的吸收,并影响磷在地上部 | 第34-35页 |
·过量表达at5g55690 降低了拟南芥对低磷胁迫的生理反应的敏感性 | 第35-36页 |
4 酒精诱导at5g55690 基因过量表达拟南芥突变株酒精诱导体系建立 | 第36-40页 |
·材料与方法 | 第36-38页 |
·植物材料及培养条件 | 第36-37页 |
·种子消毒及培养条件 | 第37页 |
·酒精诱导体系 | 第37-38页 |
·RT-PCR | 第38页 |
·结果 | 第38-40页 |
·酒精诱导体系建立 | 第38-39页 |
·酒精诱导At5g55690 基因过量表达突变株形态观测 | 第39页 |
·最佳酒精诱导体系确立 | 第39-40页 |
5 AGL47 蛋白原核表达分析 | 第40-46页 |
·材料与方法 | 第40-42页 |
·材料 | 第40-41页 |
·PCR 引物 | 第41页 |
·AGL47 融合蛋白表达表达载体构建 | 第41页 |
·融合蛋白诱导表达 | 第41-42页 |
·包涵体纯化 | 第42页 |
·包涵体变性、复性 | 第42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·AGL47 融合蛋白表达载体构建 | 第42-45页 |
·AGL47 融合蛋白诱导表达 | 第45-46页 |
·AGL47 融合蛋白可溶性鉴定,复性及纯化 | 第46页 |
6 结论与讨论 | 第46-48页 |
·At5g55690 基因在拟南芥磷调控中发挥重要作用 | 第46-47页 |
·酒精诱导突变株实验体系 | 第47-48页 |
·AGL47 原核诱导表达 | 第48页 |
参考文献 | 第48-58页 |
附录主要试剂的配制(J.萨姆布鲁克等,1992) | 第58-61页 |
附录1 实验相关溶液及培养基的配制 | 第58-59页 |
·碱裂解法提取质粒相关溶液的配制 | 第58页 |
·SDS-PAGE 相关溶液配制 | 第58页 |
·SDS-PAGE 缓冲液的配制 | 第58-59页 |
·LB 培养基 | 第59页 |
附录2 基本分子生物学方法 | 第59-61页 |
·SDS 碱裂解法小量制备质粒 DNA | 第59-60页 |
·氯化钙制备感受态大肠杆菌 | 第60页 |
·转化感受态大肠杆菌 | 第60-61页 |
·SDS-PAGE 胶配制 | 第61页 |
·酶切体系 | 第61页 |
·酶连体系 | 第61页 |