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拟南芥磷调控转录因子at5g55690基因功能分析

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1 文献综述:第13-26页
   ·模式植物拟南芥第13-18页
     ·拟南芥研究计划第15页
     ·拟南芥主要研究策略第15-16页
     ·拟南芥功能基因组学研究技术第16-17页
     ·拟南芥研究成果第17-18页
   ·拟南芥磷胁迫研究进展第18-22页
     ·植物低磷胁迫反应第18-19页
     ·植物应对低磷的分子机理第19-20页
     ·拟南芥磷饥饿主要突变体第20-21页
     ·拟南芥磷调控网络第21-22页
   ·拟南芥转录因子研究进展第22-26页
     ·转录因子概述第22-23页
     ·拟南芥基因组中的转录因子家族第23-24页
     ·MADs-box 转录因子家族第24-25页
     ·磷调控转录因子及其功能第25-26页
2 引言第26-27页
3 At5g55690 过量表达突变株生理测定第27-36页
   ·材料与方法第27-31页
     ·植物材料第27页
     ·种子消毒及培养条件第27页
     ·转基因植株的检测第27-28页
     ·秧苗水培及收获第28-29页
     ·RNA 制备和 RT-PCR第29-31页
     ·磷含量测定第31页
   ·实验结果第31-36页
     ·拟南芥水培实验体系第31页
     ·转基因植株鉴定第31-32页
     ·突变株at5g55690 基因表达分析第32-33页
     ·过量表达at5g55690 基因促进了拟南芥营养生长第33-34页
     ·过量表达at5g55690 促进了低磷条件下拟南芥的生长第34页
     ·过量表达at5g55690 促进了拟南芥对磷的吸收,并影响磷在地上部第34-35页
     ·过量表达at5g55690 降低了拟南芥对低磷胁迫的生理反应的敏感性第35-36页
4 酒精诱导at5g55690 基因过量表达拟南芥突变株酒精诱导体系建立第36-40页
   ·材料与方法第36-38页
     ·植物材料及培养条件第36-37页
     ·种子消毒及培养条件第37页
     ·酒精诱导体系第37-38页
     ·RT-PCR第38页
   ·结果第38-40页
     ·酒精诱导体系建立第38-39页
     ·酒精诱导At5g55690 基因过量表达突变株形态观测第39页
     ·最佳酒精诱导体系确立第39-40页
5 AGL47 蛋白原核表达分析第40-46页
   ·材料与方法第40-42页
     ·材料第40-41页
     ·PCR 引物第41页
     ·AGL47 融合蛋白表达表达载体构建第41页
     ·融合蛋白诱导表达第41-42页
     ·包涵体纯化第42页
     ·包涵体变性、复性第42页
   ·结果第42-46页
     ·AGL47 融合蛋白表达载体构建第42-45页
     ·AGL47 融合蛋白诱导表达第45-46页
     ·AGL47 融合蛋白可溶性鉴定,复性及纯化第46页
6 结论与讨论第46-48页
   ·At5g55690 基因在拟南芥磷调控中发挥重要作用第46-47页
   ·酒精诱导突变株实验体系第47-48页
   ·AGL47 原核诱导表达第48页
参考文献第48-58页
附录主要试剂的配制(J.萨姆布鲁克等,1992)第58-61页
 附录1 实验相关溶液及培养基的配制第58-59页
   ·碱裂解法提取质粒相关溶液的配制第58页
   ·SDS-PAGE 相关溶液配制第58页
   ·SDS-PAGE 缓冲液的配制第58-59页
   ·LB 培养基第59页
 附录2 基本分子生物学方法第59-61页
   ·SDS 碱裂解法小量制备质粒 DNA第59-60页
   ·氯化钙制备感受态大肠杆菌第60页
   ·转化感受态大肠杆菌第60-61页
   ·SDS-PAGE 胶配制第61页
   ·酶切体系第61页
   ·酶连体系第61页

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